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上海雅吉生物科技有限公司

主營產(chǎn)品:抗體,細胞,生物試劑等

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  • CB指數(shù):58
HepG2細胞hIFNAR2基因敲除株(現(xiàn)貨)
發(fā)布日期:2026/7/14 20:01:06發(fā)布人:上海雅吉生物科技有限公司閱讀量:3

一?、產(chǎn)品詳情

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傳代方法

?1:2-1:4,每2-3天換液一次

傳代周期

72-96h

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細胞描述

?

細胞鑒定:PCR,測序

質(zhì)量檢測:細菌、真菌、支原體檢測均為陰性

修飾類型:敲除

轉(zhuǎn)導(dǎo)方法:蛋白法

抗性基因:—

克隆類型:純合子

細胞凍存或復(fù)蘇發(fā)貨

本庫的細胞僅用于科研工作,未經(jīng)許可不得用于其他目的,使用者不得將本庫細胞轉(zhuǎn)讓給第三者。

細胞備注

收到細胞后請務(wù)必仔細閱讀產(chǎn)品資料,了解細胞相關(guān)信息,如貼壁特性 (貼壁/懸浮/半貼壁半懸浮)、細胞形態(tài)、培養(yǎng)體系、傳代比例和換液頻率等。

?

二、 產(chǎn)品優(yōu)勢

  • 穩(wěn)定表達,數(shù)據(jù)可靠:?目標基因穩(wěn)定整合至基因組,避免外源基因丟失,確保蛋白表達穩(wěn)定可靠,實驗結(jié)果可重復(fù)性高。

  • 背景清晰,干擾少:?經(jīng)過嚴格的篩選和驗證,確保細胞株背景清晰,內(nèi)源性干擾因素少,實驗結(jié)果更準確。

  • 種類豐富,選擇多樣:?提供多種宿主細胞(如HEK293、CHO、HeLa等)和靶基因(如熒光蛋白、報告基因、功能基因等)組合,滿足您不同的研究需求。

  • 嚴格質(zhì)檢,品質(zhì)保證:?每株細胞均經(jīng)過嚴格的支原體檢測、STR鑒定和功能驗證,確保產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定可靠。

  • 專業(yè)服務(wù),全程支持:?可根據(jù)客戶需求定制特定基因的穩(wěn)轉(zhuǎn)株,提供完善的售前咨詢、售后技術(shù)支持和服務(wù),為您的研究保駕護航。

  • ?

  • 三、細胞株可廣泛應(yīng)用于以下研究領(lǐng)域:

  • 基因功能研究:?過表達或敲低目標基因,研究其功能及調(diào)控機制。

  • 藥物篩選與評價:?構(gòu)建藥物靶點穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株,用于高通量藥物篩選和藥效評價。

  • 蛋白表達與純化:?高效表達目標蛋白,用于蛋白結(jié)構(gòu)、功能研究和藥物開發(fā)。

  • 疾病模型構(gòu)建:?構(gòu)建疾病相關(guān)基因穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株,用于疾病機制研究和藥物開發(fā)。

  • 操作步驟

    1. 細胞培養(yǎng):使用適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基和條件培養(yǎng)宿主細胞,確保細胞處于最佳生長狀態(tài)。

    2. 轉(zhuǎn)染:將含有目標基因的載體通過轉(zhuǎn)染試劑(如Lipofectamine)導(dǎo)入宿主細胞。根據(jù)載體類型選擇合適的轉(zhuǎn)染方法(如化學(xué)轉(zhuǎn)染、電穿孔等)。

    3. 篩選:轉(zhuǎn)染后24-48小時,加入篩選藥物(如G418、Puromycin等)進行篩選。持續(xù)篩選2-3周,直至未轉(zhuǎn)染細胞全部死亡。

    4. 單克隆篩選:將存活的細胞進行有限稀釋,接種到96孔板中,培養(yǎng)至單克隆形成。挑選高表達目標蛋白的單克隆進行擴增。

    5. 驗證:通過PCR、Western Blot等方法驗證目標基因的整合和表達。檢測目標蛋白的表達水平和功能活性。

    6. 凍存:將驗證后的穩(wěn)轉(zhuǎn)株細胞進行凍存,建立細胞庫。

  • 載體信息:

    • 載體類型: 質(zhì)粒、慢病毒、逆轉(zhuǎn)錄病毒等。

    • 篩選標記: G418、Puromycin、Hygromycin等。

    • 啟動子: CMV、EF1α、SV40等。

  • 篩選藥物濃度:

    • G418: 200-1000 μg/mL

    • Puromycin: 1-10 μg/mL

    • Hygromycin: 50-500 μg/mL

  • 注意事項

    1. 細胞狀態(tài): 確保細胞在轉(zhuǎn)染前處于最佳生長狀態(tài),避免使用老化或污染的細胞。

    2. 轉(zhuǎn)染效率: 不同細胞系的轉(zhuǎn)染效率差異較大,需優(yōu)化轉(zhuǎn)染條件。

    3. 篩選藥物: 篩選藥物的濃度需根據(jù)細胞系和載體進行優(yōu)化,避免過度篩選導(dǎo)致細胞死亡。

    4. 單克隆篩選: 單克隆篩選是獲得高表達穩(wěn)轉(zhuǎn)株的關(guān)鍵步驟,需耐心細致操作。

    5. 凍存與復(fù)蘇: 凍存和復(fù)蘇過程中需嚴格控制溫度和時間,避免細胞損傷。

四、 訂購信息

雅吉生物產(chǎn)品全部優(yōu)惠價供應(yīng),京津冀、江浙滬皖、川渝地區(qū)通常到貨時間為次日達。其它主要大中城市到貨時間為隔日達(周末和節(jié)假日除外)。

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五、 聯(lián)系我們

歡迎在線、電話、郵件(yajikit@163.com)、QQ或微信訂購!訂貨熱線:021-34661275或15317085058(微信同步)

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六、 免責(zé)聲明

產(chǎn)品僅用于科研用途,不得用于臨床診斷或治療。

七、 常見問題解答

Q1: 如何選擇合適的穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株?

A1: 選擇穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株需要考慮以下因素:

  • 研究目的:明確您的研究目的,例如基因功能研究、藥物篩選等。

  • 宿主細胞:根據(jù)實驗需求選擇合適的宿主細胞,例如HEK293細胞適合蛋白表達,CHO細胞適合抗體生產(chǎn)。

  • 靶基因:選擇您感興趣的靶基因,并確保其與宿主細胞兼容。

  • 抗性標記:選擇與您實驗體系兼容的抗性標記,例如G418、Puromycin等。

Q2: 如何驗證穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株的表達?

A2: 可以通過以下方法驗證穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株的表達:

  • Western Blot:檢測目標蛋白的表達水平。

  • qPCR:檢測目標基因的mRNA表達水平。

  • 熒光顯微鏡觀察:如果目標蛋白帶有熒光標記,可以直接觀察熒光表達情況。

Q3: 穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株可以傳代多少次?

A3: 穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株的傳代次數(shù)取決于細胞類型、培養(yǎng)條件等因素。一般來說,穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株可以穩(wěn)定傳代20-30代。

[雅吉生物]致力于為您提供高質(zhì)量的科研工具和服務(wù),助力您的研究取得成功!








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