中文名:BCECF-AM
英文名:BCECF-AM
純度:≥90%(HPLC)
貨號:B273262
Cas號:117464-70-7
存儲溫度:避光,-20°C儲存,干燥
運輸條件:超低溫運輸
產品介紹:
BCECF, AM是一種可以穿透細胞膜檢測細胞內pH的熒光染料。BCECF, AM沒有熒光,進入細胞后可以被細胞內的酯酶剪切形成BCECF,從而被滯留在細胞內。BCECF在適當?shù)膒H值情況下可以被激發(fā)形成綠色熒光。最大激發(fā)波長和發(fā)射波長因pH的不同而有所不同,最大激發(fā)波長在503nm左右,最大發(fā)射波長在520nm左右,實際檢測時推薦使用的激發(fā)波長為488nm,發(fā)射波長為535nm。
BCECF, AM不僅被廣泛用于哺乳動物細胞的研究,也有報道用于動物組織、植物細胞、細菌和酵母等的細胞內pH水平檢測。在有細胞內pH變化的細胞毒性、細胞凋亡、細胞粘附、藥物抵抗、細胞趨化等過程中BCECF, AM被廣泛應用。
用于細胞內pH檢測時,常用的BCECF, AM的濃度為1~10μM。
BCECF-AM 是一種細胞膜穿透的熒光指示劑,可以測量細胞內的 pH 值。
操作說明(for Human Neutrophil)
(1)試劑
1 mM的BCECF, AM/DMSO
HEPES 緩沖液(20 mM HEPES, 153 mM NaCl, 5 mM KCl, 5 mM glucose, pH 7.4)
(2)操作
①. 用HEPES制備細胞懸液,細胞濃度為4×107個/mL。
②. 將1mM的BCECF, AM/DMSO溶液加入細胞懸液中(細胞懸液的1/300體積),BCECF, AM終濃度為3μM。
③. 在37 oC培養(yǎng)30分鐘。
④. 用HEPES緩沖液清洗細胞3次,制成3×106個/mL的細胞懸液。
⑤. 使用熒光顯微鏡或帶有圖像分析系統(tǒng)的激光共聚顯微鏡檢測細胞的熒光強度。
*標記的條件因細胞種類而異,在每次實驗前,請先確定最佳條件。以上方法僅供參考。
注意事項
1)BCECF, AM可能對人體有害,請注意適當防護。
2)熒光染料均存在淬滅問題,請盡量注意避光,以減緩熒光淬滅。
3)為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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關鍵字: 2',7'-二-(2-羧乙基)-5(6)-羧基熒光素乙酰甲酯;BCECF-acetoxymethyl ; acetyloxymethyl 3',6'-bis(acetyloxymethoxy)-2',7'-bis[3-(acetyloxymethoxy)-3-oxopropyl]-3-oxospiro[2-benzofuran-1,9'-xanthene]-5-carboxylate ; Spiro[isobenzofuran-1(3H),9'-[9H]xanthene]-2',7'-dipropanoic acid
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