小鼠中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶(NAP）產(chǎn)品介紹
【試劑盒參數(shù)】
中文名稱：小鼠中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶(NAP）檢測試劑盒（ELISA法）
產(chǎn)品規(guī)格：48孔/盒 96孔/盒
品??牌：臻科研
檢測方法：酶聯(lián)免疫法
檢測時(shí)間：2-3H
獨(dú)特優(yōu)勢：靈敏度高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好
用 途 ：科研實(shí)驗(yàn)專用，不得用于臨床診斷。
貨期供應(yīng)：2個(gè)工作日
存 儲 ：2～8℃保鮮冷藏，切勿冷凍
保質(zhì)期 ：6個(gè)月;生產(chǎn)日期、有效期、生產(chǎn)批號見外包裝。
【小鼠中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶(NAP））檢測試劑盒（ELISA法）實(shí)驗(yàn)原理】
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被小鼠中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶(NAP））捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶(NAP））呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計(jì)算樣品含量。
【試劑盒組成】
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【產(chǎn)品展示】
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【樣本處理及要求】
1. 血清：將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2小時(shí)或4℃過夜，然后1000×g離心20 分鐘，取上清即可，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2. 血漿：用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本，并將標(biāo)本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃ 1000×g離心15分鐘，取上清即可檢測，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3. 組織勻漿：用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細(xì)胞會影響測量結(jié)果），稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS（一般按1:9的重量體積比，比如1g的組織樣品對應(yīng)9mL的PBS，具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整，并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞，可以對勻漿液進(jìn)行超聲破碎，或反復(fù)凍融。最后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘，取上清檢測。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)物上清：請1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
5. 其它生物標(biāo)本：1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測。
【操作步驟】
1．從室溫平衡60min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2．設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL。
3．樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。樣本不足，或者樣本濃度過高，可用樣本稀釋液做稀釋。
4. ?除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5．棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）。
6. ?每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7. ?每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。
【試劑盒性能】
靈敏度：最低檢測濃度小于1.0ng/mL（具體以實(shí)際說明書為準(zhǔn)）。
特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。
重復(fù)性：板內(nèi)變異系數(shù)小于10% ，板間變異系數(shù)小于15% 。
訂購我司任意一款ELISA試劑盒都可享受免費(fèi)代測服務(wù)（代測確保數(shù)據(jù)真實(shí)可靠且保密不會透露給第三方），收到樣本7個(gè)工作日出結(jié)果，具體可以咨詢我司客服人員。）產(chǎn)品保證質(zhì)量有任何質(zhì)量問題包退換，歡迎大家前來選購。
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