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上海優(yōu)寧維生物科技股份有限公司

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T 細(xì)胞培養(yǎng)全攻略:培養(yǎng)基、激活擴(kuò)增與功能研究

發(fā)布日期:2026/7/1 10:51:36發(fā)布人:上海優(yōu)寧維生物科技股份有限公司閱讀量:5

一、T 細(xì)胞培養(yǎng)基:無血清配方,打造高重復(fù)性培養(yǎng)基礎(chǔ)

傳統(tǒng) T 細(xì)胞培養(yǎng)多使用添加胎牛血清(FBS)的基礎(chǔ)培養(yǎng)基,但血清成分復(fù)雜、批次間差異大,還存在動物源外源因子污染的風(fēng)險(xiǎn),難以滿足精細(xì)化實(shí)驗(yàn)與臨床轉(zhuǎn)化研究的重復(fù)性要求。

美天旎 TexMACS 系列培養(yǎng)基是專為 T 細(xì)胞與調(diào)節(jié)性 T 細(xì)胞(Treg)優(yōu)化的無血清細(xì)胞培養(yǎng)基,配方不含血清及其他動物來源成分,化學(xué)成分高度明確,在人源與小鼠源 T 細(xì)胞培養(yǎng)中均能實(shí)現(xiàn)穩(wěn)定的培養(yǎng)結(jié)果,是 T 細(xì)胞體外培養(yǎng)的核心基礎(chǔ)試劑。

核心優(yōu)勢

1,無動物源體系:全程不包含血清與動物來源成分,降低外源性污染風(fēng)險(xiǎn),實(shí)驗(yàn)批間差異更小、結(jié)果更穩(wěn)定;

2,高效擴(kuò)增能力:可支持 T 細(xì)胞實(shí)現(xiàn)高效活化與高速增殖,整體擴(kuò)增表現(xiàn)優(yōu)于傳統(tǒng)含血清培養(yǎng)基與同類無血清競品;

3,多場景適配:提供科研級與 MACS GMP 級兩種質(zhì)量級別,同時(shí)可選含酚紅 / 不含酚紅版本,可適配基礎(chǔ)科研、臨床前研究、細(xì)胞治療轉(zhuǎn)化等不同需求。

如圖 1 所示,對比 TexMACS 培養(yǎng)基、同類競品培養(yǎng)基與傳統(tǒng) RPMI+10% FBS 培養(yǎng)基的 T 細(xì)胞擴(kuò)增效果,TexMACS GMP 級與科研級培養(yǎng)基的 CD4?與 CD8? T 細(xì)胞總擴(kuò)增倍數(shù)均顯著更高,擴(kuò)增性能優(yōu)勢明確。

圖 1 不同培養(yǎng)體系下人 T 細(xì)胞擴(kuò)增倍率對比(深色為 CD4? T 細(xì)胞,淺色為 CD8? T 細(xì)胞)

二、T 細(xì)胞激活與擴(kuò)增:多方案覆蓋不同研究需求

靜息狀態(tài)的 T 細(xì)胞需要雙信號協(xié)同才能活化增殖:第一信號來自 TCR 與抗原肽 - MHC 復(fù)合物的結(jié)合,第二信號來自 CD28 等共刺激分子的激活。針對不同實(shí)驗(yàn)?zāi)康?,美天旎提供了從廣譜多克隆激活到即用型試劑的多種解決方案。

1. T 細(xì)胞激活 / 擴(kuò)增套件:微球技術(shù)實(shí)現(xiàn)高效廣譜擴(kuò)增

MACSiBead 顆粒表面負(fù)載了功能級抗體,可模擬體內(nèi)抗原呈遞細(xì)胞的作用,同時(shí)為 T 細(xì)胞提供活化所需的雙信號,能夠高效激活并擴(kuò)增人、小鼠、非人靈長類動物的 T 細(xì)胞與 Treg 細(xì)胞,適合需要獲得大量高活性 T 細(xì)胞的體外功能實(shí)驗(yàn)、過繼免疫細(xì)胞治療研究等場景。

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如圖 2 所示,使用該激活套件后,人源 CD4?與 CD8? T 細(xì)胞在 30 天培養(yǎng)周期內(nèi)可實(shí)現(xiàn)持續(xù)穩(wěn)定的對數(shù)級增殖;小鼠 T 細(xì)胞也能在 8 天內(nèi)達(dá)到理想的擴(kuò)增數(shù)量,且 CD4?與 CD8? T 細(xì)胞均能保持良好的生長狀態(tài)。

圖 2 T 細(xì)胞激活擴(kuò)增套件作用下的細(xì)胞生長曲線(左:人 T 細(xì)胞培養(yǎng) 30 天;右:小鼠 T 細(xì)胞培養(yǎng) 8 天)

該系列套件分有人源、鼠源、非人靈長類動物三種專屬亞型,可直接匹配不同物種的研究需求,無需實(shí)驗(yàn)人員自行摸索抗體搭配與工作濃度。

2. T 細(xì)胞 TransAct 刺激試劑:即用型方案,操作簡便易去除

對于追求操作便捷性、希望簡化實(shí)驗(yàn)流程的研究場景,美天旎 T 細(xì)胞 TransAct 刺激試劑是更優(yōu)選擇。該試劑為即用型配方,可直接加入培養(yǎng)體系活化人 T 細(xì)胞,無需提前制備與滴定;試劑本身體積占比小,激活完成后可通過簡單洗滌輕松去除,對后續(xù)下游實(shí)驗(yàn)干擾極小。

該試劑同樣提供科研級與 MACS GMP 級版本,可覆蓋從基礎(chǔ)科研到臨床轉(zhuǎn)化的全鏈條應(yīng)用。

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如圖 3 所示,經(jīng) TransAct 激活 48 小時(shí)后,人 CD4?與 CD8? T 細(xì)胞表面的活化標(biāo)志物 CD69、CD25 表達(dá)量顯著上調(diào);培養(yǎng) 7 天后的 CFSE 增殖檢測顯示,T 細(xì)胞發(fā)生了明顯的多代增殖分裂,驗(yàn)證了其穩(wěn)定的激活與促增殖效果。

圖 3 T 細(xì)胞 TransAct 激活效果驗(yàn)證(上排:陰性對照組;下排:激活后組;左 / 中:活化標(biāo)志物流式檢測;右:細(xì)胞增殖檢測)

三、細(xì)胞刺激試劑:安全無毒的多克隆功能刺激方案

在 T 細(xì)胞功能鑒定、細(xì)胞因子分泌分析等實(shí)驗(yàn)中,通常需要對 T 細(xì)胞進(jìn)行非特異性多克隆刺激,以誘導(dǎo)細(xì)胞活化與細(xì)胞因子表達(dá)。傳統(tǒng)刺激試劑如金黃色葡萄球菌腸毒素 B(SEB)具有生物毒性,實(shí)驗(yàn)操作與廢棄物處理的安全風(fēng)險(xiǎn)較高。

美天旎細(xì)胞刺激劑(CytoStim)是一種無毒的 SEB 替代試劑,可特異性刺激人類 T 細(xì)胞,有效誘導(dǎo)細(xì)胞活化與細(xì)胞因子分泌,兼顧實(shí)驗(yàn)效率與操作安全性。

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如圖 4 所示,對比 CytoStim、SEB 與經(jīng)典刺激劑 PMA / 離子霉素的刺激效果,CytoStim 刺激后,同時(shí)表達(dá) CD154 與 IFN-γ 的 T 細(xì)胞比例與 PMA / 離子霉素組接近,顯著優(yōu)于 SEB 刺激組,能夠高效誘導(dǎo) T 細(xì)胞活化與效應(yīng)細(xì)胞因子分泌。

圖 4 不同刺激試劑的 T 細(xì)胞激活效果對比(左:CytoStim;中:SEB;右:PMA / 離子霉素)

四、PepTivator 肽池:抗原特異性 T 細(xì)胞研究的核心工具

當(dāng)研究聚焦于特定抗原的特異性 T 細(xì)胞應(yīng)答(如病毒抗原、腫瘤新抗原)時(shí),抗原肽池是檢測抗原特異性 T 細(xì)胞頻率與功能的核心工具。

美天旎 PepTivator 肽池由覆蓋抗原完整序列的短肽組成,通過廣泛的抗原面板刺激 CD4?與 CD8? T 細(xì)胞,可精準(zhǔn)誘導(dǎo)抗原特異性 T 細(xì)胞的活化與細(xì)胞因子分泌。

核心特點(diǎn)

1,序列全覆蓋:肽段以 15 聚體為基礎(chǔ)、相鄰肽段重疊 11 個(gè)氨基酸,完整覆蓋對應(yīng)抗原的全長蛋白序列,最大程度避免抗原表位遺漏;

2,即用型設(shè)計(jì):提供預(yù)制 96 孔板格式,可直接用于實(shí)驗(yàn),無需自行配制與分裝;

3,轉(zhuǎn)化級合規(guī):提供 MACS GMP 級 PepTivator 肽池,可滿足臨床轉(zhuǎn)化研究的合規(guī)性要求。

如圖 5 所示,使用不同病毒抗原肽池刺激后,不同供體的人 CD4?與 CD8? T 細(xì)胞均可檢測到抗原特異性的 IFN-γ 分泌,證明肽池可有效誘導(dǎo)抗原特異性 T 細(xì)胞應(yīng)答,適用于病毒免疫研究、腫瘤新抗原篩選等場景。

圖 5 不同抗原肽池刺激下的抗原特異性 T 細(xì)胞應(yīng)答檢測

五、美天旎 T 細(xì)胞培養(yǎng)整體解決方案,優(yōu)寧維官方授權(quán)供應(yīng)

從基礎(chǔ)培養(yǎng)的無血清培養(yǎng)基,到活化擴(kuò)增的微球套件與即用型試劑,再到功能研究的多克隆刺激劑與抗原特異性肽池,美天旎構(gòu)建了覆蓋 T 細(xì)胞培養(yǎng)全流程的完整產(chǎn)品矩陣,憑借穩(wěn)定的性能、豐富的規(guī)格與合規(guī)的 GMP 級產(chǎn)品線,成為全球免疫研究領(lǐng)域的主流選擇。

優(yōu)寧維作為美天旎(Miltenyi Biotec)官方授權(quán)代理商,可為國內(nèi)科研院所、生物醫(yī)藥企業(yè)提供全系列 T 細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)產(chǎn)品,同時(shí)配套專業(yè)的技術(shù)支持與售前售后服務(wù),助力免疫研究與細(xì)胞治療領(lǐng)域的探索。

如果您對美天旎 T 細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)品有采購需求或技術(shù)疑問,可聯(lián)系優(yōu)寧維獲取詳細(xì)產(chǎn)品資料與定制化實(shí)驗(yàn)方案。

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名稱
貨號
規(guī)格
Treg Expansion Kit, human 1 Vial
2ml
Treg Expansion Kit, human 2 Vails
2×2ml
Treg Detection Kit (PE), mouse
for 100 tests

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