關(guān)鍵詞:APOC3、載脂蛋白C3、重組蛋白、甘油三酯代謝、心血管疾病、高甘油三酯血癥、N-His-SUMO、大腸桿菌表達(dá)
一、APOC3:分子結(jié)構(gòu)與生物學(xué)功能
APOC3(Apolipoprotein C-III)是由 APOC3 基因編碼的載脂蛋白,是血漿富含甘油三酯脂蛋白(TRL)包括極低密度脂蛋白(VLDL)、高密度脂蛋白(HDL)和乳糜微粒的重要蛋白組分。APOC3主要在肝臟合成,少量在腸道表達(dá),通過多種機(jī)制調(diào)控甘油三酯(TG)代謝。本產(chǎn)品為重組人APOC3蛋白(Ser21-Ala99),采用大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng),N端攜帶His-SUMO標(biāo)簽,經(jīng)純化后獲得高純度蛋白。
APOC3的核心生理功能包括:
甘油三酯代謝調(diào)控:APOC3通過抑制脂蛋白脂肪酶(LPL)和肝脂肪酶活性,減緩TRL的水解和清除,是甘油三酯代謝的關(guān)鍵負(fù)調(diào)控因子。APOC3功能獲得性變異可使血漿甘油三酯水平升高108%;
VLDL代謝調(diào)控:APOC3促進(jìn)肝臟VLDL1的組裝和分泌,同時(shí)延緩VLDL顆粒從循環(huán)中的清除,是VLDL代謝的重要調(diào)節(jié)因子;
心血管疾病風(fēng)險(xiǎn)關(guān)聯(lián):APOC3功能缺失突變攜帶者冠心病風(fēng)險(xiǎn)降低約40%;而APOC3水平升高與冠心病風(fēng)險(xiǎn)增加顯著相關(guān)。APOC3功能獲得性變異攜帶者血漿APOC3水平較非攜帶者高47%;
糖尿病與動(dòng)脈粥樣硬化:APOC3在糖尿病患者中水平升高,通過介導(dǎo)動(dòng)脈壁游離膽固醇積聚和局部炎癥加劇動(dòng)脈粥樣硬化風(fēng)險(xiǎn);
治療靶點(diǎn):APOC3已成為高甘油三酯血癥和心血管疾病的重要治療靶點(diǎn),反義寡核苷酸(如volanesorsen、olezarsen)和siRNA藥物(如RBD5044)等APOC3抑制劑已顯示出顯著降低甘油三酯水平的療效。
表達(dá)與分布:APOC3主要在肝臟合成,少量在腸道表達(dá),占VLDL蛋白組分的50%和HDL的2%。重組APOC3蛋白可作為免疫原、WB/ELISA標(biāo)準(zhǔn)品用于基礎(chǔ)與轉(zhuǎn)化研究。
二、APOC3 重組蛋白的科研核心價(jià)值
高質(zhì)量重組APOC3蛋白在多領(lǐng)域研究中具有不可替代的應(yīng)用價(jià)值:
脂質(zhì)代謝與甘油三酯調(diào)控研究:用于研究APOC3對LPL活性的抑制作用、VLDL代謝調(diào)控及甘油三酯穩(wěn)態(tài)維持的分子機(jī)制;
心血管疾病機(jī)制研究:分析APOC3在動(dòng)脈粥樣硬化、冠心病發(fā)生發(fā)展中的作用,探索APOC3作為心血管疾病生物標(biāo)志物的應(yīng)用價(jià)值;
糖尿病與代謝綜合征研究:研究APOC3在糖尿病狀態(tài)下的表達(dá)調(diào)控及其對糖脂代謝的影響;
藥物開發(fā)與靶點(diǎn)驗(yàn)證:在細(xì)胞水平評估APOC3抑制劑(反義寡核苷酸、siRNA等)對APOC3表達(dá)和甘油三酯水平的調(diào)控效果;
免疫檢測標(biāo)準(zhǔn)品:可作為Western Blot、ELISA的陽性對照或定量標(biāo)準(zhǔn)品,建立檢測方法;
抗體篩選與免疫原:用于制備抗人APOC3單克隆/多克隆抗體,或作為免疫原進(jìn)行動(dòng)物免疫。
三、蛋白純度與質(zhì)檢驗(yàn)證(SDS-PAGE)
本產(chǎn)品經(jīng)SDS-PAGE驗(yàn)證,純度 > 90%,滿足大多數(shù)免疫檢測及細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)要求。代表性SDS-PAGE結(jié)果顯示:在約21.30 kDa位置出現(xiàn)單一主條帶,與預(yù)測分子量一致,無明顯降解或聚集條帶。
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圖注:Lane 1:分子量標(biāo)記;Lane 2:還原條件下 Recombinant Human APOC3 Protein, N-His-SUMO,可見清晰單一條帶,純度>90%。
四、高品質(zhì) Recombinant Human APOC3 Protein, N-His-SUMO 核心參數(shù)與技術(shù)優(yōu)勢
核心產(chǎn)品參數(shù)
ELISA、免疫原(Immunogen)、SDS-PAGE、WB、生物活性測試(進(jìn)行中)
凍干前溶液:PBS (pH 7.4),1mM EDTA,4% 海藻糖,1% 甘露醇
一般為凍干粉或冷凍液體,干冰/藍(lán)冰運(yùn)輸
頻繁使用:2-8℃;長期保存:-20至-80℃,自收貨之日起12個(gè)月。避免反復(fù)凍融,使用手動(dòng)除霜冰箱
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技術(shù)優(yōu)勢
大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng):高產(chǎn)量、成本低、批間穩(wěn)定性高,適合大規(guī)模制備;
N-His-SUMO標(biāo)簽設(shè)計(jì):SUMO標(biāo)簽具有促溶作用,能顯著提升蛋白的可溶性表達(dá)量;His標(biāo)簽便于通過親和層析進(jìn)行高純度純化,兼容Ni-NTA親和檢測體系;
高純度(>90%):經(jīng)SDS-PAGE驗(yàn)證,非特異性背景低,滿足ELISA、WB及免疫原制備等應(yīng)用要求;
多應(yīng)用場景:已驗(yàn)證可用于ELISA、免疫原、SDS-PAGE、WB,生物活性測試進(jìn)行中;
優(yōu)化凍干配方:含海藻糖和甘露醇作為凍干保護(hù)劑,提高蛋白長期穩(wěn)定性;PBS體系兼容多數(shù)下游實(shí)驗(yàn)。
FAQ(高頻問題)
1. 該重組蛋白的活性如何?是否適用于細(xì)胞培養(yǎng)?
目前生物活性測試正在進(jìn)行中。如需最新活性數(shù)據(jù),可聯(lián)系技術(shù)支持獲取。
2. 如何復(fù)溶和保存?
打開管蓋前短暫離心,加入無菌水復(fù)溶配制儲(chǔ)備液。復(fù)溶后可分裝凍存于-20℃或-80℃,避免反復(fù)凍融。
3. N端的His-SUMO標(biāo)簽會(huì)影響APOC3的功能嗎?
His-SUMO標(biāo)簽位于蛋白N端,SUMO標(biāo)簽可促進(jìn)蛋白正確折疊和可溶性表達(dá)。若實(shí)驗(yàn)對標(biāo)簽敏感,可咨詢技術(shù)支持。
4. 可以用于Western Blot的陽性對照嗎?
可以。本品已驗(yàn)證適用于WB,使用抗APOC3抗體或抗His標(biāo)簽抗體均可檢測。
5. 該蛋白是否適合制備抗體?
可以。本品純度>90%,可作為免疫原免疫動(dòng)物(兔、小鼠等)制備多克隆或單克隆抗體。
6. 本產(chǎn)品與天然APOC3的序列差異?
本產(chǎn)品為重組人APOC3片段(Ser21-Ala99),N端添加了His-SUMO標(biāo)簽用于純化和檢測。
訂購信息
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更多信息和產(chǎn)品購買請聯(lián)系:
AntibodySystem 亞洲獨(dú)家授權(quán)合作伙伴,提供高品質(zhì)重組蛋白、抗體、ELISA試劑盒與一站式實(shí)驗(yàn)解決方案。
注:如需內(nèi)毒素檢測服務(wù)、活性測試方案或大批量定制需求,請咨詢技術(shù)支持。
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