HDAOS是生化試劑盒中常用的顯色試劑，同樣TMB也是應(yīng)用普遍的顯色試劑，那么這兩種試劑作為顯色試劑哪個(gè)更好呢？其實(shí)兩種不存在哪個(gè)好，主要是應(yīng)用上有一些區(qū)別，選擇合適的顯色試劑即可。
HDAOS的物化性質(zhì)
HDAOS是新型Trinder’s試劑中的一種，CAS號(hào)：82692-88-4，全稱N-(2-羥基-3-磺丙基)-3'5-二甲氧基苯胺鈉鹽。HDAOS在過(guò)氧化物酶存在的情況下，可以與4-AAP耦聯(lián)被過(guò)氧化氫氧化，該反應(yīng)非常靈敏。所以HDAOS通常被用于有過(guò)氧化物酶參與或H2O2參與的生化檢測(cè)中，比如血清總膽固醇的檢測(cè)、血脂檢測(cè)等。
TMB試劑的物化性質(zhì)
它是一種用于ELISA試劑盒中的一種色原底物，應(yīng)用很普遍。TMB，即3,3’,5,5’-Tetramethylbenzidine，是辣根過(guò)氧化物酶(horseradish peroxidase, HRP)的最常用底物之一。在辣根過(guò)氧化物酶或其它適當(dāng)過(guò)氧化物酶的催化下，TMB會(huì)產(chǎn)生可溶性藍(lán)色產(chǎn)物，該藍(lán)色產(chǎn)物通?？梢栽?/span>370nm或620-650nm測(cè)定吸光度。由于辣根過(guò)氧化物酶與TMB的反應(yīng)在一定時(shí)間內(nèi)能持續(xù)進(jìn)行，若不及時(shí)終止反應(yīng)，可能會(huì)由于反應(yīng)達(dá)到平臺(tái)期等而影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
HDAOS試劑的優(yōu)勢(shì)
生化檢測(cè)中應(yīng)用的色原底物很多，HDAOS是一種酶分析法，靈敏度很高，需要的設(shè)備簡(jiǎn)單。比如普遍采用色原底物HDAOS的酶法測(cè)定總膽固醇，其優(yōu)點(diǎn)是快速準(zhǔn)確、專一性強(qiáng)、樣本用量少、不需抽提，便于自動(dòng)化分析和批量測(cè)定（氣相和高效液相色譜法條件要求高）。
HDAOS與過(guò)氧化氫反應(yīng)時(shí)需要與4-AAP耦聯(lián)，而TMB是不用的，不過(guò)HDAOS的顯色產(chǎn)物吸收波長(zhǎng)要遠(yuǎn)大于TMB的產(chǎn)物吸收波長(zhǎng)，這樣干擾會(huì)更少一些。目前我們生產(chǎn)的色原底物除了HDAOS之外，總共有是多種，比如ADPS、TOPS、DA64等等。