一、內(nèi)容概要
Elabscience 推出未包被人腫瘤壞死因子β(TNF-β) elisa試劑盒(貨號:
E-UNEL-H0389),采用雙抗體夾心檢測模式,面向具備成熟 ELISA 實驗操作經(jīng)驗的科研人員,支持自主優(yōu)化全套實驗條件,可體外定量檢測人血清、血漿及各類生物體液中的 TNF-β 濃度。試劑盒提供兩種主流規(guī)格,配套完整 ELISA 核心實驗組分,檢測區(qū)間 15.63–1000 pg/mL,靈敏度可達 3.81 pg/mL,檢測重復性、樣本回收率表現(xiàn)穩(wěn)定,適配腫瘤免疫、自身免疫病、炎癥機制、新藥藥效評價等多方向科研項目,兼顧實驗靈活性與長期使用成本控制。
二、TNF-β 研究背景介紹
腫瘤壞死因子 β(TNF-β,又稱淋巴毒素 LTA)是 TNF 超家族關(guān)鍵淋巴因子,主要由活化 T、B 淋巴細胞分泌,通過 TNFR1、TNFR2 受體介導多條信號通路,同步參與免疫穩(wěn)態(tài)、慢性炎癥、細胞凋亡、淋巴器官發(fā)育等多重生理病理過程。
自身免疫疾病:類風濕關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者外周體液 TNF-β 表達顯著上調(diào),協(xié)同 TNF-α 促進滑膜增生、自身抗體生成,介導骨關(guān)節(jié)與多臟器損傷,是評估炎癥活動度的重要標志物;
腫瘤微環(huán)境:TNF-β 具備雙向調(diào)控效應,既可直接誘導腫瘤細胞凋亡發(fā)揮抑癌作用,也可通過激活 NF-κB 通路促進腫瘤血管新生、腫瘤細胞侵襲轉(zhuǎn)移,是腫瘤轉(zhuǎn)移、免疫逃逸機制研究核心靶點;
感染與慢性炎癥:細菌、病毒感染引發(fā)的全身炎癥反應中,TNF-β 同步釋放,參與急性期免疫應答,可用于區(qū)分感染輕重程度;
藥物研發(fā):靶向 TNF 通路抗炎、抗腫瘤候選藥物研發(fā)中,體液 TNF-β 定量是藥效評價、劑量篩選的核心檢測指標。
傳統(tǒng)預包被試劑盒實驗流程固定,難以適配個性化條件摸索;而本款未包被試劑盒開放全部實驗參數(shù),便于研究者建立專屬標準化檢測方案,為 TNF-β 相關(guān)機制研究提供穩(wěn)定檢測工具。
三、產(chǎn)品基礎(chǔ)信息介紹
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四、檢測原理
未包被人腫瘤壞死因子β(TNF-β) elisa試劑盒采用雙抗體夾心 ELISA 法完成定量檢測,完整反應流程如下:
實驗人員使用試劑盒內(nèi)捕獲抗體自行包被酶標板,低溫孵育過夜后封閉非特異性結(jié)合位點;
向孔內(nèi)加入梯度標準品或待測生物樣本,樣本中 TNF-β 抗原與固相捕獲抗體特異性結(jié)合;
洗去未結(jié)合雜質(zhì)后,加入生物素化抗人 TNF-β 檢測抗體,形成 “捕獲抗體 - TNF-β- 生物素標記檢測抗體” 免疫復合物;
加入 HRP 標記親和素,依靠生物素 - 親和素特異性結(jié)合連接酶標記物,再次洗板去除游離酶結(jié)合物;
加入 TMB 顯色底物,在 HRP 催化下底物呈藍色,室溫 37℃避光孵育 15 min;
終止液終止顯色反應,溶液轉(zhuǎn)為黃色;酶標儀 450 nm 波長讀取各孔 OD 值;
TNF-β 濃度與 OD450 數(shù)值呈正向線性相關(guān),通過標準曲線擬合計算樣本內(nèi) TNF-β 精確含量。
五、標準化操作步驟
包被:每孔添加 100 μL 捕獲抗體工作液,2–8℃孵育過夜;棄液后加入 200 μL 封閉液,37℃封閉 60 min;
抗原結(jié)合:甩干封閉液,每孔加入 100 μL 標準品或待測樣本,37℃孵育 90 min;
一抗結(jié)合:棄液后直接加入 100 μL 生物素化抗體工作液,37℃孵育 60 min;
洗板:棄液,洗板 3 次;
酶結(jié)合:每孔 100 μL HRP 親和素工作液,37℃孵育 30 min,棄液后洗板 5 次;
顯色:每孔 90 μL TMB 底物,37℃避光反應 15 min;
終止讀數(shù):加入 50 μL 終止液混勻,即刻 450 nm 測定 OD 值,繪制標準曲線計算樣本濃度。
六、核心應用領(lǐng)域
1. 基礎(chǔ)免疫學研究
T/B 淋巴細胞活化分化、淋巴器官發(fā)育、免疫耐受調(diào)控、固有免疫與適應性免疫交互機制探究,定量細胞上清、外周體液 TNF-β 表達水平。
2. 腫瘤免疫與轉(zhuǎn)移機制
乳腺癌、肺癌、肝癌等實體瘤微環(huán)境研究,分析 TNF-β 調(diào)控腫瘤骨轉(zhuǎn)移、免疫逃逸、腫瘤細胞凋亡的分子通路;臨床腫瘤患者血清標志物篩查、預后相關(guān)性分析。
3. 自身免疫與炎癥疾病
類風濕關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、干燥綜合征、慢性腸炎等模型動物 / 臨床樣本檢測,監(jiān)測疾病炎癥活動度,探究 TNF-β 作為炎癥靶點的作用通路。
4. 抗感染免疫研究
細菌、病毒慢性感染模型,檢測感染進程中 TNF-β 動態(tài)表達,評估機體抗感染免疫應答強度。
5. 新藥研發(fā)與藥效評價
抗炎、抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)候選藥物體外細胞實驗、體內(nèi)動物藥效驗證;生物制劑靶向 TNF 通路的劑量梯度、給藥周期效果監(jiān)測。
6. 臨床生物標志物探索
大批次臨床血清、血漿樣本隊列篩查,挖掘 TNF-β 在腫瘤、自身免疫病中的診斷、預后輔助參考指標。
七、產(chǎn)品核心優(yōu)勢
1. 實驗自由度高,支持體系自主優(yōu)化
未預包被設(shè)計,全套核心抗體、底物、標準品獨立提供,科研人員可自主調(diào)整包被抗體濃度、孵育時長、封閉條件、洗板次數(shù)等參數(shù),適配個性化實驗方案,不受成品試劑盒固定流程限制,適合方法學摸索、條件優(yōu)化類課題。
2. 長期使用成本可控,適配高通量實驗
相比預包被成品試劑盒,無預制酶標板附加成本,分 5 板、15 板兩種批量規(guī)格,長期高頻次檢測可降低單次實驗耗材支出,適合實驗室長期開展 TNF-β 批量檢測。
3. 檢測性能穩(wěn)定,低豐度樣本可檢出
靈敏度 3.81 pg/mL,檢測下限低,可捕捉體液中低表達 TNF-β;15.63–1000 pg/mL 寬線性區(qū)間,減少樣本反復稀釋操作;板內(nèi)、板間 CV<10%,加標回收率 80%–120%,數(shù)據(jù)重復性、基質(zhì)兼容性表現(xiàn)平穩(wěn)。
4. 特異性良好,減少結(jié)果干擾
配對特異性抗人 TNF-β 雙抗體系,與 TNF-α、IL 家族等同源促炎因子無明顯交叉反應,降低非特異性顯色帶來的數(shù)據(jù)偏差。
5. 樣本兼容廣泛,操作門檻友好
血清、血漿、細胞上清、腦脊液等多種生物體液均可直接檢測;采用通用 TMB 比色法,常規(guī)實驗室酶標儀即可完成讀數(shù),配套完整操作流程,具備基礎(chǔ) ELISA 操作經(jīng)驗即可上手。
6. 配套體系完善,實驗一站式配齊
可搭配同品牌 ELISA 輔助組分試劑盒,統(tǒng)一封閉液、濃縮洗滌液、稀釋液等通用試劑,試劑匹配度高,減少不同品牌試劑混用帶來的實驗誤差。
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總結(jié)
Elabscience 未包被人腫瘤壞死因子β(TNF-β) elisa試劑盒,面向有自主搭建 ELISA 實驗需求的資深科研人員,依托成熟雙抗體夾心檢測體系,兼顧實驗靈活度、檢測精準度、長期使用性價比三大核心需求。試劑盒靈敏度、線性范圍、重復性、特異性等質(zhì)控指標滿足腫瘤免疫、自身免疫炎癥、抗感染、新藥研發(fā)等多方向科研標準,適配血清、血漿等多種臨床與細胞樣本。