一、基本定義與概述
α-淀粉酶(枯草桿菌),又稱中溫淀粉酶、液化型淀粉酶,是由枯草芽孢桿菌發(fā)酵提取得到的一種內(nèi)切糖苷水解酶,CAS號為9000-90-2。它能隨機水解淀粉等多糖內(nèi)部的α-1,4-糖苷鍵,使糊化淀粉的黏度迅速降低,轉(zhuǎn)化為液化淀粉,因此也被稱為液化酶,是工業(yè)生產(chǎn)中應(yīng)用廣泛的酶制劑之一。我國α-淀粉酶的工業(yè)化生產(chǎn)主要采用枯草桿菌BF-7658菌株,該菌株所產(chǎn)的酶系較為復(fù)雜,能滿足多領(lǐng)域的生產(chǎn)需求。
?
二、酶學(xué)特性?
(一)作用機制
α-淀粉酶(枯草桿菌)作用于淀粉時,反應(yīng)分為兩個階段。第一階段為快速反應(yīng)期,能迅速降解直鏈淀粉,產(chǎn)生低聚糖,此階段淀粉的黏度以及與碘液的呈色反應(yīng)能力會快速下降;第二階段反應(yīng)速率放緩,低聚糖會緩慢水解,最終生成葡萄糖、麥芽糖以及含有α-1,6-糖苷鍵的限制糊精。對于支鏈淀粉,它同樣能水解其中的α-1,4-糖苷鍵,但無法分解支鏈處的α-1,6-糖苷鍵,最終產(chǎn)物包含葡萄糖、麥芽糖和一系列限制糊精。
?
(二)穩(wěn)定性與最適條件
溫度穩(wěn)定性:該酶在60℃以下較為穩(wěn)定,最適作用溫度為60℃~70℃,在特定條件下可適應(yīng)最高達90℃的液化過程。不過,當溫度超過60℃時,酶活力會逐漸喪失,如在60℃的環(huán)境中,酶活力會完全喪失。在高濃度淀粉漿中,其最適溫度可提升至85℃~90℃。
pH穩(wěn)定性:最適pH值為6.0,在pH6.0~7.0的范圍內(nèi)穩(wěn)定性較好,當pH值低于5.0時,酶活力會嚴重失活。
?
離子影響:鈣離子對酶活力的穩(wěn)定性有顯著提升作用,若缺乏鈣離子,酶活力會完全喪失。一般來說,鈣離子濃度不低于50-70PPM時,能較好地維持酶的活性。而鐵、銅、汞、鋅等金屬離子以及部分表面活性劑會對酶活產(chǎn)生抑制作用。
?
(三)活力定義與性狀
在60℃、pH6.0的條件下,1小時內(nèi)液化1克可溶性淀粉的酶量即為一個酶活力單位。該酶通常為黃褐色或類白色粉末,幾乎能完全溶于水,水分含量≤8%。在保存溫度不超過25℃時,半年內(nèi)酶活可保持不低于標識酶活的90%,適宜的儲存條件為2-8℃。
?
三、生產(chǎn)制備
α-淀粉酶(枯草桿菌)屬于胞外酶,工業(yè)生產(chǎn)主要采用液體深層培養(yǎng)法,以枯草桿菌BF-7658菌株為生產(chǎn)菌種,具體流程如下:
?
種子培養(yǎng):將保藏的枯草桿菌BF-7658試管斜面種子接種到馬鈴薯斜面培養(yǎng)基(含20%馬鈴薯煎出汁、5mg/L MgSO?·7H?O、2%瓊脂,pH6.7~7.0),在37℃條件下培養(yǎng)3天,促使其形成芽孢以提高種子穩(wěn)定性。隨后將種子接入500L種子罐,在37℃、300r/min攪拌并通風(fēng)的條件下培養(yǎng)12~14小時,此時菌體進入對數(shù)生長期,鏡檢可見細胞密集、粗壯整齊,多數(shù)單獨存在,少數(shù)呈鏈狀。
?
發(fā)酵培養(yǎng):將種子罐中的菌液接種到發(fā)酵罐中,在適宜的溫度、pH值、通風(fēng)量和攪拌速度等條件下進行發(fā)酵培養(yǎng),使枯草桿菌大量繁殖并分泌α-淀粉酶。
?
提取純化:發(fā)酵結(jié)束后,通過過濾、離心等方式去除菌體和雜質(zhì),再經(jīng)過濃縮、干燥等工藝,得到成品α-淀粉酶(枯草桿菌)制劑。
?
四、應(yīng)用領(lǐng)域
(一)食品工業(yè)
淀粉深加工:在淀粉糖漿、葡萄糖、麥芽糖等產(chǎn)品的生產(chǎn)中,α-淀粉酶(枯草桿菌)可將淀粉液化,降低淀粉漿的黏度,為后續(xù)的糖化工藝創(chuàng)造條件,是淀粉水解工業(yè)中的關(guān)鍵酶制劑。
?
焙烤行業(yè):在面包、糕點等焙烤食品的生產(chǎn)中,該酶能改良面團特性,降低面團黏度,促進發(fā)酵進程,使面包體積更大、口感更松軟,同時還能延長產(chǎn)品的貨架期。
?
釀造工業(yè):在啤酒、黃酒、酒精等釀造過程中,α-淀粉酶可將原料中的淀粉分解為可發(fā)酵性糖,供酵母菌發(fā)酵利用,提高原料利用率和發(fā)酵效率。
?
(二)紡織工業(yè)
主要用于紡織品的退漿處理。在紡織加工過程中,經(jīng)紗上的漿料會影響后續(xù)的染色、印花等工序,α-淀粉酶(枯草桿菌)能高效分解漿料中的淀粉成分,使?jié){料從紗線上脫離,不僅退漿效果好,而且對纖維損傷小,符合環(huán)保和高效的生產(chǎn)要求。
?
(三)其他領(lǐng)域
在洗滌劑生產(chǎn)中,α-淀粉酶可作為添加劑,幫助去除衣物上的淀粉類污漬;在飼料工業(yè)中,能提高飼料中淀粉的消化率,增強動物對營養(yǎng)物質(zhì)的吸收。
?
五、安全性評價
從毒理學(xué)角度來看,α-淀粉酶(枯草桿菌)具有較高的安全性。小鼠口服LD??為7375mg/kg,屬于低毒物質(zhì)。聯(lián)合國糧食及農(nóng)業(yè)組織/世界衛(wèi)生組織食品添加劑聯(lián)合專家委員會(JECFA)規(guī)定,來自枯草芽孢桿菌的α-淀粉酶每日允許攝入量(ADI)無需規(guī)定,表明其在合理使用范圍內(nèi)對人體健康無不良影響,且在體內(nèi)無明顯蓄積作用,無致突變作用。
?
在此 我們提供自己的試劑產(chǎn)品數(shù)據(jù)作為參考:
α-淀粉酶(枯草桿菌)/中溫淀粉酶/液化型淀粉酶/液化酶/α-1,4糊精酶/細菌性淀粉酶/α-淀粉酵素/α-Amylase價格 cas號 查詢_中國 生物化學(xué) 試劑網(wǎng)—都萊生物