名稱(chēng):Suc-AAPF-pNA?
品牌: Medlife
CAS號(hào):70967-97-4
純度: ?≥98%
貨號(hào):PC18650
規(guī)格:10mg/價(jià)格:￥408.00
規(guī)格:25mg/價(jià)格:￥740.00
規(guī)格:100mg/價(jià)格:￥2445.00
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一、產(chǎn)品簡(jiǎn)介
Suc-AAPF-pNA（N - 琥珀酰 - Ala-Ala-Pro-Phe - 對(duì)硝基苯胺），CAS No.：70967-97-4，分子式 C??H??N?O?，分子量 639.66，本品為
HPLC≥98%高純多肽顯色底物試劑。采用固相多肽合成、樹(shù)脂裂解、液相純化、反相制備色譜精制、低溫避光真空干燥、惰性氣體密封分裝工藝制備，嚴(yán)格管控缺失肽、游離 pNA、多肽異構(gòu)體、重金屬、殘留有機(jī)溶劑與水解雜質(zhì)，確保多肽序列完整、酶切響應(yīng)活性穩(wěn)定、空白水解率低、批次檢測(cè)重復(fù)性高度統(tǒng)一。本品外觀為白色至類(lèi)白色結(jié)晶粉末，無(wú)結(jié)塊、無(wú)雜色、無(wú)異味；易溶于 DMSO、DMF，可緩沖液助溶；水溶液中性條件下相對(duì)穩(wěn)定，在目標(biāo)蛋白酶催化位點(diǎn)發(fā)生特異性切割，釋放黃色對(duì)硝基苯胺（pNA），可通過(guò) 405 nm 紫外比色定量；具備底物特異性強(qiáng)、本底水解低、檢測(cè)線性范圍寬等特點(diǎn)。
本品廣泛應(yīng)用于
糜蛋白酶、組織蛋白酶 G 酶活測(cè)定、絲氨酸蛋白酶抑制劑篩選、蛋白酶動(dòng)力學(xué)參數(shù)測(cè)定、炎癥相關(guān)蛋白酶機(jī)制研究、高通量藥物篩選、酶學(xué)方法學(xué)驗(yàn)證、高校生物化學(xué)科研實(shí)訓(xùn)等酶工程、藥理學(xué)、炎癥生物學(xué)領(lǐng)域。產(chǎn)品密封 - 20℃避光干燥保存，防潮、避光、隔絕水汽，避免高溫、強(qiáng)酸強(qiáng)堿與強(qiáng)氧化劑接觸，規(guī)范儲(chǔ)存條件下保質(zhì)期 24 個(gè)月。
區(qū)別于普通低純度多肽底物，本品缺失肽雜質(zhì)少、自發(fā)水解極低、酶切特異性?xún)?yōu)異，空白背景信號(hào)低，無(wú)需二次純化，可直接用于精密酶動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)與高通量抑制劑篩選，是糜蛋白酶、組織蛋白酶 G 活性定量領(lǐng)域標(biāo)桿級(jí)顯色多肽底物。
二、作用機(jī)制
1、位點(diǎn)特異性酶切顯色機(jī)制
Suc-AAPF-pNA 末端連接生色基團(tuán) pNA，完整多肽無(wú)明顯黃色；糜蛋白酶、組織蛋白酶 G 特異性識(shí)別 Ala-Ala-Pro-Phe 序列，在苯丙氨酸 C 端位點(diǎn)切斷肽鍵，釋放游離對(duì)硝基苯胺；游離 pNA 在 405 nm 具有特征吸收，吸光度變化與酶活性正相關(guān)，實(shí)現(xiàn)蛋白酶活性定量檢測(cè)。
2、低自發(fā)水解維穩(wěn)機(jī)制
多肽經(jīng)過(guò)深度純化，去除短肽雜質(zhì)與游離 pNA，中性緩沖體系中非酶促自發(fā)水解速率極低，空白背景值小，大幅提升檢測(cè)信噪比，適合長(zhǎng)時(shí)間動(dòng)力學(xué)連續(xù)監(jiān)測(cè)。
3、酶動(dòng)力學(xué)參數(shù)測(cè)定機(jī)制
底物可配置梯度濃度溶液，用于測(cè)定 Km、Vmax 等動(dòng)力學(xué)常數(shù)，評(píng)價(jià)蛋白酶催化效率；同時(shí)可建立競(jìng)爭(zhēng)抑制模型，評(píng)估小分子化合物對(duì)絲氨酸蛋白酶的抑制活性。
4、高通量篩選適配機(jī)制
水溶性與有機(jī)助溶劑兼容性良好，DMSO 耐受度高，適配微孔板高通量體系，適合大批量蛋白酶抑制劑、激活劑化合物篩選。
5、生物體系溫和兼容機(jī)制
多肽底物理化性質(zhì)溫和，不直接抑制多種蛋白酶，不產(chǎn)生非特異性蛋白變性，可在生理 pH 區(qū)間構(gòu)建體外酶促反應(yīng)模型，模擬胞外蛋白酶炎癥相關(guān)作用通路。
三、主要應(yīng)用領(lǐng)域
1、糜蛋白酶體外酶活定量檢測(cè)
作為標(biāo)準(zhǔn)顯色底物，測(cè)定 α- 糜蛋白酶、β- 糜蛋白酶催化活性，用于酶制劑活力標(biāo)定、工藝優(yōu)化。
2、組織蛋白酶 G 活性分析
用于中性粒細(xì)胞來(lái)源組織蛋白酶 G 活性測(cè)定，支撐炎癥、免疫相關(guān)病理機(jī)制研究。
3、絲氨酸蛋白酶抑制劑高通量篩選
構(gòu)建微孔板比色模型，篩選天然產(chǎn)物、合成小分子蛋白酶抑制劑，開(kāi)發(fā)抗炎候選藥物。
4、酶動(dòng)力學(xué)與抑制機(jī)理研究
測(cè)定蛋白酶 Km、Ki 等動(dòng)力學(xué)參數(shù)，闡明化合物競(jìng)爭(zhēng)性 / 非競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用模式。
5、蛋白酶穩(wěn)定性與生化方法開(kāi)發(fā)
用于緩沖體系、溫度、pH 條件優(yōu)化，建立標(biāo)準(zhǔn)化蛋白酶檢測(cè)方法學(xué)。
6、生物化學(xué)科研與教學(xué)實(shí)訓(xùn)
適配酶促反應(yīng)、蛋白酶動(dòng)力學(xué)、抑制劑篩選教學(xué)實(shí)驗(yàn)，顯色信號(hào)穩(wěn)定，實(shí)驗(yàn)重復(fù)性?xún)?yōu)異。
四、使用方法與注意事項(xiàng)
使用方法
酶活檢測(cè)實(shí)驗(yàn)：精密稱(chēng)量 Suc-AAPF-pNA，無(wú)水 DMSO 配制 10–20 mM 儲(chǔ)備液，避光保存；按照實(shí)驗(yàn)方案稀釋至緩沖體系，加入蛋白酶樣品，恒溫孵育，酶標(biāo)儀 / 分光光度計(jì)持續(xù)監(jiān)測(cè) 405 nm 吸光度變化，計(jì)算酶活力；
抑制劑篩選實(shí)驗(yàn)：梯度配置待測(cè)化合物，與蛋白酶預(yù)孵育后加入底物啟動(dòng)反應(yīng)，對(duì)比吸光度變化評(píng)估抑制效果；
動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)：設(shè)置一系列底物濃度，采集反應(yīng)初始速率，擬合計(jì)算動(dòng)力學(xué)參數(shù)。
注意要點(diǎn)
多肽底物遇光、高溫易緩慢水解，粉末與工作溶液全程避光操作；
水溶液穩(wěn)定性較差，底物工作液建議現(xiàn)配現(xiàn)用，不宜長(zhǎng)時(shí)間常溫放置；
儲(chǔ)備液建議分裝凍存，避免反復(fù)凍融造成多肽降解，提升空白水解值；
操作佩戴防塵口罩、手套、護(hù)目鏡，避免粉塵吸入與皮膚黏膜接觸；
僅限實(shí)驗(yàn)室體外酶學(xué)科研、高通量篩選使用，嚴(yán)禁人體注射、口服、體內(nèi)直接給藥；
粉末出現(xiàn)明顯發(fā)黃、配制底物溶液空白吸光度持續(xù)偏高，代表多肽降解，禁止用于定量酶活實(shí)驗(yàn)；
本品高純多肽規(guī)格，游離 pNA 雜質(zhì)控制嚴(yán)格，溶解后可直接投入酶促反應(yīng)體系。
五、總結(jié)與展望
高純 Suc-AAPF-pNA 依托序列特異性強(qiáng)、本底自發(fā)水解低、405 nm 比色檢測(cè)便捷、DMSO 兼容性好、適配高通量篩選等核心優(yōu)勢(shì)，成為糜蛋白酶、組織蛋白酶 G 活性測(cè)定、絲氨酸蛋白酶抑制劑篩選領(lǐng)域核心標(biāo)準(zhǔn)化顯色多肽底物。有效解決粗品多肽底物雜質(zhì)高、空白水解嚴(yán)重、檢測(cè)背景偏高、動(dòng)力學(xué)數(shù)據(jù)重復(fù)性差等行業(yè)痛點(diǎn)，全面滿足高校酶學(xué)實(shí)驗(yàn)室、新藥篩選平臺(tái)、蛋白制劑研發(fā)機(jī)構(gòu)、炎癥藥理研究院各類(lèi)科研需求。
依托本品搭建的蛋白酶酶活檢測(cè)體系、抑制劑高通量篩選平臺(tái)、酶動(dòng)力學(xué)評(píng)價(jià)模型，廣泛支撐蛋白酶制劑開(kāi)發(fā)、抗炎藥物篩選、中性粒細(xì)胞炎癥機(jī)制、絲氨酸蛋白酶病理功能等科研項(xiàng)目。隨著炎癥藥理、蛋白酶靶向藥物、高通量體外篩選技術(shù)持續(xù)發(fā)展，高純 Suc-AAPF-pNA 將在酶工程、生物化學(xué)、藥理篩選領(lǐng)域持續(xù)發(fā)揮關(guān)鍵作用，為蛋白酶活性定量、抑制劑機(jī)制研究提供
酶切活性穩(wěn)定、純度可控、批次高度統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)化顯色多肽底物保障。