中文名:5-溴-4-氯-3-吲哚基-β-D-吡喃半乳糖苷 (X-Gal)
英文名:5-Bromo-4-chloro-3-indolyl β-D-galactopyranoside (X-Gal)
應(yīng)用:X-Gal是β-半乳糖苷酶(β-galactosidase)的顯色底物,在β-半乳糖苷酶的催化下會(huì)產(chǎn)生藍(lán)色產(chǎn)物。常用于β-半乳糖苷酶的原位染色檢測(cè)以及藍(lán)白斑篩選。
純度:≥98%
貨號(hào):X108836
Cas號(hào):7240-90-6
存儲(chǔ)溫度:-20°C儲(chǔ)存,充氬
運(yùn)輸條件:超低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品介紹:
X–Gal是β–半乳糖苷酶(β–galactosidase)的底物,水解后呈藍(lán)色。基于這個(gè)特點(diǎn),pUC系列載體DNA(或其他帶有l(wèi)acZ基因載體DNA)以lacZ 缺失細(xì)胞為宿主進(jìn)行轉(zhuǎn)化時(shí)、或用M13噬菌體載體DNA進(jìn)行轉(zhuǎn)染時(shí),如果在平板培養(yǎng)基中加入X–Gal和IPTG,由于β–半乳糖苷酶的α–互補(bǔ)性,可以根據(jù)是否呈現(xiàn)白色菌落(或噬菌斑)而方便地挑選出基因重組體。 溶解度: 20 mg/mL DMSO [α]20D : -64 ° (C=1, DMF) 使用方法 : 首先把X-Gal配制成20 mg/ml的二甲基甲酰胺(DMF)溶液(-20℃避光保存),然后在100 ml的瓊脂培養(yǎng)基中,加入200 μl的上述溶液、100 μl的IPTG(24 mg/ml)和100 μl的Amp(100 mg/ml),制作成X-Gal、IPTG、Amp平板培養(yǎng)基。當(dāng)DNA片段插入至pUC系列載體(或其他帶有l(wèi)acZ、Amp基因載體),然后轉(zhuǎn)化至lacZ缺失細(xì)胞中后,涂布上述的X–Gal、IPTG、Amp平板培養(yǎng)基,可根據(jù)長(zhǎng)出菌體的藍(lán)白色,而方便地挑選出基因重組體(白色為具有DNA插入片段的基因重組體)。 注意事項(xiàng) : ◆ 培養(yǎng)噬菌體時(shí),Top agar中的添加量為:50 μl/3 ml(20mg/ml)。 ◆ 含有X-Gal的培養(yǎng)基4℃避光保存,須在1~2周內(nèi)使用。X-Gal是β-半乳糖苷酶(β-galactosidase)的顯色底物,在β-半乳糖苷酶的催化下會(huì)產(chǎn)生藍(lán)色產(chǎn)物。常用于β-半乳糖苷酶的原位染色檢測(cè)以及藍(lán)白斑篩選。
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