在免疫學(xué)功能研究和疫苗評(píng)價(jià)中,通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)胞內(nèi)細(xì)胞因子(如IL-2、IFN-γ、TNF-α、IL-17A等)是判斷T細(xì)胞、NK細(xì)胞活化狀態(tài)的金標(biāo)準(zhǔn)。然而,一個(gè)常見(jiàn)的實(shí)驗(yàn)困擾是:刺激活化后的細(xì)胞會(huì)快速將合成的細(xì)胞因子分泌至胞外,導(dǎo)致胞內(nèi)染色時(shí)信號(hào)微弱甚至無(wú)法檢出。
Elabscience? Protein Transport Inhibitor MIX(蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)抑制劑,貨號(hào):E-CK-A013) 正是為解決這一痛點(diǎn)而設(shè)計(jì)的即用型解決方案。它通過(guò)雙重機(jī)制阻斷蛋白質(zhì)從內(nèi)質(zhì)網(wǎng)(ER)向高爾基體(Golgi)的轉(zhuǎn)運(yùn),將新合成的細(xì)胞因子“鎖定”在胞內(nèi),從而顯著放大流式檢測(cè)信號(hào),讓您的陽(yáng)性細(xì)胞群清晰可辨。
雙效配方,一步到位
與市面上單一成分的抑制劑不同,本產(chǎn)品采用Brefeldin A(布雷菲德菌素A)與Monensin(莫能菌素)的優(yōu)化混合配方:
Brefeldin A:作用于ER-Golgi間轉(zhuǎn)運(yùn),快速阻斷蛋白分泌。
Monensin:抑制高爾基體內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn),同時(shí)可防止內(nèi)吞體酸化,避免已分泌蛋白的降解。
兩者協(xié)同作用,比單一使用Brefeldin A具有更廣譜的阻斷效率,尤其適合對(duì)轉(zhuǎn)運(yùn)抑制劑敏感度不同的多種細(xì)胞因子(如趨化因子、顆粒酶B)同步檢測(cè)。
實(shí)驗(yàn)效果直觀可見(jiàn)
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根據(jù)產(chǎn)品質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)(見(jiàn)產(chǎn)品結(jié)果圖):將過(guò)表達(dá)人IL-17A的293T細(xì)胞,在37°C CO?培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h后,加入Protein Transport Inhibitor MIX繼續(xù)孵育僅4小時(shí),隨后固定、破膜并進(jìn)行IL-17A PE染色。流式結(jié)果清晰地顯示:未處理組幾乎無(wú)陽(yáng)性信號(hào),而處理組IL-17A+細(xì)胞群顯著右移,陽(yáng)性率提升超過(guò)20倍。這表明該抑制劑能夠在極短孵育時(shí)間內(nèi)高效富集目標(biāo)蛋白,大幅縮短實(shí)驗(yàn)時(shí)間。
高分文獻(xiàn)實(shí)證:體內(nèi)外應(yīng)用雙雙驗(yàn)證
截至目前,該產(chǎn)品已發(fā)表在Frontiers in Immunology(IF: 5.9)和BBA - Molecular Basis of Disease(IF: 4.2)等國(guó)際zhi名期刊,涵蓋小鼠和人源樣本的復(fù)雜應(yīng)用場(chǎng)景:
心肌缺血再灌注損傷研究(BBA - Molecular Basis of Disease, 2026):研究團(tuán)隊(duì)利用該抑制劑處理小鼠心臟組織浸潤(rùn)的CD4+ T細(xì)胞,成功檢測(cè)到Th17細(xì)胞分泌的IL-17A,為達(dá)格列凈靶向RORγt改善心衰的機(jī)制提供了關(guān)鍵細(xì)胞學(xué)證據(jù)。
卵巢癌免疫逃逸機(jī)制(Frontiers in Immunology, 2025):在人源樣本中,該產(chǎn)品被用于處理外周血單核細(xì)胞(PBMCs),通過(guò)胞內(nèi)染色精準(zhǔn)鑒定了VISTA+濾泡調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Tfr) 的功能亞群,揭示了其在效應(yīng)免疫細(xì)胞調(diào)節(jié)中的作用。
產(chǎn)品規(guī)格與儲(chǔ)存建議
為滿足不同通量需求,產(chǎn)品提供50 Tests和500 Tests兩種規(guī)格。特別提醒:本品需在 -20°C避光條件下保存,有效期為12個(gè)月。運(yùn)輸過(guò)程采用冰袋冷鏈,確保組分活性穩(wěn)定。使用前請(qǐng)充分解凍混勻,避免反復(fù)凍融。
適用場(chǎng)景與操作貼士
適用樣本:小鼠/人外周血、脾細(xì)胞、淋巴結(jié)細(xì)胞、腫瘤浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞(TILs)及體外刺激擴(kuò)增的T細(xì)胞系。
推薦使用時(shí)機(jī):建議在細(xì)胞刺激(如PMA/離子霉素或抗原肽)開(kāi)始后1~2小時(shí)內(nèi)加入該抑制劑,總孵育時(shí)間以4~6小時(shí)為佳。不同細(xì)胞系可適當(dāng)優(yōu)化時(shí)間窗。
如果您正苦于胞內(nèi)染色陽(yáng)性率低、信號(hào)彌散或背景過(guò)高,Elabscience蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)抑制劑MIX將是您提升數(shù)據(jù)質(zhì)量和實(shí)驗(yàn)效率的得力助手。一步添加,即可獲得清晰、高分辨的胞內(nèi)染色結(jié)果。
參考文獻(xiàn):
1、Dapagliflozin targets RORγt to improve myocardial ischemia-reperfusion injury-induced heart failure by regulating the CD4+ T cell/Th17 cell axis within cardiac tissue
IF: 4.200
Journal: BIOCHIMICA ET BIOPHYSICA ACTA-MOLECULAR BASIS OF DISEASE (2026)
DOI:10.1016/j.bbadis.2026.168185
Reactivity:Mouse
2、VISTA+ follicular regulatory T cells modulate the function of effector immune cells: implications for ovarian cancer immune escape
IF: 5.900
Journal: Frontiers in Immunology (2025)
DOI:10.3389/fimmu.2025.1704048
Reactivity:Human