結(jié)合此前你關(guān)注的斑馬魚胚胎成纖維細(xì)胞污染后挽救、恢復(fù)周期的相關(guān)背景,可通過以下多維度指標(biāo)綜合判斷細(xì)胞是否完全恢復(fù):
一、宏觀與鏡下基礎(chǔ)狀態(tài)判定
?培養(yǎng)基狀態(tài)?:培養(yǎng)基清亮透明,無渾濁、絮狀沉淀,pH值穩(wěn)定維持在7.0-7.4,無異常變色。
?細(xì)胞形態(tài)?:鏡下細(xì)胞恢復(fù)為均一的梭形成纖維形態(tài),貼壁牢固,無大量漂浮死細(xì)胞,無異常皺縮、裂解的細(xì)胞。
二、生長(zhǎng)特性驗(yàn)證
細(xì)胞增殖速度回到該細(xì)胞系正常水平,傳代后24小時(shí)內(nèi)正常貼壁,48小時(shí)進(jìn)入對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,72-96小時(shí)可長(zhǎng)至70%-80%匯合度,生長(zhǎng)曲線無異常波動(dòng)。
三、污染復(fù)檢確認(rèn)
對(duì)細(xì)胞樣本進(jìn)行支原體、細(xì)菌、真菌專項(xiàng)檢測(cè),結(jié)果全部為陰性,鏡下無任何游動(dòng)菌體、菌絲等污染物殘留。
四、功能一致性校驗(yàn)
細(xì)胞恢復(fù)正常的成纖維細(xì)胞功能,可穩(wěn)定合成、分泌I型膠原,與未污染的正常斑馬魚胚胎成纖維細(xì)胞功能表現(xiàn)無差異。