產品名稱：熱啟動Taq DNA 聚合酶

規(guī)格或純度：EnzymoPure?, 5U/μL

產品介紹：

產品說明：

Hotstart Taq DNA Polymerase High-concentration是一種適體基團修飾的耐熱性TAQ DNA聚合酶，高溫加熱前，適體修飾基團與Taq酶結合，抑制聚合酶的活性，避免了引物延伸的非特異性擴增或引物二聚體的產生，增強了DNA擴增的特異性、靈敏度和穩(wěn)定性，可廣泛適用于常規(guī)PCR、多重PCR及巢式PCR等。經過95℃熱激10min后，該酶即可恢復活性。此外 Hotstart Taq DNA Polymerase High-concentration沒有檢測到3'→5'校對外切酶活性，但具有5'→3'外切酶活性，可用于熒光定量PCR的檢測。Hotstart Taq DNA Polymerase High-concentration在常溫下沒有活性，便于PCR實驗的常溫操作。

產品內容：

1.  Hotstart Taq DNA Polymerase High-concentration (10 U/μl )

2.  5×Hotstart Taq Buffer（ Mg2? Plus）

3.  Solution I (10×)

活性定義：74℃，30 min，使 10 nmol dNTP 摻入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定義為 1 個活性單位。

使用方法：

1. PCR 反應體系的設置：

a. 溶解并混勻 PCR 反應所需的各種溶液。并放置于冰浴上或冰盒內。建議反應 PCR 液體分裝使用，避免反復凍融。

b. 參考下表設置 PCR 反應,建議 PCR 反應體系的配置在冰浴或在冰盒上進行：

※ 模板 DNA 用量:為了保證反應的靈敏性，25 μl 體系使用 10? 拷貝的靶序列作為模板，可參考下表計算需加入 PCR 體系的模板量。

1 μg 各種來源的 DNA 對應的摩爾數(shù)

例如：純化的人類基因組 DNA 濃度為 1 μg/μl，某基因在人類基因組中拷貝數(shù)為 10，其單位體積拷貝數(shù)為： 

3.0× 10? mol/μg × 1 μg/μl × 10 copy/mol
=3.0× 10? copy/μl
1× 10? copy/ (3.0× 10? copy/μl)
= 1/300 μl

即：1/300 ul 濃度為 1 ug/μl 的人類基因組 DNA 中含 10? 拷貝該基因，稀釋 300 倍后加 1μl 至 25 μl PCR 體系。為保證反應的特異性，DNA 終濃度應小于 10 ng/ul，過多的 DNA 可能會出現(xiàn)涂抹帶甚至無特異性條帶。

c. 用移液器輕輕吹打混勻或輕微 Vortex 混勻，室溫離心數(shù)秒，使液體積聚于管底。

d. 各設置好的 PCR 反應管置于 PCR 儀上，開始 PCR 反應。

2. PCR 反應參數(shù)的設置：

本產品是經過適體修飾型 Hotstart Taq DNA Polymerase High-concentration，為了使 PCR 的擴增效率、定量精度等達到最佳，建議熱激時間為 95℃ ，10 分鐘

3.產品包裝：

級別：EnzymoPure?

濃度：5U/μL

儲存溫度：-20°C儲存

運輸條件：超低溫運輸

酶學委員會編號：2.7.7.7

單位定義：74℃，30 min，使 10 nmol dNTP 摻入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定義為 1 個活性單位

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