做神經(jīng)/腫瘤/植物抗逆/環(huán)境毒理方向的應(yīng)該都懂這種痛——課題定的是"XX處理對(duì)細(xì)胞(或小鼠/水稻葉片)氧化應(yīng)激和能量代謝的影響",指標(biāo)列了一長(zhǎng)串:SOD、GSH、MDA、LDH、NAD/NADH、ATP、線粒體復(fù)合體……結(jié)果第一輪預(yù)實(shí)驗(yàn)就把人勸退:SOD兩個(gè)平行差出30%,MDA標(biāo)曲R2只有0.98不到,植物粗提液一做GPX直接黃掉。
回來翻文獻(xiàn)看人家Figure 2那幾個(gè)整齊的小柱狀圖,再看看自己桌面這堆半廢棄的試劑盒盒子和第N次重提的蛋白,默默嘆氣。其實(shí)問題很可能不是出在你的手上,而是試劑盒沒選對(duì)。今天這期硬核干貨就帶你看看,一套優(yōu)秀的生化試劑盒到底強(qiáng)在哪里。
1.抗不抗得住你的樣本——血清還好,植物、土壤、微生物發(fā)酵液這種雜質(zhì)多的,提取液里的酚類/色素/金屬離子隨便一個(gè)就能把顯色反應(yīng)帶偏。
2.低濃度段能不能測(cè)出——原代細(xì)胞、臨床穿刺樣、單細(xì)胞裂解液,珍貴樣本的上樣量就那么點(diǎn)兒。
3.批次差異大不大——同一貨號(hào)三月買一次、六月買一次,IC50漂20%,圖就沒法拼。
從這三點(diǎn)出發(fā),讓我們一起看看Bioss的生化試劑盒是怎么做的
1.先說抗干擾,Bioss會(huì)根據(jù)不同樣本特性做針對(duì)性的優(yōu)化。做過植物、土壤或微生物發(fā)酵液的人都有體會(huì)——樣本底色深、雜質(zhì)多,顯色反應(yīng)稍有不慎就被帶偏。Bioss的應(yīng)對(duì)思路很清晰:該排除的排除,該扣背景的扣背景。以NO含量檢測(cè)試劑盒為例,說明書里明確寫著“為了排除樣品色素等的影響,每個(gè)樣品需做對(duì)照管”,這是寫進(jìn)操作流程的硬性要求。再看植物樣本檢測(cè),Bioss推出了植物可溶性糖含量檢測(cè)試劑盒、脯氨酸含量檢測(cè)試劑盒、木質(zhì)素含量檢測(cè)試劑盒等一系列專門針對(duì)植物樣本的產(chǎn)品,提取體系針對(duì)植物細(xì)胞壁和多酚類物質(zhì)做了專門優(yōu)化。BCA蛋白定量試劑盒則明確標(biāo)注“不受樣品中離子型和非離子型去污劑影響,檢測(cè)不同蛋白質(zhì)分子的變異系數(shù)遠(yuǎn)小于考馬斯亮藍(lán)”。對(duì)于經(jīng)常需要加Triton、NP-40提蛋白的實(shí)驗(yàn)來說,這省去了反復(fù)沉淀脫鹽的麻煩。
2.再說低濃度檢測(cè),試劑盒的檢測(cè)下限決定了實(shí)驗(yàn)?zāi)懿荒茏觥ioss很多生化試劑盒同時(shí)提供分光光度法和微量法兩種檢測(cè)方案。微量法將反應(yīng)體系縮小到微升級(jí)別,同樣一份樣本可以多測(cè)好幾個(gè)指標(biāo),低濃度也能給出可靠結(jié)果。
3.最后說批次差異。Bioss提出的4R標(biāo)準(zhǔn)——Repeatable/Replicable/Reproducible/Reliable在抗體端已經(jīng)有明確落地(例如:批間一致性99%、KO/KD驗(yàn)證、多種屬多樣本交叉等)。在生化試劑盒產(chǎn)品線,Bioss同樣建立了嚴(yán)格的產(chǎn)品生產(chǎn)和質(zhì)控流程,執(zhí)行ISO 9001和ISO 13485國(guó)際質(zhì)量管理體系,從原料采購(gòu)、生產(chǎn)到成品放行,每一步都有標(biāo)準(zhǔn)化流程和記錄可追溯,確保把批次差異控到最小。