使用兩種水生生物對生物農(nóng)藥中 Osthol 含量進行急性毒性評估。

本研究的重點是通過使用兩種水生生物生物來評估 Oshol 引起的急性毒性，Oshol 是環(huán)境友好型生物殺蟲劑的主要成分。
方法和結(jié)果：
在大型水蚤中進行 Osthol 引起的急性毒性評估，并通過檢查 Danio rerio 胚胎的形態(tài)學(xué)異常進行。 接種后 48 小時，Osthol 在 D. magna 中的中位有效濃度值為 19.3 μM。D. rerio 胚胎在 96 小時時的中位致死濃度為 30.6 μM。將 D. magna 和 D. rerio 中 Osthol 的無觀察到效應(yīng)濃度和預(yù)測無效應(yīng)濃度計算為 5.4 和 0.19 μM。隨著時間的推移，由于 Osthol 導(dǎo)致的 D. rerio 胚胎形態(tài)異常增加。在 24-48 小時時，胚胎觀察到凝血、孵化延遲、卵黃囊水腫、心包水腫和色素沉著。72 小時后出現(xiàn)脊柱側(cè)凸和頭部水腫的癥狀。此外，在 96 小時內(nèi)在受精胚胎組織中觀察到彎曲的尾巴、眼部缺陷和塌陷癥狀。眼部缺陷和色素沉著是本研究中觀察到的額外癥狀。
結(jié)論：
由于 Osthol 顯示出相當(dāng)大的毒性水平，因此當(dāng)使用含有 Osthol 的生物殺蟲劑時，有必要在農(nóng)業(yè)生態(tài)系統(tǒng)中進行持續(xù)的毒性評估。

蛇床床子 Osthol 的抗腫瘤作用：體外和體內(nèi)研究。

蛇床子 （L.） Cusson 是一種中藥，被傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)醫(yī)生廣泛使用。Osthol 是該草藥的主要生物活性化合物。
方法和結(jié)果：
在本研究中，從 C. monnieri 中分離出 Osthol 并研究了其體外和體內(nèi)抗腫瘤作用。體外研究結(jié)果表明：Osthol 以時間和濃度依賴性方式抑制 HeLa 的生長，IC（50） 值分別為 77.96 和 64.94 μm，持續(xù) 24 小時和 48 小時;Osthol 在原代培養(yǎng)的正常宮頸成纖維細胞中具有較低的細胞毒性作用;用 Osthol 處理后，HeLa 中的 DNA 片段化增加并激活 PARP，可誘導(dǎo)細胞凋亡。體內(nèi)模型結(jié)果顯示，每天一次給予 Oshol （30 mg/kg） 持續(xù) 9 天后，P-388 D1 荷瘤 CDF（1） 小鼠的存活天數(shù)延長 （ILS% = 37）。
結(jié)論：
基于這些結(jié)果，建議 Osthol 在體內(nèi)抑制 P-388 D1 細胞，在體外誘導(dǎo) HeLa 細胞凋亡，并且 Osthol 是開發(fā)抗腫瘤藥物的良好先導(dǎo)化合物。然而，臺灣特有植物的 C. formosanum Yabe 含有少量的骨片醇，不含 Imperatorin，其主要成分與 C. monnieri 不同。因此，有人認為 C. formosanum 也可能具有經(jīng)濟價值。

Osthol 通過減少甘油三酯合成而不是通過胰島素抵抗來減輕肝脂肪變性。

通過多方面分析評估 Osthol 對肝內(nèi)脂肪合成、β氧化、炎癥和胰島素抵抗的影響。
方法和結(jié)果：
將 Sprague-Dawley 大鼠 （n = 30） 隨機分為對照組、非酒精性脂肪肝 （NAFLD） 和 Osthol 組。NAFLD 和 Osthol 組飼喂高脂飲食 14 周。高脂飲食 8 周后，Osthol 組也接受 Osthol 20 mg/kg 口服 5 次/周。為了評估胰島素抵抗，在 14 周結(jié)束時進行口服葡萄糖耐量。動物處死 14 周后對肝組織提取物進行免疫組織化學(xué) （4-HNE， F4/80） 和蘇木精和伊紅 （HE） 染色。用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)評估 SREBP1c 、 FAS 、 SCD-1 、 PPAR-α、 CROT、 MCP-1 、 IRS-1 和 IRS-2 mRNA 表達。 HE 染色顯示，與 NAFLD 組相比，Osthol 組肝內(nèi)脂肪含量顯著降低 （39.4% vs 21.0%;P = 0.021）。與對照組相比，NAFLD 組的 SREBP1c 表達增加 （P = 0.0001），而與 NAFLD 組相比，Osthol 治療降低 SREBP1c 表達 （P = 0.0059）。在 Osthol 組中，與 NAFLD 組相比，作用于 SREBP1c 下游的肝內(nèi) FAS 和 SCD-1 顯著降低。此外，Osthol 組的 PPAR-α 表達也顯著高于 NAFLD 組 （P = 0.0147）。
結(jié)論：
骨片醇治療通過減少肝臟甘油三酯的新合成來減輕肝臟脂肪變性，對胰島素抵抗和肝臟炎癥有名義影響。

鴕逸醇減少大鼠心臟肥大與心臟氧化應(yīng)激和脂質(zhì)代謝的調(diào)節(jié)有關(guān)。

本研究的目的是檢查從蛇床子 （L.） Cusson 果實中分離的香豆素化合物 Oshol 對大鼠心臟肥大的治療效果，并探討其潛在機制。
結(jié)論：
腎血管性高血壓誘導(dǎo)心臟肥大大鼠灌胃口服 Osthol 4 周。結(jié)果顯示，乙片醇 20 mg/kg 組血壓、心臟體重指數(shù)和心肌丙二醛含量降低 （p < 0.001，p = 0.002 和 p = 0.025），心肌超氧化物歧化酶和谷胱甘肽過氧化物酶含量增加 （p < 0.001），心肌組織中未酯化脂肪酸和三酰甘油升高降低 （p = 0.017 和 p = 0.004， 分別）。同時，Osthol 20 mg/kg 組心肌過氧化物酶體增殖物激活受體 （PPAR）-α 和肉堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶 （CPT）-1a mRNA 表達增加，心肌甘油二酰基?；D(zhuǎn)移酶 （DGAT） mRNA 表達降低 （p < 0.001）。Osthol 治療與心肌細胞橫截面積減少有關(guān) （p < 0.001）。
結(jié)論：
這些發(fā)現(xiàn)表明 Osthol 可能對大鼠心臟肥大發(fā)揮治療作用，其機制可能通過調(diào)節(jié) PPARα 介導(dǎo)的靶基因表達（包括 CPT-1a mRNA 表達的增加和 DGAT mRNA 表達的降低）與心肌氧化應(yīng)激和脂質(zhì)代謝的改善有關(guān)。

Oshol 是一種從常見的蛇床子果實中分離的香豆素，可在體外增強成骨細胞的分化和成熟。

點擊化學(xué)啟發(fā)了鴕鳥醇的新型三唑基衍生物作為有效的細胞毒性藥物的合成和生物評價。

使用點擊化學(xué)方法合成了一系列通過內(nèi)酯環(huán)打開的 Osthol 羥基 （1） 連接的新的不同三唑類。
方法和結(jié)果：
對所有衍生物進行 3-（4,5-二甲基噻唑-基）-二苯基四唑溴化物 （MTT） 細胞毒性篩選，針對一組 7 種不同的人類癌細胞系，即結(jié)腸 （COLO-205）、結(jié)腸 （HCT-116）、乳腺癌 （T47D）、肺 （NCI-H322）、肺 （A549）、前列腺 （PC-3） 和皮膚 （A-431），以檢查它們的細胞毒潛力。有趣的是，在測試的分子中，大多數(shù)類似物顯示出比母體 Osthol 更好的細胞毒活性 （1）。在合成的三唑類化合物中，化合物 8 對結(jié)腸 （Colo-205 和 HCT-116）、乳腺癌 （T47D）、肺 （NCI-H322 和 A549）、前列腺 （PC-3） 和皮膚 （A-431） 癌系的 IC50 分別為 1.3、4.9、3.6、41.0、35.2、26.4 和 7.2 μM。化合物 8 在 Colo-205 細胞中誘導(dǎo)有效的凋亡作用。凋亡細胞群從陰性對照時的 11.4% 增加到 25 μM 時 8 的 24.1%。化合物 8 還誘導(dǎo)線粒體膜電位 （ΛΨm） 顯著降低，導(dǎo)致所用癌細胞凋亡。
結(jié)論：
本研究鑒定了帶有吸電子取代基的類似物的廣譜細胞毒活性，此外還增強了具有電子供體部分的類似物的選擇性活性。

在從新生 Wistar 大鼠分離的原代成骨細胞中研究 Osthol 對成骨細胞的影響。
方法和結(jié)果：
將骨片醇分別以 10?? 、 10??、 10?? 和 10?? mol/l 的濃度補充到培養(yǎng)基中。未發(fā)現(xiàn)對細胞增殖的刺激作用，但 10?? mol/l Osthol 導(dǎo)致堿性磷酸酶 （ALP） 活性顯著增加。在該濃度下檢查一段時間內(nèi)的成骨分化標(biāo)志物，并與未補充 Oshol 的對照細胞進行比較。結(jié)果顯示，用 Oshol 處理的細胞的 ALP 活性、骨鈣素分泌和鈣沉積水平分別比對照細胞高 1.52、2.74 和 2.0 倍。ALP 組織化學(xué)染色和礦化骨結(jié)節(jié)測定的結(jié)果均顯示，在 Oshol 處理的細胞中實現(xiàn)的數(shù)量和面積比對照細胞高 1.53 倍。還研究了與骨骼發(fā)育相關(guān)的生長和轉(zhuǎn)錄因子堿性成纖維細胞生長因子、胰島素樣生長因子 I、骨形態(tài)發(fā)生蛋白 2 （BMP-2）、Runt 相關(guān)基因 2 （Runx-2） 和 osterix 的基因表達。mRNA 表達增加分別為 1.94 、 1.74 、 1.68 、 1.83 和 2.31 倍，比對照高。此外，Osthol 增加了 p38 絲裂原活化蛋白激酶 （MAPK） 和 I 型膠原蛋白的蛋白表達。與對照相比，Osthol 處理的細胞中 osthol 處理的細胞中的 p38MAPK 蛋白和膠原蛋白分別高 1.42 倍和 1.58 倍。
結(jié)論：
這些研究的結(jié)果支持這樣一個結(jié)論，即 Osthol 顯著增強培養(yǎng)成骨細胞的成骨分化。結(jié)果還表明，Osthol 可通過 BMP-2/p38MAPK/Runx-2/osterix 通路刺激大鼠顱骨成骨細胞培養(yǎng)物的成骨細胞分化，并且 Osthol 可能作為新型抗骨質(zhì)疏松藥物開發(fā)的重要化合物。

刺胞胞菌 （Chromidium monnieri） 的干果）及其主要成分鴕鳥的抗過敏作用。

Osthol 通過調(diào)節(jié)肝臟甾醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白-1c/2 介導(dǎo)的靶基因表達來改善脂肪乳誘導(dǎo)的小鼠脂肪肝。

本研究的目的是檢查 Osthol（Ponidium monnieri （L.） Cusson （Apiaceae） 的活性成分）對高脂血癥性脂肪肝小鼠的治療效果，并探討 Osthol 治療的潛在機制。
方法和結(jié)果：
通過口服脂肪乳 4 周誘導(dǎo)高脂血癥性脂肪肝小鼠模型。然后用 Osthol 10-40 mg/kg 處理實驗小鼠 6 周。口服后，模型組和藥物治療組小鼠再次連續(xù)給予脂肪乳 2 周。此后，測量血清和肝臟中的脂質(zhì)水平、肝臟權(quán)重系數(shù)和組織病理學(xué)評估。檢測肝臟甾醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白 （SREBP）-1c 、 SREBP-2 、脂肪酸合酶 （FAS） 、低密度脂蛋白 （LDL） 受體和膽固醇 7α-羥化酶 （CYP7A） mRNA 表達。結(jié)果顯示，在 Osthol 治療組中，血清和肝臟中總膽固醇、甘油三酯和游離脂肪酸水平以及肝臟重量系數(shù)隨劑量的增加而逐漸降低。重要的是，肝臟標(biāo)本的組織病理學(xué)評估表明 Osthol 可能會減少脂質(zhì)積累。Osthol 可增加脂肪乳誘導(dǎo)的脂肪肝小鼠肝臟中 CYP7A 的 mRNA 表達，降低肝臟中 SREBP-1c 、 SREBP-2 、 FAS 和 LDL 受體的 mRNA 表達。
結(jié)論：
這些結(jié)果表明，Osthol 可能通過抑制肝臟 SREBP-1c/2 mRNA 表達和隨后調(diào)節(jié) SREBP-1c/2 介導(dǎo)的靶基因如 FAS 、 CYP7A 和 LDL 受體，對脂肪乳誘導(dǎo)的小鼠脂肪肝發(fā)揮治療作用。

方法和結(jié)果：
研究了從刺胞子 （蛇床子干果） 中獲得的 70% 乙醇提取物 （CM-ext） 對 48 小時同源被動皮膚過敏反應(yīng) （PCA） 、 2,4-二硝基氟苯 （DNFB） 誘導(dǎo)的接觸性皮炎和苦味酰氯 （PC） 誘導(dǎo)的實驗動物接觸性皮炎的抗過敏作用 （I 型和 IV）。CM-ext 對這些過敏模型顯示出抑制作用。從 CM-ext 中分離的 osthol 也具有抑制作用。
結(jié)論：
這些結(jié)果表明 Cnidii Monnieri Fructus 可能可用作過敏性疾病的藥物，其抗過敏作用部分歸因于香豆素衍生物 Osthol。