碧云天生產(chǎn)的BL21(DE3)超級感受態(tài)細(xì)胞，英文名BL21(DE3) Super Competent Cells，是一種可以用于IPTG誘導(dǎo)下的重組蛋白表達(dá)的E. coli BL21(DE3)即用型化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞。使用pUC19質(zhì)粒進(jìn)行熱激活轉(zhuǎn)化，轉(zhuǎn)化效率可以高達(dá)1×10⁷cfu/μg DNA以上。

BL21適合T7啟動子驅(qū)動的重組蛋白誘導(dǎo)表達(dá)系統(tǒng)，比如常見的原核表達(dá)載體pET系列[1]。該菌株缺失內(nèi)源性蛋白酶的大腸桿菌B菌株，它能有效避免重組表達(dá)蛋白的降解，廣泛用于重組蛋白的表達(dá)。BL21(DE3)是被λ噬菌體DE3溶原化所得BL21衍生菌株。噬菌體DE3中的T7 RNA聚合酶受到lacUV5啟動子控制。外源添加IPTG可以誘導(dǎo)BL21(DE3)菌株中T7 RNA聚合酶的快速表達(dá)。T7 RNA聚合酶進(jìn)而識別表達(dá)質(zhì)粒載體上的的T7啟動子，從而驅(qū)動重組蛋白的高效表達(dá)。

BL21(DE3)菌株的基因型為F- ompT hsdS_B(r_B^- m_B^- ) gal dcm(DE3) [2]。其中ompT可減少外膜蛋白酶的表達(dá)量，從而減少重組蛋白的水解，提高表達(dá)產(chǎn)量；hsd基因變異可致菌株細(xì)胞內(nèi)的I型限制酶EcoK或EcoB活性缺失，從而提高PCR產(chǎn)物的轉(zhuǎn)化效率；dcm可消除甲基化對腺嘌呤和胞嘧啶的影響，從而幫助某些外源質(zhì)粒復(fù)制，比如攜帶易受甲基化影響的酶切位點(diǎn)的外源質(zhì)粒。