▼ 服務(wù)簡介

凝膠阻滯或電泳遷移率實驗(Electrophoretic mobility shift assay，EMSA)是一種研究DNA結(jié)合蛋白質(zhì)和相關(guān)的DNA結(jié)合序列相互作用的技術(shù)，可用于定性和定量分析?；贒NA-蛋白質(zhì)或RNA-蛋白質(zhì)復(fù)合體在聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)中有不同遷移率的原理，當(dāng)轉(zhuǎn)錄因子與特異的DNA或RNA結(jié)合后，其在PAGE中的遷移率將小于未結(jié)合核蛋白轉(zhuǎn)錄因子的DNA，從而檢測到活化的與DNA或RNA結(jié)合的蛋白轉(zhuǎn)錄或調(diào)節(jié)因子。

這一技術(shù)最初用于研究DNA結(jié)合蛋白質(zhì)，目前已用于研究RNA結(jié)合蛋白質(zhì)和特定的RNA序列的相互作用。競爭實驗中采用含蛋白質(zhì)結(jié)合序列的DNA或RNA探針，和其它相關(guān)的探針，來確定它們相互作用的特異性及強(qiáng)度。

如圖所示， DNA-復(fù)合物比非結(jié)合的探針移動得慢;當(dāng)檢測DNA結(jié)合蛋白，可用純化蛋白、部分純化蛋白或核細(xì)胞抽提液;競爭實驗中采用含蛋白結(jié)合序列的DNA片段和寡核苷酸片段(特異)和其它非相關(guān)的片段(非特異)，來確定DNA結(jié)合蛋白的特異性;在競爭的特異和非特異片段的存在下，依據(jù)復(fù)合物的特點和強(qiáng)度來確定特異結(jié)合。

▼ 樣品要求

1、活細(xì)胞(>2×107)、純化的蛋白、DNA樣品及序列;

2、目的蛋白一抗及其說明書;

3、基因信息、蛋白信息、物種信息;

4、陽性對照樣品(盡量提供)。

▼ 服務(wù)內(nèi)容

▼ 案例展示