"Eca-109:人食管癌復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長：貼壁

絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可。吸去胰酶后，殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37℃一般不到2min足夠消化細胞。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞，連續(xù)這樣傳代，對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后37℃消化。比較難消化的細胞（潤洗方法5min還不能消化），這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育。不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化HAO了，一般你肉眼觀察貼壁細胞層，只要能移動了，多半呈沙壯移動，其實已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞，這是沒有必要的。一般能移動了，說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細胞已經(jīng)獨立分布了（雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布）。這個時候應(yīng)該停止消化，不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常HAO，間隙很大，才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會聚集，這個是貼壁培養(yǎng)的細胞，尤其是腫瘤細胞的一個性。如果和標準形態(tài)不一致，那可能是自己沒消化HAO導(dǎo)致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細胞的性，是因為貼壁過程中重新聚集了。這個時候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細胞之后會對你越來越不HAO。

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

Blotchy fibroblast-11細胞類似產(chǎn)品：：Mevo細胞、OCI-AML-3細胞、UMC11細胞

H3396細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1693細胞、KYSE 410細胞、WSU-DLCL(2)細胞

Baby Hamster Kidney 21細胞類似產(chǎn)品：：H2087細胞、DHBE細胞、H520細胞

LMTK-細胞類似產(chǎn)品：：ECV細胞、MUM2B細胞、MOLM-13細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞背景資料：１９７３年建系，來自人食管中段鱗癌組織，小塊法原代培養(yǎng)建系。BALB/c裸鼠移植成瘤。

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細胞形態(tài)：上皮細胞樣

BIC細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1563細胞、Adeno 293細胞、Panc-3_27細胞

FDC-P1細胞類似產(chǎn)品：：CMT-93細胞、NCTC clone 929細胞、COLO 829細胞

EC9706細胞類似產(chǎn)品：：EA hy 926細胞、COR-L 105細胞、McA-RH 8994細胞

細胞培養(yǎng)實驗基本操作：①進無菌室前要徹底洗手，按規(guī)定穿隔離衣。開始操作前要用７５%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。②操作者動作要輕，安裝吸管帽、打開或封閉瓶口等操作應(yīng)在火焰近處并經(jīng)過燒灼進行。但要注意，金屬器械不能在火焰中長時間燒灼，以防退火；燒過的器械要冷卻后才能使用；已吸過培養(yǎng)液的吸管不能再用火焰燒灼，因殘留在吸管內(nèi)的培養(yǎng)液成分如蛋白質(zhì)等燒焦后會產(chǎn)生有害物質(zhì)，吸管再用時會將其帶到培養(yǎng)液中；膠塞、橡皮乳頭及塑料的細胞培養(yǎng)用品過火焰是也不能時間太長，以免燒焦產(chǎn)生有毒氣體，危害培養(yǎng)細胞，同時塑料細胞培養(yǎng)用品也會產(chǎn)生變形影響使用。③使用培養(yǎng)液前不宜過早開瓶，開瓶后的培養(yǎng)液應(yīng)保持斜位，避免直立，以防止下落細菌的污染。不再使用的培養(yǎng)液應(yīng)立即封閉瓶口，培養(yǎng)的細胞在處理之前勿過早暴露在空氣中。④操作時盡量不要談話，咳嗽以防止來自唾沫和呼出的氣流所造成的污染。⑤吸取培養(yǎng)液、細胞懸液時，應(yīng)專管專用，一旦發(fā)現(xiàn)吸管口接觸了手和其他污染物品應(yīng)棄去，以防止污染擴大或造成培養(yǎng)物之間的交叉污染。⑥操作完畢后應(yīng)整理HAO工作臺面，用消毒水浸泡的紗布擦拭臺面；防止細胞交叉污染：所有從別處轉(zhuǎn)來的或是自己所建的細胞系都要早期留有的充足的凍存儲備，一旦懷疑發(fā)生交叉污染，可做細胞遺傳學(xué)方面的鑒定，如發(fā)現(xiàn)原有的細胞遺傳物發(fā)生改變，可以復(fù)蘇早期凍存的細胞使用。重要細胞系的傳代工作應(yīng)由兩人獨立進行；無菌室的徹底消毒①新潔爾滅全面徹底擦洗無菌室。使用前應(yīng)稀釋即配即用。新潔爾滅和酒精相比，Zui大的YOU點是便宜，而且可以稀釋５０倍用，而同樣量的酒精價格可能是新潔爾滅的幾十倍。②甲醛熏蒸法：甲醛是一種廣譜滅菌劑菌，其水溶液和氣體對各種細菌、芽孢及真菌等微生物均有殺滅作用。甲醛價廉，熏蒸消毒時不損壞衣服、家具、皮革、橡膠等。市售的甲醛水溶液中一般含３７－４０%的甲醛。

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

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細胞生長特性：貼壁

傳代24h-48h處于對數(shù)期的細胞，在凍存前24h換液；按照常規(guī)方法消化，離心，收集細胞沉淀；用血清重懸細胞沉淀，用血球計數(shù)板或者細胞計數(shù)儀進行細胞計數(shù)；配制細胞凍存液，將凍存液加到細胞液中，吹打混勻，控制細胞密度為2×10(6)-5×10(6)/ml；將細胞懸液按照1ml/支分裝至已標記HAO的凍存管中，旋緊管蓋；將凍存管放入程序凍存盒中，凍存盒立即移至-80°C冰箱中，過夜后將凍存細胞移至液氮中長期保存。凍存管內(nèi)細胞數(shù)目一般不低于2x10(6)cells/ml/vial，融合瘤細胞則以5x10(6)cells/ml/vial為宜。細胞凍存和復(fù)蘇遵循“慢凍快溶”的原則。取出冷凍管后，須立即放入37°C水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化，并注意水面不可超過冷凍管蓋沿，否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時，必須注意安全，預(yù)防冷凍管之爆裂。細胞凍存時細胞狀態(tài)不佳，會嚴重影響復(fù)蘇時細胞的活率。一般選擇處于對數(shù)生長期的細胞進行凍存，凍存前一天細胞ZuiHAO進行換液；消化過度也會嚴重影響細胞凍存后復(fù)蘇的活率；凍存細胞時為按照溫度梯度進行操作，會嚴重影響細胞活率。

SKOV3細胞類似產(chǎn)品：：MDA 1386細胞、3T3-L1細胞、SW-1088細胞

Homo sapiens No. 578, tumor cells細胞類似產(chǎn)品：：HS852.T細胞、NCI-H146細胞、Giant Cell Tumor細胞

RPE1-hTERT細胞類似產(chǎn)品：：H1993細胞、FRTL 5細胞、A2780S細胞

OsA-CL細胞類似產(chǎn)品：：TE11細胞、TE6細胞、NRK 52E細胞

Lu-99A細胞類似產(chǎn)品：：P3X63 Ag8細胞、HPAF II細胞、CHO K1細胞

CT26.CL25細胞類似產(chǎn)品：：MDA-435細胞、H-64細胞、H2122細胞

HCE-2 [50.B1]細胞類似產(chǎn)品：：G-401細胞、HRA-19細胞、NCIH378細胞

SNU-216細胞類似產(chǎn)品：：MHCC97-L細胞、JVM-3細胞、M-NFS-60細胞

Bat lung細胞類似產(chǎn)品：：LTEP-sm細胞、SHI1細胞、H-187細胞

CAL 51細胞類似產(chǎn)品：：Bac 1.2F5細胞、Hs27細胞、L540細胞

B16BL-6細胞類似產(chǎn)品：：MMQ細胞、Ca 9-22細胞、H1755細胞

YES-2細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H889細胞、OCI-LY-18細胞、BNL 1MEA.7R.1細胞

MODE-K細胞類似產(chǎn)品：：RC-4B細胞、GM03190A細胞、H-69細胞

P3X63 Ag8細胞類似產(chǎn)品：：H-2291細胞、FCCH1024細胞、SU-DHL6細胞

Ej138細胞類似產(chǎn)品：：Hi5細胞、MB-49細胞、G422細胞

GM346細胞類似產(chǎn)品：：LN 229細胞、HS-766-T細胞、NCI-H2286細胞

GM346細胞類似產(chǎn)品：：LN 229細胞、HS-766-T細胞、NCI-H2286細胞

OCILY3細胞類似產(chǎn)品：：Madison細胞、mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細胞、HEK AD293細胞

Hs695T細胞類似產(chǎn)品：：Rat Basophilic Leukemia-1細胞、COLO320/DM細胞、SUPM2細胞

KB細胞類似產(chǎn)品：：T-ALL1細胞、H-2171細胞、SUM-159PT細胞

NSC34細胞類似產(chǎn)品：：NTera 2/cl.D1細胞、H.Ep. #2細胞、LC1-Sq細胞

CAL148細胞類似產(chǎn)品：：Hs895T細胞、QG-56細胞、SKOV-433細胞

LS-513細胞類似產(chǎn)品：：NCIH1792細胞、OCIAML4細胞、brain-derived Endothelial cells.3細胞

Hs832T細胞類似產(chǎn)品：：PA I細胞、SCL I細胞、mIMCD-3細胞

Eca-109:人食管癌復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

U-266 AR1細胞類似產(chǎn)品：：DI TNC1細胞、SU86.86細胞、H1819細胞

BHP 10-3細胞類似產(chǎn)品：：W133細胞、Jurkat clone A3細胞、RPMI 1788細胞

H-727細胞類似產(chǎn)品：：293A細胞、U251細胞、PK-13細胞

MDA-MB-435S細胞類似產(chǎn)品：：Hs_578t細胞、EoL-1 cell細胞、G402細胞

MEF (CF-1)細胞類似產(chǎn)品：：HPDE6c7細胞、RMG-I細胞、1301細胞

GM-637細胞類似產(chǎn)品：：BL1339細胞、CHAGOK1細胞、AsPC-1細胞

ChaGo-K1細胞類似產(chǎn)品：：U-118 MG細胞、MDA-330細胞、alpha TC1.6細胞

CNE細胞類似產(chǎn)品：：JB6Cl30細胞、SP-2細胞、MC26細胞

MDA-MB-435 S細胞類似產(chǎn)品：：MDA231-LM2細胞、DHL6細胞、INS1E細胞

NCI-H676細胞類似產(chǎn)品：：SKN-SH細胞、OCILY-3細胞、BC-027細胞

PCI-04B細胞類似產(chǎn)品：：CAL 39細胞、SUM 190PT細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4細胞

ATDC-5細胞類似產(chǎn)品：：KMST-6細胞、OVCAR-3細胞、MBMEC細胞

TNC-1B12B4細胞類似產(chǎn)品：：Pa18C細胞、G-402細胞、U373MG細胞

SK-N-AS細胞類似產(chǎn)品：：FDCP-1細胞、NCI N87細胞、CCRF細胞

NCI-H1623細胞類似產(chǎn)品：：COLO 320HSR細胞、HHUA細胞、ST486細胞

ROS17/28細胞類似產(chǎn)品：：Immortalized Human Hepatocytes細胞、MC57G細胞、IGROV-1細胞

A2780-CP細胞類似產(chǎn)品：：Hs 578.T細胞、NG10815細胞、KM-H2細胞

C-33A細胞類似產(chǎn)品：：NCIH740細胞、CEM-T4細胞、PC3M-IE8細胞

J774細胞類似產(chǎn)品：：LuCL4細胞、SKM1細胞、H-2066細胞

DU 145細胞類似產(chǎn)品：：Fetal Human Lens-124細胞、McA-RH 8994細胞、U118-MG細胞

B-95-8細胞類似產(chǎn)品：：L-cell細胞、CAMA細胞、KTC-1細胞

H-1437細胞類似產(chǎn)品：：H-64細胞、L02細胞、PA-TU S細胞

HLF-a細胞類似產(chǎn)品：：TW01細胞、MDAMB330細胞、COLO.205細胞

NCIH1355細胞類似產(chǎn)品：：HMSC細胞、D341細胞、T. T細胞

NCIH889細胞類似產(chǎn)品：：LS180細胞、SK-HEP-1細胞、FHL 124細胞

OVHM細胞類似產(chǎn)品：：MV-522細胞、NCIH1963細胞、H9c2(2-1)細胞

PC-3/M細胞類似產(chǎn)品：：184A1細胞、NCM356細胞、H1155細胞

I90細胞類似產(chǎn)品：：MES 13細胞、SW1463細胞、INS-1細胞

RAW 264.7細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H2172細胞、MFM-223細胞、SK-GT-4細胞

Fetal Bovine Heart Endothelial細胞類似產(chǎn)品：：HT22細胞、U 266細胞、PLCPRF5細胞

HM1900細胞類似產(chǎn)品：：Hs 636.T細胞、RFL6細胞、Immortal Pig Intestinal-2I細胞

SK-RC-20細胞類似產(chǎn)品：：CT 26細胞、L 1210細胞、TE 32.T細胞

OCI-Ly 19細胞類似產(chǎn)品：：SK-HEP-1細胞、UCLA RO-81-A-1細胞、J 82細胞

SK.OV.3細胞類似產(chǎn)品：：HME1細胞、NUGC2細胞、Emory University-2細胞

BALL-1細胞類似產(chǎn)品：：HepG2細胞、SACC-LM細胞、LCLC-103H細胞

SU8686細胞類似產(chǎn)品：：BRL3A細胞、CHP 126細胞、HBL 100細胞

TCC-PAN2細胞類似產(chǎn)品：：Suzhou Human Glioma-44細胞、RAW264細胞、Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細胞

RPE1-hTERT細胞類似產(chǎn)品：：H1993細胞、Clone Y1細胞、KU-812細胞

HEP-3B2細胞類似產(chǎn)品：：CNE-2Z細胞、OCLY8細胞、KMM-1細胞

EA.Hy926細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1770細胞、SCCVII細胞、P36細胞

H1993細胞類似產(chǎn)品：：Calu-1細胞、U20-S細胞、Centre Antoine Lacassagne-39細胞

C4-1細胞類似產(chǎn)品：：IOSE80UBC細胞、HeLa S 3細胞、COR-L88細胞

H-4細胞類似產(chǎn)品：：MV522細胞、EOC20細胞、RBL 1細胞

MDA-MB-436細胞類似產(chǎn)品：：CCRF/CEM/0細胞、MRASMC細胞、SCC090細胞

OE-21細胞類似產(chǎn)品：：Colon26細胞、Jurkat E6.1細胞、H250細胞

NCIH1373細胞類似產(chǎn)品：：H774細胞、BAR-T細胞、OVTOKO細胞

GM-637細胞類似產(chǎn)品：：BL1339細胞、CHAGOK1細胞、AsPC-1細胞

Bovine Turbinate細胞類似產(chǎn)品：：MARC-145細胞、TCC-PAN2細胞、RPMI-1846細胞

Gejiu Lung Carcinoma-82細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1395細胞、87 MG細胞、OCILY-3細胞

H-345細胞類似產(chǎn)品：：V79細胞、X63.Ag8.653細胞、MDA-PCa-2b細胞

CA46細胞類似產(chǎn)品：：H-69細胞、C22 (Clara)細胞、Kasumi-6細胞

NCIH661細胞類似產(chǎn)品：：YTMLC-90細胞、H1618細胞、HUVEC-C[HUVEC]細胞

C8D1A細胞類似產(chǎn)品：：NCIH1930細胞、HELA-GFP細胞、Dunn LM8細胞

H1930細胞類似產(chǎn)品：：NB.4細胞、HPBALL細胞、HuTu 80細胞

MD Anderson-Metastatic Breast-361細胞類似產(chǎn)品：：OCILY10細胞、RCC23細胞、CRFK細胞

CHP126細胞類似產(chǎn)品：：HC-11細胞、HCC2935細胞、LS174細胞

SW 780細胞類似產(chǎn)品：：Hs-695-T細胞、H82sclc細胞、H-1734細胞

SUDHL2細胞類似產(chǎn)品：：L-M (TK-)細胞、SV-HUC細胞、NCTC929細胞

SUDHL2細胞類似產(chǎn)品：：L-M (TK-)細胞、SV-HUC細胞、NCTC929細胞

Y3.AG.1.2.3細胞類似產(chǎn)品：：Rat Fetal Lung-6細胞、MES-SA/Dx5細胞、TALL 1細胞

102PT細胞類似產(chǎn)品：：KMH2細胞、COLO 16細胞、C2C12細胞

PLC/PRF/5細胞類似產(chǎn)品：：Ramos.G6.C10細胞、HEY A8細胞、OS-RC-2細胞

SW579細胞類似產(chǎn)品：：Human ErythroLeukemia細胞、HS766T細胞、Ej138細胞

HCT15細胞類似產(chǎn)品：：P-3J細胞、HuT 102細胞、OVCAR 8細胞

H-1573細胞類似產(chǎn)品：：HUCEC細胞、RCSMC細胞、SkChA-1細胞

Panc10.05細胞類似產(chǎn)品：：MUGCHOR1細胞、MLE-12細胞、Japanese Tissue Culture-28細胞

NCIH1876細胞類似產(chǎn)品：：OP-9細胞、HO1-N1細胞、NCI H2106細胞

H2135細胞類似產(chǎn)品：：HCC-1143細胞、Pa14C細胞、OCI-Ly19細胞

WEHI231細胞類似產(chǎn)品：：LICR-HN6細胞、McA-RH 7777細胞、VMRC-RCZ細胞

H4IIEC3細胞類似產(chǎn)品：：Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細胞、MM1-S細胞、HCC2108細胞

DC2.4細胞類似產(chǎn)品：：Psi-2-DAP細胞、PK136細胞、HNSC細胞

KG1A細胞類似產(chǎn)品：：Colon-26細胞、UWB1.289+BRCA1細胞、Anip973細胞

Vertebral Cancer of the Prostate細胞類似產(chǎn)品：：CT26.WT細胞、JTC-39細胞、MMVECs細胞

NCI H508細胞類似產(chǎn)品：：NB9細胞、NK-92.05細胞、J45.01細胞

McA-RH7777細胞類似產(chǎn)品：：H-1373細胞、SUM-149細胞、SMC-1細胞

SH-SY5Y Parental細胞類似產(chǎn)品：：KYSE-70細胞、YD38細胞、Calu6細胞

X63-Ag8.653細胞類似產(chǎn)品：：LU451細胞、H-196細胞、SHIN3細胞

U-373MG ATCC細胞類似產(chǎn)品：：IPLB-Sf21-AE細胞、A2780-CP細胞、HK-2 [Human kidney]細胞

B-104細胞類似產(chǎn)品：：COLO-320DM細胞、SaOS細胞、RMS 13細胞

DB細胞類似產(chǎn)品：：RGB細胞、NBL-3細胞、HEL299細胞

J 774A.1細胞類似產(chǎn)品：：Panc4.03細胞、SKCol1細胞、KBM-5細胞

OCUM-1細胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB-157細胞、NCI-H1666細胞、HEK (AD293)細胞

Eca-109:人食管癌復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

KOSC-2 cl3-43細胞類似產(chǎn)品：：Calu6細胞、MDCC-MSB1細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細胞

HCV29細胞類似產(chǎn)品：：GS9L細胞、HCC-1171細胞、WEHI 164細胞

C-4-I細胞類似產(chǎn)品：：Capan2細胞、beta-TC6細胞、Jijoye細胞

R-1059-D細胞類似產(chǎn)品：：DanG細胞、C41細胞、RBL-1細胞

LuCL4細胞類似產(chǎn)品：：CD 18細胞、BC-025細胞、Baby Hamster Kidney 21細胞

HCC9724細胞類似產(chǎn)品：：BIU87細胞、MRAEC細胞、T-47D細胞

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