海藻糖6磷酸合成酶(TPS)測(cè)定試劑盒/微量法/96樣
測(cè)定意義:
海藻糖是由兩個(gè)葡萄糖分子以α,α-1-1 糖苷鍵連接而成的一種非還原雙糖,廣泛存在于細(xì)菌、酵母菌、霉菌、食用菌、低等植物、昆蟲、無脊椎動(dòng)物和高等植物等多種有機(jī)體中。海藻糖的非還原性決定了它對(duì)酸、堿、高溫等的穩(wěn)定性。另外,它本身具有很強(qiáng)的吸水性,使它在生物體內(nèi)具有抗脫水作用,在逆境條件下可通過識(shí)別外界刺激、產(chǎn)生和傳遞信號(hào)、基因表達(dá)和代謝調(diào)節(jié)來保護(hù)植物免受不良環(huán)境的傷害。
測(cè)定原理:
TPS 催化 UDPG 與 G6P 生成海藻糖-6-磷酸,同時(shí)產(chǎn)生 UDP ;UDP 在丙酮酸激酶與乳酸脫氫酶作用下,氧化 NADH 為 NAD+ ,NADH 的下降速率與 UDP 含量成正比,通過 340nm 吸光度下降速率反映 TPS 活性。
自備儀器和用品:
酶標(biāo)儀、水浴鍋、可調(diào)式移液器、96 孔板、研缽、冰和蒸餾水。測(cè)定步驟:
在 EP 管中加入如下試劑
試劑名稱(μL)
測(cè)定管
樣本
100
試劑一
反應(yīng)液
20
工作液
180
注 意:
正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定。
上海酶聯(lián)生物科技有限公司
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