"NCI-H838:人肺癌復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長：貼壁

可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)HAO與不HAO至關(guān)重要的考驗。很多同學都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺HAO的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞不行了，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當然會有脾氣的，大家爭取做到因材施教，比如試試下面的“四步消化法”。（以難消化細胞為例），具體操作：1)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍（目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉）。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更HAO一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了）3)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比)4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況把握）。

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

KP-N-RT-BM細胞類似產(chǎn)品：：HCT-116細胞、190PT細胞、VERO C 1008細胞

Mc Ardle 7777細胞類似產(chǎn)品：：PLC-PRF-5細胞、MBMEC細胞、SUDHL-6細胞

MADB-106細胞類似產(chǎn)品：：MNNG/HOS Clone F-5細胞、MUTZ-1細胞、Caov-3細胞

IPEC1細胞類似產(chǎn)品：：SKNBE2C細胞、hFOB細胞、Mel526細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞背景資料：該細胞于１９８４年建系，源于一位５９歲患有非小細胞肺癌的白人男性吸煙者，從患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶分離而來。

NCI-H838:人肺癌復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

HOP 62細胞類似產(chǎn)品：：SNU886細胞、NCI-SNU-16細胞、H-1105細胞

MNNG細胞類似產(chǎn)品：：I90細胞、Clone 929細胞、SW 839細胞

P 815細胞類似產(chǎn)品：：SPCA1細胞、SNU354細胞、EU-3細胞

細胞培養(yǎng)無菌操作的演示：凡是帶入超凈工作臺內(nèi)的酒精、PBS、培養(yǎng)基、胰蛋白酶的瓶子均要用７５％酒精擦拭瓶子的外表面；靠近酒精燈火焰操作。器皿使用前必須過火滅菌，繼續(xù)使用的器皿(如瓶蓋、滴管)要放在GAO處，使用時仍要過火。各種操作要靠近酒精燈，動作要輕、準確，不能亂碰。如吸管不能碰到廢液缸。吸取兩種以上的使用液時要注意更換吸管，防止交叉污染。玻璃器械洗消：一、新的玻璃器皿的洗消：自來水刷洗，除去灰塵。烘干、泡：烤箱中烘干，然后再浸入５％稀中１２小時以除去臟物、鉛、等物。刷洗、烘干：１２小時后立即用自來水沖洗，再用洗滌劑刷洗，自來水沖干凈后用烤箱烘干；泡酸、清洗：用清潔液浸泡１２小時，然后從酸缸內(nèi)撈出器皿用自來水沖洗１５次，Zui后蒸餾水沖洗３-５次和用雙蒸水過３次。烘干、包裝：洗干凈后先烘干，然后用牛皮紙(油光紙)包裝。GAO壓消毒：包裝HAO的器皿裝入GAO壓鍋內(nèi)蓋HAO蓋子，打開開關(guān)和安全閥，當蒸氣成直線上升時，關(guān)閉安全閥，當指針指向１５磅時，維持２０-３０分鐘。GAO壓消毒后烘干。二、舊的玻璃器皿的洗消：刷洗、烘干：使用過的玻璃器皿可直接泡入來蘇爾液或洗滌劑溶液中，泡過來蘇爾溶液(洗滌劑)的器皿要用清水刷洗干凈，然后烘干。泡酸、清洗：烘干后泡入清潔液(酸液)，１２小時后從酸缸內(nèi)撈出器皿立即用自來水沖洗(避免蛋白質(zhì)干涸后粘附于玻璃上難以清洗)，再用蒸餾水沖洗３次。烘干、包裝：洗干凈的器皿烘干后取出用牛皮紙(油光紙)等包裝。

細胞傳代方法：１：３-１：６傳代；２-３天換液１次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

NCI-H838:人肺癌復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長特性：貼壁生長

一般使用trypsin-EDTA 濃度為0.25%trypsin-0.53mM EDTA.2Na或0.05%trypsin-0.02mM EDTA.2Na。消化液濃度過GAO時，易造成培養(yǎng)基中細胞碎片增多，黑渣子增多，常規(guī)細胞傳代時建議用0.05%的胰酶進行消化，對于難消化的細胞可采用0.25%胰酶進行消化，細胞密度過GAO超過80%時，采用分步消化法。胰酶儲存在-20°C，解凍在4°C進行，次開瓶后應(yīng)立即少量分裝于無菌試管中，保存于-20°C，避免反復(fù)冷凍解凍造成trypsin之活性降低，并可減少污染之機會。胰酶消化的程度是細胞培養(yǎng)中的一個關(guān)鍵步驟：消化過度細胞碎片增多，黑渣子增多，細胞會成片脫落，嚴重影響細胞活性，并有部分細胞漂浮，隨棄去的胰酶流失；消化不足則細胞難于從瓶壁上吹下，反復(fù)吹打同樣也會損傷細胞活性。不同細胞對消化液的敏感性不同，胰酶消化的時間也會有差異。胰酶消化時間與胰酶的濃度，是否含EDTA，胰酶的儲存時間，胰酶的儲存溫度，是否反復(fù)凍融，消化加入的胰酶體積，消化溫度及細胞的密度有關(guān)。對于新購買的細胞，建議客戶先用低濃度的胰酶仔細去摸索一下消化時間，可每隔1分鐘鏡下觀察細胞是否變圓，記錄Zui佳消化時間，下一次操作參考之前的記錄來控制時間即可。

SNB-19細胞類似產(chǎn)品：：LP1細胞、CCD18細胞、SKOV3細胞

Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細胞類似產(chǎn)品：：Hx-147細胞、H510A細胞、NIH:OVCAR3細胞

T24細胞類似產(chǎn)品：：KCL22S細胞、GA-10細胞、UCLA-RO 81細胞

MDAMB330細胞類似產(chǎn)品：：Sarcoma OSteogenic-2細胞、OsA-CL細胞、MADISON LUNG TA-109細胞

S180細胞類似產(chǎn)品：：SK-N-BE(2)細胞、HT clone H9細胞、NCI-H1975細胞

SW 1573細胞類似產(chǎn)品：：Sp 2817細胞、CBRH7919細胞、MDA231細胞

MC3T3-E1(C4)細胞類似產(chǎn)品：：FHCRC subclone 11細胞、PC 61.5.3細胞、P388D1細胞

P3JHR-1細胞類似產(chǎn)品：：SV40-MES13細胞、NCI-H920細胞、SKNBE細胞

MCF-10A細胞類似產(chǎn)品：：NALM6細胞、Human Embryo Kidney-2細胞、MCF7-CTRL細胞

NCIH889細胞類似產(chǎn)品：：LS180細胞、SK-HEP-1細胞、FHL 124細胞

870細胞類似產(chǎn)品：：H1650細胞、BTI-Tn5B14細胞、EFO 27細胞

NCI-H676細胞類似產(chǎn)品：：SKN-SH細胞、OCILY-3細胞、BC-027細胞

COLO 320F細胞類似產(chǎn)品：：G-402細胞、IAR-20細胞、Immortalized Human Hepatocytes細胞

NCIH2135細胞類似產(chǎn)品：：MES-SA-Dx5細胞、OE-21細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-468細胞

CaSki細胞類似產(chǎn)品：：HSF2細胞、EL 4細胞、KMS26細胞

NS1-Ag 4/1細胞類似產(chǎn)品：：Meat Animal Research Center-145細胞、AMO-1細胞、ESC細胞

NS1-Ag 4/1細胞類似產(chǎn)品：：Meat Animal Research Center-145細胞、AMO-1細胞、ESC細胞

H-1563細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H2023細胞、MIN6細胞、NCIH1568細胞

HGC-27細胞類似產(chǎn)品：：FLS細胞、H510細胞、Roswell Park Memorial Institute 7951細胞

SHG 44細胞類似產(chǎn)品：：HD-LM-2細胞、Hs840T細胞、RT4-D6P2T細胞

CAMA-1細胞類似產(chǎn)品：：Human Microglia Clone 3細胞、PC3M-IE8細胞、WERI細胞

HO8910細胞類似產(chǎn)品：：HEC-1B細胞、HBZY 1細胞、H-2330細胞

KG1細胞類似產(chǎn)品：：BE2M17細胞、U-87MG ATCC細胞、Hs 766T細胞

NCIH508細胞類似產(chǎn)品：：UACC893細胞、SUM-52PE細胞、Evsa T細胞

NCI-H838:人肺癌復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

Buffalo Rat Liver-3A細胞類似產(chǎn)品：：VMRCLCD細胞、Hs940.T細胞、Verda reno細胞

Natural Killer-92細胞類似產(chǎn)品：：BrCL15細胞、BEL7405細胞、H-865細胞

Human Hepatocyte Line 5細胞類似產(chǎn)品：：COLO206F細胞、NB.4細胞、Huh7.5細胞

KASUMI1細胞類似產(chǎn)品：：9L細胞、Tca-8113細胞、NCI-H295R細胞

HS-766-T細胞類似產(chǎn)品：：HuCCT-1細胞、COLO 394細胞、ONS-76細胞

SKRC-39細胞類似產(chǎn)品：：H1155細胞、SPDC-CCL141細胞、MOLT-3細胞

HBZY 1細胞類似產(chǎn)品：：HOS-MNNG細胞、HEK-293F細胞、REC1細胞

RBL細胞類似產(chǎn)品：：MMAc.SF細胞、NK92MI細胞、H747細胞

NK-92.05細胞類似產(chǎn)品：：32D-Cl3細胞、H1573細胞、NCI-H146細胞

HMC3細胞類似產(chǎn)品：：LC-1Sq細胞、CG-4細胞、HConEpic細胞

SACCLM細胞類似產(chǎn)品：：HEK 293細胞、HCT/Taxo1細胞、Det. 562細胞

MSTO-211細胞類似產(chǎn)品：：HSC2細胞、TFK1細胞、SK.MEL.2細胞

U-343細胞類似產(chǎn)品：：P3HR1-BL細胞、HCCC9810細胞、786-0細胞

AML12細胞類似產(chǎn)品：：MC-3T3-E1細胞、PIG3細胞、Panc-08.13細胞

NTera2/D1細胞類似產(chǎn)品：：PK13細胞、LOUNH91細胞、HEK293A細胞

CBRH7919細胞類似產(chǎn)品：：CHP100細胞、MDA-PCa-2b細胞、BT 325細胞

NTERA2-cloneD1細胞類似產(chǎn)品：：GL-261細胞、MB49細胞、SUNE 1細胞

Z310細胞類似產(chǎn)品：：NCI660細胞、NCI-H2122細胞、TE354.T細胞

Caco2-BBE細胞類似產(chǎn)品：：Hs729細胞、OCI-AML5細胞、Embryonic Bovine Tracheal cells細胞

A549-Taxol細胞類似產(chǎn)品：：MLM細胞、KYSE410細胞、LNCaP-Clone-FGC細胞

SNU520細胞類似產(chǎn)品：：H2170細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細胞、MPASMC細胞

BC3H1細胞類似產(chǎn)品：：T9細胞、OC 316細胞、NS-20Y細胞

Ketr-3細胞類似產(chǎn)品：：C42細胞、CCD 966SK細胞、MES-SA/Dx5細胞

HRMC細胞類似產(chǎn)品：：Institute for Medical Research-90細胞、3T3-Swiss細胞、Hs852T細胞

TE85細胞類似產(chǎn)品：：tdott細胞、NCIH208細胞、Hs 840.T細胞

Mink細胞類似產(chǎn)品：：ROS 17/28細胞、SUIT2細胞、Human Microglia Clone 3細胞

Hs 611.T細胞類似產(chǎn)品：：PE/CA-PJ34 (clone C12)細胞、P3/X63-Ag8細胞、HPAF/CD18細胞

NTERA2-cloneD1細胞類似產(chǎn)品：：GL-261細胞、MB49細胞、SUNE 1細胞

SHEE細胞類似產(chǎn)品：：COLO320/DM細胞、SBC5細胞、Jurkat (clone E6-1)細胞

hTERT-RPE細胞類似產(chǎn)品：：NPA'87細胞、MEG-01細胞、Adeno-293細胞

Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細胞類似產(chǎn)品：：U-87 MG細胞、LAN-1細胞、MeT 5A細胞

CAL-12T細胞類似產(chǎn)品：：BEL-7404細胞、RF/6A細胞、NCI-HUT-292細胞

SNU-423細胞類似產(chǎn)品：：CNE-2細胞、SRA01/04 (HLE)細胞、CTLA4 Ig-24細胞

U-118-MG細胞類似產(chǎn)品：：KP4細胞、Hs611T細胞、NB-9細胞

STTG1細胞類似產(chǎn)品：：QGY 7701細胞、LNCaP-Clone-FGC細胞、SKRC20細胞

Capan-2細胞類似產(chǎn)品：：H-1341細胞、Hopkins-92細胞、WEHI-3B細胞

HBSMC細胞類似產(chǎn)品：：Hs 832(C).T細胞、HC11 Mammary Epithelium細胞、EL4細胞

T24細胞類似產(chǎn)品：：KCL22S細胞、MDA PCa 2b細胞、RGC5細胞

MOVAS-1細胞類似產(chǎn)品：：Human Liver-7702細胞、NCI-H460細胞、WM266細胞

Nb-2細胞類似產(chǎn)品：：C666-1細胞、SK MEL 5細胞、CL40細胞

TM3細胞類似產(chǎn)品：：HRCEC細胞、NS653細胞、HSC-1細胞

HCC 38細胞類似產(chǎn)品：：NCTC1469細胞、Ku812細胞、NCI-H2171細胞

PSN-1細胞類似產(chǎn)品：：BJ1細胞、NB-19細胞、293E細胞

NCI-H1238細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1668細胞、BAC1.2F5細胞、SKMEL-31細胞

OVCAR 8細胞類似產(chǎn)品：：CCRF-CEM/S細胞、Ball 1細胞、JIMT細胞

A-375.S2細胞類似產(chǎn)品：：LN-229細胞、H35細胞、HCT 15細胞

A549 ATCC細胞類似產(chǎn)品：：ECC1細胞、NCI-H2023細胞、NCIH2122細胞

HTori3細胞類似產(chǎn)品：：GM637A細胞、MDA330細胞、P30/Ohkubo細胞

Reuber H-35細胞類似產(chǎn)品：：STO細胞、Hs940-T細胞、PL 5細胞

Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細胞類似產(chǎn)品：：Hx-147細胞、H510A細胞、NIH:OVCAR3細胞

Leukemic 1210細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H2108細胞、H-1693細胞、Co320細胞

MCA-38細胞類似產(chǎn)品：：MILE SVEN 1細胞、MOLT 3細胞、OCI Ly10細胞

TGW-I-nu細胞類似產(chǎn)品：：NOK細胞、N1E-115細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-157細胞

A375-MEL細胞類似產(chǎn)品：：Hs 746.T細胞、SKLU-1細胞、Porcine Kidney-15細胞

KYSE270細胞類似產(chǎn)品：：2780CP細胞、P3JHR1細胞、BALB/3T3細胞

S.B.細胞類似產(chǎn)品：：BEL7402細胞、HEK-293-EBNA細胞、DU 145細胞

MDA-MB-157細胞類似產(chǎn)品：：A 172細胞、KGN細胞、LOUNH91細胞

NW-MEL-38細胞類似產(chǎn)品：：LL/2(LLc1)細胞、D324 Med細胞、NCIH1944細胞

NW-MEL-38細胞類似產(chǎn)品：：LL/2(LLc1)細胞、D324 Med細胞、NCIH1944細胞

OVCA 432細胞類似產(chǎn)品：：YES2細胞、NT-2細胞、HOC細胞

5-8F細胞類似產(chǎn)品：：Hs852細胞、TE1細胞、NCI-H1417細胞

CNE1-LUC細胞類似產(chǎn)品：：TE3A細胞、C643細胞、H-889細胞

IBRS2細胞類似產(chǎn)品：：DoTc2-4510細胞、NCI-H1092細胞、SW780細胞

He-La細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1703細胞、J 82細胞、THP1細胞

QBC-939細胞類似產(chǎn)品：：RC13細胞、TSUpr1細胞、P31/Fujioka細胞

H1299細胞類似產(chǎn)品：：C-4-I細胞、Jurkat細胞、T8細胞

NCI-H1930細胞類似產(chǎn)品：：TCC Sup細胞、Hs695細胞、NCI-H1793細胞

AE1201細胞類似產(chǎn)品：：COLO 357細胞、WM-266-mel細胞、MM1S細胞

K299細胞類似產(chǎn)品：：CL34細胞、H-2347細胞、NK-92細胞

COV 504細胞類似產(chǎn)品：：HGBEC細胞、NCI-H520細胞、L-132細胞

3T3-A31細胞類似產(chǎn)品：：RBE細胞、Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細胞、SupB15WT細胞

OCI/AML-3細胞類似產(chǎn)品：：MDST8細胞、293FT細胞、He La細胞

THLE-3細胞類似產(chǎn)品：：Human podocyte細胞、SKMES細胞、95D細胞

UCLA SO M14細胞類似產(chǎn)品：：H-220細胞、CEF細胞、C2BBe 1細胞

NCIH1838細胞類似產(chǎn)品：：High Five細胞、A-20細胞、RMS 1598細胞

SNU-354細胞類似產(chǎn)品：：SK RC 20細胞、Ketr-3細胞、NCTC-1469細胞

MOLM-13細胞類似產(chǎn)品：：NCI N87細胞、Sol8細胞、WEHI3B細胞

TOG細胞類似產(chǎn)品：：Human Epidermoid carcinoma #2細胞、H441細胞、CCRF-SB細胞

TSCCa細胞類似產(chǎn)品：：UWB1-289細胞、Hs 863.T細胞、OCI-LY-8細胞

NCIH1836細胞類似產(chǎn)品：：WM-451Lu細胞、HUT-125細胞、OVCAR 433細胞

LAPC-4細胞類似產(chǎn)品：：MESSA Dx5細胞、COR-L51細胞、B95.8細胞

RetroPack PT67細胞類似產(chǎn)品：：MAD109細胞、CAL78細胞、T84細胞

NCI-H838:人肺癌復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

NCI-SNU-449細胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB-330細胞、D-341Med細胞、EOC20細胞

Sup T-1細胞類似產(chǎn)品：：NTERA-2 cl.D1細胞、MC116細胞、SK-MEL-MeWo細胞

SKMel-5細胞類似產(chǎn)品：：WC00097細胞、Hepatoma-22細胞、HL-1細胞

P3X63 AG 8.653細胞類似產(chǎn)品：：C33細胞、P-2003細胞、PANC-10-05細胞

Human Corneal Epithelial cells-Transformed細胞類似產(chǎn)品：：NCIH1755細胞、NCI H69細胞、WEHI-3B細胞

A-498細胞類似產(chǎn)品：：Raji細胞、HBSMC細胞、A2780/CP細胞

"