蘋果酸合酶(MS)活性測定試劑盒-可見顯色法微板法/48樣
產(chǎn)品簡介：
蘋果酸合酶（MS， EC 2.3.3.9）是乙醛酸循環(huán)的關(guān)鍵酶之一，在細菌、真菌、原生動物以及萌發(fā)的植物種子中均有發(fā)現(xiàn)。
蘋果酸合酶（MS）催化乙酰 CoA 和乙醛酸生成蘋果酸和 CoA，生成的 CoA 具有還原性并可與 DTNB 作用生成黃色物質(zhì)，該有色物質(zhì)在 412nm 處有特征吸收峰，即可得出 MS 酶活性大小。
反應(yīng)式：acetyl-CoA+glyoxylate+H2O=(S)-malate+CoA
試劑盒組成和配制：
試劑名稱 | 規(guī)格 | 保存要求 | 備注 |
提取液 | 提取液 60mL×1 瓶 | 4℃保存 |
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試劑一 | 液體 20mL×1 瓶 | 4℃保存 | 臨用前甩幾下使試劑落入底部，再加 3.2mL蒸餾水溶解備用。 |
試劑二 | 粉劑 mg×1 支 | 4℃保存 | 用前甩幾下使試劑落入底部，再加 1.1mL 蒸餾水，混勻溶解備用。 |
試劑三 | 粉體 mg×1 支 | -20℃保存 | 用前甩幾下使試劑落入底部，再加 0.55mL蒸餾水，混勻溶解備用。 |
試劑四 | 液體 4mL×1 瓶 | 4℃保存 |
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試劑五 | A:粉體 mg×1 瓶 B:液體 2mL×1 瓶 | 4℃保存 | 臨用前向 A中加 1.8mL的 B液，加23.2mL 的蒸餾水，混勻溶解備用。 |
標準品 | 粉體 mg×1 支 | 4℃保存 | 若重新做標曲，則用到該試劑 |
所需的儀器和用品：
酶標儀、96 孔板、臺式離心機、可調(diào)式移液器、研缽、冰和蒸餾水。
磷酸轉(zhuǎn)乙酰酶(PTA)活性測定:
建議正式實驗前選取 2 個樣本做預(yù)測定，了解本批樣品情況，熟悉實驗流程，避免實驗樣本和試劑浪費！
樣本制備：
① 組織樣本：
稱取約 0.1g 組織，加入 1mL 提取液，進行冰浴勻漿。 12000rpm 4℃離心 15min，取上清，置冰上待測。
[注]：若增加樣本量，可按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1 ：5~10 的比例提取
②細胞樣本：
先收集細胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；取 500 萬細胞加入 1mL 提取液；超聲波破碎細胞（冰浴，功率 20％或 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復(fù) 30 次）；4oC 約 12,000rpm離心 10min，取上清作為待測樣品。
[注]：若增加樣本量，可按照細菌/細胞數(shù)量（104）：提取液（mL）為 500~1000：1 的比例進行提取。
關(guān)鍵字： MS 試劑盒 ; MS ELISA KIT ; MS ELISA試劑盒 ;
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