無蛋白非程序性細胞凍存液
一、產品簡介。
本產品是一種不含胎牛血清和其它動物源性蛋白成份的細胞凍存試劑，由細胞膜保護劑、滲透性和非滲透性保護劑組成，并添加細胞營養(yǎng)物質，凍存細胞的同時提高細胞的存活率。
二、運輸與存儲條件。
本產品低溫運輸，-20 ℃保存，有效期 12 個月。使用過程中，4 ℃保存，1 個月內用完，避免反復凍融。
三、特點與優(yōu)勢。
1. 與市面其它類似產品相比，本產品純由化學物質配制而成，不含任何動物源性成份，可用于常規(guī)培養(yǎng)細胞和臨床治療用細胞的凍存。
2. 本產品凍存細胞時不需要程序性降溫盒，重懸細胞后可直接置于-80 ℃冰箱中保存，12 h 后轉到液氮中保存，或一直存放于-80 ℃冰箱中保存（6 個月）。
3. 本產品凍存細胞效果好，細胞復蘇率高，與含有胎牛血清（FBS）的凍存液效果一致。
4. 本產品中的 DMSO 含量為 5%，對凍存細胞的毒性較小。
四、使用說明。
1. 細胞凍存。
1) 細胞培養(yǎng)。細胞接種于直徑為 100 mm 的培養(yǎng)皿中，24 或 48 h 后密度達到 80%左右，處于對數生長期。
2) 細胞收集。胰酶消化法收集貼壁細胞（或直接收集懸浮細胞），1 000 rpm，離心 5 min，棄上清。
3) 細胞凍存。加入 2 ml 無蛋白非程序性細胞凍存液，混勻，分裝于 2 支凍存管，置于-80 ℃冰箱中，12 h 后轉入液氮長期保存。
2. 細胞復蘇。
1) 預熱。提前開啟水浴鍋，溫度調整到 37 ℃（或 42 ℃，能夠促進細胞凍存液更快的融化）。
2) 細胞復蘇。從液氮罐或-80 ℃冰箱中取出凍存細胞，立即置于預熱后的水浴鍋中，快速晃動凍存管，使凍存細胞盡快融化。
3) 離心。將融化的凍存細胞轉入含有9 ml細胞培養(yǎng)液的離心管中，混勻，1 000 rpm，離心5 min，棄上清。（融化的凍存細胞也可直接離心）
4) 細胞培養(yǎng)。在離心管中加入 1 ml 的細胞培養(yǎng)液，混勻，轉入含有 9 ml 細胞培養(yǎng)液的細胞培養(yǎng)皿中，混勻，置于細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
5) 檢測。24 h 后觀察細胞貼壁情況和生長狀態(tài)。
五、注意事項。
1. 為了保證細胞凍存效果，細胞凍存時應該生長良好，盡量處于對數生長期。
2. 凍存細胞的密度一般控制在 1-5 ×106 cells / mL 左右，密度過低或過高都會影響凍存效果。
3. 細胞復蘇后離心除去細胞凍存液，避免細胞凍存液對細胞生長的影響。
4. 本產品凍存的細胞可以在-80 ℃冰箱中保存 6 個月，長期保存時請轉入液氮罐。
關鍵字： 無蛋白非程序性細胞凍存液;
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