水樣中汞離子（Hg²⁺）濃度檢測試劑盒說明書

                                              
                                                     分光光度法50管/48樣

注    意：正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。

測定意義：

Hg²⁺是水體中重要有毒重金屬離子，易被生物體吸收并且積累，能夠通過食物鏈進一步傳遞，從而造成傷害。典型的水俁病就是汞中毒的一種。

水樣中汞離子（Hg2+）濃度檢測試劑盒測定原理：

水樣經(jīng)消化后，在酸性環(huán)境中，Hg²⁺能與二硫腙生成橙色絡合物，溶于三氯甲烷，在490nm測定吸光度，即可計算Hg²⁺含量。

自備儀器和用品：

可見分光光度計、1mL玻璃比色皿、恒溫水浴鍋、可調式移液槍、濃硫酸、三氯甲烷和蒸餾水。

試劑組成和配制：

試劑一：液體50mL×1瓶，4℃避光保存。

試劑二：液體8mL×1瓶，4℃保存。

試劑三：粉劑×1瓶，4℃保存。臨用前加蒸餾水2mL充分溶解。

試劑四：液體10mL×1瓶，4℃保存。

試劑五：粉劑×1瓶，4℃避光保存。加三氯甲烷（自備）50 mL充分溶解。

標準品：液體1mL×1瓶，4 nmol/mL Hg²⁺，室溫保存。

水樣中汞離子檢測：

1. 消化

（1）水樣消化：取帶蓋管，依次加入1mL水樣，100 μL濃硫酸（自備），800μL試劑一，混勻后蓋緊，置于40℃水浴中消化24 h。

（2） 標準品消化：取帶蓋管，依次加入100μL標準品，900μL蒸餾水，100 μL濃硫酸，800μL試劑一，混勻后蓋緊，置于40℃水浴中消化24 h。

2. 取出各管，室溫放置約20min，使之冷卻。然后加入160μL試劑二，蓋緊后充分震蕩，直到無色。開蓋靜置30min，期間搖蕩數(shù)次，使其中氣體溢出。

3. 加入800μL蒸餾水，40μL試劑三；蓋緊后混勻后，靜置5min；加入200 μL試劑四，充分震蕩后靜置分層。

4. 取100μL移液槍，排氣后，沿管壁小心插入下層，吸取100μL下層液體，加入到EP管中，再加入1 mL試劑五，蓋緊后充分震蕩，直到無色。

5. 靜置分層后，取1000μL移液槍，調節(jié)刻度到700μL，排氣后沿管壁小心插入下層，吸取700μL下層液體，加入1mL玻璃比色皿，于490nm處比色，記錄各管吸光值。

注意：標準管只需測定一次。

水樣中汞離子（Hg2+）濃度檢測試劑盒計算公式：

Hg²⁺（nmol/L）= C標準品÷標準品稀釋倍數(shù)×A測定管÷A標準管×V總

= 400×A測定管÷A標準管

C標準品：標準品濃度，4 nmol/mL；標準品稀釋倍數(shù)：（100μL標準品+900μL蒸餾水）÷100μL標準品=10；V標：0.1 mL；V總：1L=1000 mL。

注意事項：

1. 水樣中1000μg/L銅離子，20μg/L銀離子，10μg/L金離子，5μg/L鉑離子對測定無干擾。

2. 測定過程中應注意安全，佩戴口罩和手套，以免吸入或沾到有毒及危險試劑。

3. 最低檢出限為0.1μmol/L。