蛋白來源與分子結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)
NP-PE 藻紅蛋白屬于天然藻膽蛋白家族,提取自微型浮游藻類生物,整體為球狀寡聚蛋白結(jié)構(gòu),由多組 α、β 亞基有序組裝而成,每個(gè)亞基共價(jià)結(jié)合多組藻紅素發(fā)色團(tuán)。發(fā)色團(tuán)為線性四吡咯環(huán)狀結(jié)構(gòu),是熒光信號(hào)產(chǎn)生的核心單元,蛋白骨架為發(fā)色團(tuán)提供穩(wěn)定保護(hù),減少環(huán)境因素對(duì)發(fā)光性能的干擾。整體分子量區(qū)間穩(wěn)定,水溶性良好,中性緩沖體系內(nèi)可穩(wěn)定分散,不易發(fā)生聚集沉淀。
熒光光學(xué)特性原理
該蛋白具備獨(dú)特的雙吸收峰光譜特征,可吸收藍(lán)綠光波段光源,釋放橙黃色熒光信號(hào),摩爾消光系數(shù)與熒光量子產(chǎn)率處于較高水平。蛋白骨架隔絕水分子淬滅基團(tuán),相比有機(jī)小分子熒光染料,光漂白耐受能力更強(qiáng),長(zhǎng)時(shí)間光照成像過程中熒光衰減速度更平緩。發(fā)色團(tuán)與蛋白共價(jià)結(jié)合,不會(huì)在緩沖液中游離脫落,標(biāo)記后熒光信號(hào)穩(wěn)定性更優(yōu),適配長(zhǎng)時(shí)間成像、多通道流式檢測(cè)等長(zhǎng)時(shí)間觀測(cè)實(shí)驗(yàn)。
主流科研應(yīng)用場(chǎng)景
流式細(xì)胞多色分群檢測(cè)是核心應(yīng)用場(chǎng)景,作為熒光標(biāo)記物偶聯(lián)特異性識(shí)別分子,區(qū)分細(xì)胞群體表面標(biāo)志物表達(dá)水平。其次用于共聚焦熒光顯微成像,活細(xì)胞、固定細(xì)胞的胞內(nèi)、膜表面靶標(biāo)可視化觀測(cè),可實(shí)現(xiàn)多通道同步成像,搭配不同發(fā)射波長(zhǎng)熒光探針完成多重標(biāo)記。同時(shí)用于免疫印跡熒光顯影、液相芯片熒光檢測(cè),依靠高亮度熒光信號(hào)提升低豐度靶標(biāo)檢出能力。
儲(chǔ)存與實(shí)驗(yàn)操作規(guī)范
蛋白屬于生物活性大分子,常溫放置會(huì)快速失活,長(zhǎng)期儲(chǔ)存需低溫避光,添加保護(hù)蛋白穩(wěn)定劑。實(shí)驗(yàn)緩沖液維持中性 pH,強(qiáng)酸強(qiáng)堿、高濃度有機(jī)溶劑會(huì)破壞蛋白四級(jí)結(jié)構(gòu),導(dǎo)致發(fā)色團(tuán)解離、熒光消失。操作全程避免劇烈震蕩,防止蛋白分子聚集,分裝單次使用劑量,減少反復(fù)凍融造成的活性損耗。
本產(chǎn)品僅面向科學(xué)研究使用,任何情況下均不得用于人體實(shí)驗(yàn)、臨床診斷、臨床治療及其他非科研活動(dòng)。
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