磷酸丙糖異構(gòu)酶(TPI)測定試劑盒/微量法/96S

測定意義：

植物葉綠體中磷酸丙糖異構(gòu)酶是光合作用中參與 calvin 循環(huán)的重要酶。作用于磷酸甘油醛和磷酸二羥丙酮之間的轉(zhuǎn)化，磷酸二羥丙酮能快速透過葉綠體的包膜進入細胞質(zhì)，并在其中逐步轉(zhuǎn)化為蔗糖。

測定原理：

磷酸丙糖異構(gòu)酶將磷酸二羥丙酮轉(zhuǎn)化為 3-磷酸甘油醛，3-磷酸甘油醛與 NAD 在 3-磷酸甘油醛脫氫酶的作用下生成 3-磷酸甘油酸和 NADH ，340nm 處的吸光度變化反映了磷酸丙糖異構(gòu)酶的活性的高低。

自備儀器和用品：

天平、低溫離心機、研缽、震蕩儀、紫外分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96 孔板。

測定步驟：

1、分光光度計/酶標儀預熱30min ，調(diào)節(jié)波長至 340nm，蒸餾水調(diào)零。

2、取微量石英比色皿/96 孔板，依次加入 120μL 試劑一，20μ L 試劑二，20μ L 試劑三，20μ L 試劑四，20μL。

3、粗酶液，充分混勻，記錄 340nm 處 10s 的吸光值 A1 和 310s 的吸光值 A2，△A=A2-A1

注 意：

正式測定之前選擇 2-3 個預期差異大的樣本做預測定。