"MHCC97-H:高轉(zhuǎn)移人肝癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長：貼壁

可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)HAO與不HAO至關重要的考驗。很多同學都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺HAO的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞不行了，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非常肯定地說，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當然會有脾氣的，大家爭取做到因材施教，比如試試下面的“四步消化法”。（以難消化細胞為例），具體操作：1)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍（目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉）。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更HAO一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了）3)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比)4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況把握）。

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

MDA-468細胞類似產(chǎn)品：：HOC-1細胞、SO-Rb 50細胞、TCCPAN2細胞

L78細胞類似產(chǎn)品：：L929(NCTC)細胞、HEC-151細胞、MCF-12F細胞

Sp 2817細胞類似產(chǎn)品：：RPMI1846細胞、OUMS27細胞、NCI-BL6細胞

MGc80-3細胞類似產(chǎn)品：：Hep 3B細胞、T98-G細胞、OVCAR432細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞背景資料：來源于中山醫(yī)院，用人肝癌細胞株MHCC９７-H接種裸鼠，進行３次肺轉(zhuǎn)移篩選，取肺轉(zhuǎn)移瘤建成皮下接種后高度自發(fā)性肺轉(zhuǎn)移的肝癌細胞系

MHCC97-H:高轉(zhuǎn)移人肝癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

H-28細胞類似產(chǎn)品：：NCIH2126細胞、NCI-H2228細胞、UACC-812細胞

HMEC-1細胞類似產(chǎn)品：：LICCF細胞、5637細胞、APRE-19細胞

RCC10 RGB細胞類似產(chǎn)品：：HCC1187細胞、HEC-1B細胞、Rat Skin 1細胞

細胞傳代培養(yǎng)的胰酶消化法：傳代培養(yǎng)：是指細胞從一個培養(yǎng)瓶以１：２或１：２以上的比例轉(zhuǎn)移，接種到另一培養(yǎng)瓶的培養(yǎng)。傳代細胞，可根據(jù)不同細胞采取不同的方法進行細胞傳代。貼壁生長的細胞用消化法傳代，部分貼壁的細胞用直接吹打或用硅膠軟刮的刮除法傳代。懸浮細胞可采用加入等量新鮮培養(yǎng)基后直接吹打分散進行傳代，或用自然沉降法加入新培養(yǎng)基后再吹打分散進行傳代。實驗步驟：①入無菌室之前用肥皂洗手，再用７５% 的酒精擦拭消毒雙手；②倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)，確定細胞是否傳代及細胞需要稀釋的倍數(shù)。將培養(yǎng)用液３７℃下預熱；③超凈臺臺面應整潔，用７５%酒精棉球擦拭清潔；④打開超凈工作臺的紫外燈照射臺面２０min左右，關閉紫外燈，打開風機清潔空氣除去臭氧；⑤點燃酒精燈;取出無菌試管，巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮頭;過酒精燈火焰略燒后插在無菌試管內(nèi)；⑥將培養(yǎng)用液瓶口用７５%酒精消毒，過酒精燈火焰后斜置于酒精燈旁的架子上；⑦倒掉培養(yǎng)細胞的舊培養(yǎng)基。酌情可用２-３ml Hanks液洗去殘留的就培養(yǎng)基，或用少量胰酶涮洗一下；⑧每個大培養(yǎng)瓶加入１ml胰酶，小培養(yǎng)瓶用量酌減，蓋HAO瓶蓋后在倒置顯微鏡下觀察。當細胞收回突起變圓時立即翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶，使細胞脫離胰酶，然后將胰酶倒掉。注意勿使細胞提早脫落入消化液中；⑨加入少量的含血清的新鮮培養(yǎng)基，反復吹打消化HAO的細胞使其脫壁并分散，再根據(jù)分傳瓶數(shù)補加一定量的含血清的新鮮培養(yǎng)基(７-１０ml/大瓶;３-５ml/小瓶)制成細胞懸液，然后分裝到新培養(yǎng)瓶中。蓋HAO瓶蓋，適度擰緊后稍回轉(zhuǎn)，以利于CO２的進入，將培養(yǎng)瓶放回CO２培養(yǎng)箱；⑩對懸浮培養(yǎng)細胞，步驟７-９不做。直接將細胞懸液進行離心去除舊培養(yǎng)基上清，加入新鮮培養(yǎng)基，然后分裝到各瓶中。

細胞傳代方法：１：２傳代

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

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細胞生長特性：貼壁生長

細胞培養(yǎng)中常用設施及設備：實驗室設計：細胞培養(yǎng)是一種無菌操作技術，要求工作環(huán)境和條件必須保證無微生物污染和不受其它有害因素的影響。細胞培養(yǎng)室和設計原則是防止微生物污染和有害因素影響，要求工作環(huán)境清潔、空氣清新，干燥和無煙塵。細胞培養(yǎng)室的設計原則一般是無菌操作區(qū)設在室內(nèi)較少走動的內(nèi)側(cè)，常規(guī)操作和封閉培養(yǎng)于一室，而洗刷消毒在另一室。常用設施及設備：1)超凈工作臺：也稱凈化工作臺，分為側(cè)流式、直流式和外流式三大類。2)無菌操作間：一般由更衣間、緩沖間和操作間三部分組成。操作間放置凈化工作臺及二氧化碳培養(yǎng)箱、離心機、倒置顯微鏡等。緩沖間可放置電冰箱、冷藏器及消毒HAO的無菌物品等。3)操作間：普通培養(yǎng)箱、離心機、水浴鍋、定時鐘、普通天平及日常分析處理物。4)洗刷消毒間：烤箱、消毒鍋、蒸餾水處理器及酸缸等。5)分析室：顯微鏡、計算機及打印機等。

PA I細胞類似產(chǎn)品：：GM00637H細胞、P3J.HR1K細胞、EU-2細胞

MC-38細胞類似產(chǎn)品：：OE-21細胞、SUDHL8細胞、HeLa S3細胞

Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細胞類似產(chǎn)品：：SHEE細胞、NCI-H660細胞、NS-1-Ag4-1細胞

NCI-H596細胞類似產(chǎn)品：：MDCK supertube細胞、Vero C1008細胞、Los Angeles Prostate Cancer-4細胞

RC13細胞類似產(chǎn)品：：JF305細胞、BE2-C細胞、HSC5細胞

Leukemia L1210細胞類似產(chǎn)品：：Normal Rat, August 3, 1983細胞、NCI.H226細胞、HCGC細胞

SupB15WT細胞類似產(chǎn)品：：H-1944細胞、IGROV 1細胞、ME 180細胞

Hs 695T細胞類似產(chǎn)品：：P3/NS1/1-Ag4-1細胞、L-6細胞、Hos TE-85細胞

CFPAC細胞類似產(chǎn)品：：NCIH524細胞、HEL9217細胞、DMS-153細胞

RPMI #1846細胞類似產(chǎn)品：：KE37細胞、HSC4細胞、HS578T細胞

RC-4B/C細胞類似產(chǎn)品：：SW-948細胞、BA/F3細胞、SK Mel28細胞

HCC-1395細胞類似產(chǎn)品：：SCaBER細胞、MOLP8細胞、HO1-N1細胞

Jurkat clone A3細胞類似產(chǎn)品：：LL/2 (LLC1)細胞、RTMC細胞、RIN m5F細胞

A-427細胞類似產(chǎn)品：：D407細胞、Centre Antoine Lacassagne-62細胞、SL-1細胞

MCA-38細胞類似產(chǎn)品：：MILE SVEN 1細胞、MOLT 3細胞、OCI Ly10細胞

PC14細胞類似產(chǎn)品：：LMTK-細胞、Sup T-1細胞、HOPC細胞

PC14細胞類似產(chǎn)品：：LMTK-細胞、Sup T-1細胞、HOPC細胞

DU145細胞類似產(chǎn)品：：RKN細胞、Mc Coy細胞、1.1B4細胞

EFM-192A細胞類似產(chǎn)品：：H524細胞、Anip 973細胞、Mv1Lu細胞

YD15細胞類似產(chǎn)品：：Hs940T細胞、Emory University-2細胞、SKNO-1細胞

SK-N-BE(2)細胞類似產(chǎn)品：：H2023細胞、NEC8細胞、CALU 1細胞

2PK3細胞類似產(chǎn)品：：NIH 3T6細胞、Lewis-Lung細胞、NTERA2D1細胞

Jurkat E6細胞類似產(chǎn)品：：JHH-2細胞、P3J-HR-1細胞、MOLM13細胞

Pt K1細胞類似產(chǎn)品：：Ly18細胞、PZ-HPV-7細胞、H2452細胞

MHCC97-H:高轉(zhuǎn)移人肝癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

MS751細胞類似產(chǎn)品：：INS1細胞、EJ 138細胞、HEK-293 c18細胞

H2452細胞類似產(chǎn)品：：BrCL12細胞、PTK2細胞、EB2細胞

Hs863T細胞類似產(chǎn)品：：NCIH1836細胞、LC-1細胞、RDES-1細胞

YT細胞類似產(chǎn)品：：LLC細胞、HCEpiC細胞、SKNMC細胞

H-1436細胞類似產(chǎn)品：：PNT1/A細胞、SUM-52-PE細胞、Hca-F細胞

LIXC002細胞類似產(chǎn)品：：OCI/AML4細胞、Becker細胞、PC2細胞

SNUC1細胞類似產(chǎn)品：：HSC3細胞、PY8119細胞、AML-EOL-1細胞

HN4細胞類似產(chǎn)品：：LA4細胞、MDA361細胞、H-1618細胞

KU 812F細胞類似產(chǎn)品：：RPMI-8226S細胞、MRC-9細胞、HCC1171細胞

LTEP-a2細胞類似產(chǎn)品：：S37細胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1細胞、WRL68細胞

IMR90細胞類似產(chǎn)品：：Natural Killer-92細胞、Line 522細胞、COLO684細胞

NCI-H2227細胞類似產(chǎn)品：：H-2286細胞、HC11細胞、FAT細胞

MS1細胞類似產(chǎn)品：：H1522細胞、MS-751細胞、YES-2細胞

G-292細胞類似產(chǎn)品：：U-CH1細胞、NCTC clone 1469細胞、H-647細胞

Uhth-74細胞類似產(chǎn)品：：HOS (TE85, Clone F5)細胞、P30-OHK細胞、OSKM-1細胞

Sp2/0-Ag-14細胞類似產(chǎn)品：：H1404細胞、SW 1463細胞、MCAEC細胞

HBVP細胞類似產(chǎn)品：：NCIH1793細胞、Panc-8_13細胞、Reuber H35細胞

MCMEC細胞類似產(chǎn)品：：IB-RS2細胞、HUT28細胞、PC-3/M細胞

SHG44細胞類似產(chǎn)品：：HEK293S細胞、SGC-7901/DDP細胞、T24(ECV304)細胞

6-T CEM細胞類似產(chǎn)品：：1.1B4細胞、TR146細胞、Walker256細胞

University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細胞類似產(chǎn)品：：A 375細胞、RLE-6TN細胞、NCM-460細胞

University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細胞類似產(chǎn)品：：A 375細胞、RLE-6TN細胞、NCM-460細胞

HOP 92細胞類似產(chǎn)品：：WiDr/S細胞、624mel細胞、DI-TNC1細胞

16HBEo-細胞類似產(chǎn)品：：NCIH3255細胞、MH7A細胞、aNK細胞

159 PT細胞類似產(chǎn)品：：T2細胞、H526細胞、HCC1937細胞

MFM-223細胞類似產(chǎn)品：：SKLU-1細胞、KM12-SM細胞、P3X63Ag8-6-5-3細胞

LS411N細胞類似產(chǎn)品：：H-510細胞、GM2219C細胞、MC-CAR細胞

Reuber-H-35 hepatoma細胞類似產(chǎn)品：：HCC-1588細胞、MPC5細胞、SW-527細胞

KG1A細胞類似產(chǎn)品：：Colon-26細胞、UWB1.289+BRCA1細胞、Anip973細胞

CL34細胞類似產(chǎn)品：：HuP-T4細胞、RCCJF細胞、OCI AML3細胞

NIH:OVCAR-3細胞類似產(chǎn)品：：Super Tube細胞、HDLM-2細胞、IMR32細胞

bEnd.3[BEND3]細胞類似產(chǎn)品：：H1819細胞、FL83B細胞、BC3 H1細胞

MGH-U1細胞類似產(chǎn)品：：OCI-AML2細胞、IM-9細胞、GM02219C細胞

SVHUC細胞類似產(chǎn)品：：H-2052細胞、Factor Dependent Cell-Paterson 1細胞、NCI-H716細胞

LAN-1細胞類似產(chǎn)品：：NCIH460細胞、KMM1細胞、BTI-Tn5B14細胞

BXPC3細胞類似產(chǎn)品：：ARPE-19細胞、GT38細胞、SL-29細胞

HuO9細胞類似產(chǎn)品：：SW1990細胞、Nb-2細胞、MCF 7B細胞

KNS-81細胞類似產(chǎn)品：：H-1876細胞、B16-F10細胞、H1734細胞

H-1395細胞類似產(chǎn)品：：A549-Taxol細胞、NCI-322細胞、UO-31細胞

Panc05.04細胞類似產(chǎn)品：：HCPEpiC細胞、SW.620細胞、AtT20細胞

LNCaP細胞類似產(chǎn)品：：Y79細胞、CCK81細胞、PE/CA-PJ34細胞

MKN-7細胞類似產(chǎn)品：：KM12 SM細胞、108CC15細胞、NR-8383細胞

HT-22細胞類似產(chǎn)品：：HCC 70細胞、Lewis lung carcinoma line 1細胞、Walker 256細胞

H35細胞類似產(chǎn)品：：OV 2008細胞、6T-CEM細胞、OVCAR8細胞

KP-N-RT細胞類似產(chǎn)品：：NCIH1563細胞、Ca-Ski細胞、HG2855細胞

PAI細胞類似產(chǎn)品：：UPCISCC090細胞、MS751細胞、H1404細胞

Hs281T細胞類似產(chǎn)品：：HBdSMC細胞、T9細胞、MC3T3-E1 Subclone 4細胞

BpRc1細胞類似產(chǎn)品：：hTERT-HME1細胞、H1048細胞、IM-9細胞

OE33細胞類似產(chǎn)品：：HPMC細胞、Ramos 2G6 4C10細胞、SK Hep1細胞

FUOV1細胞類似產(chǎn)品：：COLO320 DM細胞、MonoMac 6細胞、MNNGHOS細胞

LN 229細胞類似產(chǎn)品：：RBMVEC細胞、SUM 52PE細胞、COLO-679細胞

KG1A細胞類似產(chǎn)品：：Colon-26細胞、UWB1.289+BRCA1細胞、Anip973細胞

HEK293-EBNA細胞類似產(chǎn)品：：Panc 2.03細胞、Hs746T細胞、U-937細胞

CLONE M3細胞類似產(chǎn)品：：P3-X63-Ag 8.653細胞、A3細胞、HPAF-II細胞

J 111細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H2030細胞、MRMT-1細胞、L929細胞

H-1623細胞類似產(chǎn)品：：HOP-92細胞、Caki-2細胞、MFM-223細胞

Balb/c3T3細胞類似產(chǎn)品：：IPLB-SF 21AE細胞、DLM8細胞、BL6細胞

Reuber-H-35 hepatoma細胞類似產(chǎn)品：：HCC-1588細胞、MPC5細胞、SW-527細胞

Reuber-H-35 hepatoma細胞類似產(chǎn)品：：HCC-1588細胞、MPC5細胞、SW-527細胞

MGC-803細胞類似產(chǎn)品：：NMC-G1細胞、Leukemic 1210細胞、SKMEL-24細胞

HUT 226細胞類似產(chǎn)品：：HCC-2185細胞、HCoEpiC細胞、CMT 167細胞

SW 756細胞類似產(chǎn)品：：G422細胞、RBL-1細胞、CCD 966SK細胞

HC11 Mammary Epithelium細胞類似產(chǎn)品：：F98細胞、H-1734細胞、4T1.2細胞

L-cells細胞類似產(chǎn)品：：UPCI-SCC-090細胞、HCT 116細胞、Hopkins-92細胞

G401細胞類似產(chǎn)品：：PaTu-8988s細胞、GM03571細胞、H322細胞

EO771細胞類似產(chǎn)品：：NCIH841細胞、BALB/3T3 cl. A31細胞、Hs 852.T細胞

293-FT細胞類似產(chǎn)品：：P3-NS1/1Ag 4.1細胞、H-2066細胞、LADMAC細胞

Hs445細胞類似產(chǎn)品：：SK-RC-39細胞、CAL85-1細胞、CEM-C1細胞

NCI-H1836細胞類似產(chǎn)品：：GRSL細胞、WM 266-4細胞、Jurkat 77細胞

SW-1783細胞類似產(chǎn)品：：FRhK4細胞、CHOK1細胞、U14細胞

207細胞類似產(chǎn)品：：CHOS細胞、Panc-03.27細胞、HEC1-A細胞

EC-GI細胞類似產(chǎn)品：：MV-3細胞、PK13細胞、293-GP細胞

T-84細胞類似產(chǎn)品：：SK-RC 39細胞、HCC1500細胞、BHP10-3細胞

Hs688(A)T細胞類似產(chǎn)品：：WM266-4細胞、mousepodocyte細胞、HTR8/SVneo細胞

NP69細胞類似產(chǎn)品：：H-2023細胞、LM(TK-)細胞、NCI-H1573細胞

HEK;293細胞類似產(chǎn)品：：HCC1954 BL細胞、B16/F1細胞、PaTu 8988 S細胞

F442A細胞類似產(chǎn)品：：TO 175.T細胞、H23細胞、SN12-PM6細胞

HGSMC細胞類似產(chǎn)品：：TE12細胞、RC92A細胞、NCI H82細胞

HSKMC細胞類似產(chǎn)品：：C8166-CD4細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-157細胞、SIRC細胞

HSKMC細胞類似產(chǎn)品：：C8166-CD4細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-157細胞、SIRC細胞

H-1184細胞類似產(chǎn)品：：MES23.5細胞、Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細胞、MH-22a細胞

WEHI 164細胞類似產(chǎn)品：：HFLS-OA細胞、H-250細胞、Neuro-2a細胞

MHCC97-H:高轉(zhuǎn)移人肝癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

Hs 739.T細胞類似產(chǎn)品：：U138-MG細胞、HUVSMC細胞、OVCA 432細胞

HFLS細胞類似產(chǎn)品：：MPC11細胞、HCC-9204細胞、HEM細胞

HGC27細胞類似產(chǎn)品：：SK BR 03細胞、MDA-134細胞、Hep G2細胞

SKNEP-1細胞類似產(chǎn)品：：HuLEC-5a細胞、KM-12細胞、786-O細胞

MDA-MB-231細胞類似產(chǎn)品：：KYSE70細胞、MLA-144細胞、CTX TNA2細胞

KYSE180細胞類似產(chǎn)品：：RSC-96細胞、SU4細胞、JROECL21細胞

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