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武漢瀚海新酶生物科技有限公司

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熱啟動Taq DNA聚合酶探針法預(yù)混液(化學(xué)修飾)
發(fā)布日期:2023/1/10 14:07:12發(fā)布人:武漢瀚海新酶生物科技有限公司 閱讀量:289

產(chǎn)品概述:Taq DNA聚合酶,是一種耐熱的DNA聚合酶,來源于水生棲熱菌(Thermus aquaticusYT-1),該酶具有5’→3’的聚合酶活性和雙鏈特異性5’→3’的核酸外切酶活性。

該酶使用化學(xué)修飾基團封閉了低溫以及室溫的酶活。經(jīng)過95℃熱激活后,化學(xué)修飾基團脫落釋放酶活。在擴增體系配制至PCR擴增前,不會產(chǎn)生由于引物錯誤配對而形成的非特異性擴增,程度降低非特異擴增和引物二聚體的形成,提高擴增的靈敏度和特異性。該產(chǎn)品采用經(jīng)過特殊優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液,與熱啟動Taq DNA聚合酶(化學(xué)修飾)制成預(yù)混試劑,限度保證了儲存過程中酶的穩(wěn)定性,配置體系前只用加入引物模板以及水,大大簡化了配制步驟。

本品通用性強,適用于終點PCR、染料及探針法qPCR。

運輸與保存方法:≤0℃運輸;-25~-15℃保存。

單位定義:用活性化的大馬哈魚精子DNA作為模板/引物,74℃,30 min內(nèi),攝入10 nmol的全核苷酸為酸性不溶物的活性定義為1個活性單位(U)。

質(zhì)量控制

•核酸內(nèi)切酶殘留檢測:4μg pUC19 DNA加入本試劑中,在37℃下孵育4 h,DNA的電泳譜帶不發(fā)生變化。

•5 kbλDNA擴增檢測:以5 ngλDNA為模板擴增25個循環(huán)后,瓊脂糖凝膠電泳,可見有單一的特異性5 kb條帶。

•核酸外切酶檢測:20μl反應(yīng)體系體系中加入1μM 5’-FAM標(biāo)記的寡核苷酸,37℃孵育30min,無降解信號。

•熱失活:無

•儲存穩(wěn)定性:將本試劑反復(fù)凍融50次,擴增性能無下降。


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