一些小分子可以誘導小鼠胚胎干細胞(ES)細胞分化為神經(jīng)元細胞。在這里,我們探討了異戊二烯基(IBA)對促進神經(jīng)元分化的影響以及其蛋白質(zhì)異戊二烯化的潛在作用。方法和結(jié)果:采用吊滴法進行胚胎體(EB)的形成,以模擬胚胎在體內(nèi)的發(fā)育。從EB階段(d 4)到d 8+10,用Isobavachin以終濃度為10(-7) mol/L處理EBs。香葉基香葉基轉(zhuǎn)移酶 I 抑制劑 GGTI-298 隨后用于破壞蛋白質(zhì)異戊二烯化。通過熒光顯微鏡觀察神經(jīng)元亞型,包括神經(jīng)元和星形膠質(zhì)細胞。分別使用RT-PCR和Western blot分析檢測基因和蛋白質(zhì)表達水平。在Isobavachin處理下,巢蛋白在EBs產(chǎn)生的神經(jīng)祖細胞中高表達(d 4,d 8+0)。EBs隨后進一步分化為神經(jīng)元(以β-微管蛋白III為標志)和星形膠質(zhì)細胞(以GFAP為標志),它們在d 8+5和d 8+10上均以時間依賴性方式上調(diào)。與 GGTI-298 聯(lián)合處理選擇性地消除了 Isobavachin 誘導的神經(jīng)元分化。此外,在MAPK通路中,p38和JNK磷酸化下調(diào),而在Isobavachin處理后,ERK磷酸化在不同的神經(jīng)元分化通道上調(diào)。結(jié)論:Isobavachin可促進小鼠ES細胞分化為神經(jīng)元細胞。該機制涉及蛋白質(zhì)異戊二烯化,隨后涉及 phos-ERK 激活和 phos-p38 脫落途徑。
與相應(yīng)的非異戊二烯化黃酮類化合物(芹菜素、甘草素)和牡荊素(芹菜素-C8-葡萄糖苷)相比,研究了異戊二烯化黃酮類化合物licoflavone C(8-異戊二烯基甘草素)和Isobavachin(8-異戊二烯基甘草素)的抗氧化和細胞毒性作用,使用代謝活性差的H4IIE肝癌和代謝活性差的C6神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞。方法和結(jié)果:在2,2-二苯基-1-三硝基肼(DPPH)測定中,所有物質(zhì)均未表現(xiàn)出自由基清除活性,也不能有效防止H2O2誘導的細胞內(nèi)2',7'-二氯二氫熒光素(H2DCF)氧化(氧化應(yīng)激熒光探針)。當研究這些物質(zhì)的內(nèi)在效應(yīng)時,利科韋酮C和Isobavachin在H4IIE(IC50值為42+/-5和96+/-19 μmol/L)和C6細胞(IC50值為37+/-6和69+/-3 μmol/L)中均表現(xiàn)出明顯的毒性,而非異戊二烯化類似物以及糖基化衍生物牡荊素幾乎沒有細胞毒性作用,最高可達250 μmol/L。在 H4IIE 細胞中,利科韋酮 C 和 icobavachin 誘導凋亡細胞死亡被檢測為半胱天冬酶 3/7 的激活(分別為 6 倍和 3.3 倍)。結(jié)論:基于這些實驗,我們建議黃酮類化合物的C8-異戊二烯化增強了誘導H4IIE細胞凋亡細胞死亡的細胞毒性,而不影響抗氧化性能。
方法和結(jié)果:合成了四種異戊二烯基黃酮,即巴伐欽1、異戊二烯基黃酮2、7,4'-二羥基-8-異戊烯基黃酮3和8-異戊二烯黃素4,通過雌激素篩選試驗評估,在MCF-7/BOS細胞中具有雌激素樣活性。所有化合物均以劑量依賴性方式顯著刺激MCF-7/BOS細胞的增殖。Isobavachin 2 的活性最強,而 bavachin 1 的活性最弱。結(jié)論:這些化合物的雌激素效力排名如下:2 > 4 > 3 > 1.
骨質(zhì)疏松癥是一種骨骼疾病,會導致骨折風險增加。中國補骨脂果實(Scurfpea fruit)通常用于治療骨折和關(guān)節(jié)疾病已有數(shù)千年的歷史。本研究旨在篩選可能具有刺激成骨細胞增殖和從壞血病果實中分化的活性成分。方法和結(jié)果:建立高效液相色譜法(HPLC)分析桫欏果主要成分。通過比較其保留時間與相應(yīng)的標準物質(zhì),共鑒定出11種化合物。采用MTT和ALP方法測定成骨細胞增殖和分化活性。淫羊藿苷(一種異戊二烯化的黃酮類糖苷)作為陽性對照。Bavachin和Isobavachin顯著刺激細胞增殖,而補骨脂酚對促進成骨細胞分化具有更強的作用。所有這些化合物都被發(fā)現(xiàn)具有一個特征化的結(jié)構(gòu),即在它們的每個分子骨架中,都連接著一個異戊二烯化的側(cè)鏈。結(jié)論:這些結(jié)果導致了一個假設(shè),即異戊二烯基團可能對展示活性至關(guān)重要。這些化合物與小鼠原代顱骨成骨細胞中異戊二烯基的構(gòu)效關(guān)系有待進一步探究。
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