簡要描述
Rhod-2三鈉鹽(Rhod-2 Trisodium Salt)是一種水溶性、較高親和力的可見光激發(fā)的鈣離子熒光探針。類似于Fluo-3或Fluo-4,其激發(fā)和發(fā)射光譜不會隨著Ca2+濃度變化發(fā)生明顯的遷移,熒光信號一旦與Ca2+結(jié)合后會增強,Ex/Em=549/578 nm。Rhod-2三鈉鹽不具細胞膜滲透性,可通過微注射或劃痕標記加載進入細胞。
參數(shù)信息
英文名稱:Rhod-2 Trisodium Salt
中文名稱:Rhod-2三鈉鹽
分子式:C40H39N4Na3O11
分子量:820.73
狀態(tài):暗紅色固體
Kd(Ca2+結(jié)合):570NM
Ex/Em:549/578
溶解性:溶于水
純度:≥95%
儲存條件:-20℃避光干燥
使用方法與注意事項
【溶解與配置】:
推薦用純水溶解,配制成儲存液(如1-5 mM)后分裝保存。
實驗時需添加0.04% Pluronic F-127(防止探針聚集)和有機陰離子轉(zhuǎn)運抑制劑(如丙磺舒,0.5-1 mM)以提高加載效率。
【加載步驟】:
去除細胞培養(yǎng)基中的血清和酚紅(避免干擾自熒光)。
用緩沖液(如HHBS)洗滌細胞后,加入Rhod-2 Trisodium Salt工作液(終濃度4-5 μM)。
37℃孵育30-60分鐘,再用緩沖液洗滌去除殘留探針。
【檢測設備】:
可用于激光共聚焦顯微鏡、流式細胞儀或熒光酶標儀,需使用549 nm激發(fā)濾片和578 nm發(fā)射濾片。
【注意事項】:
- 儲存條件:建議 - 20℃避光干燥保存,AM酯需防潮。
- 加載方法:鈉鹽需物理導入(如顯微注射),避免酯酶抑制劑干擾。
- 信號校準:建議結(jié)合鈣離子載體(如離子霉素)進行細胞內(nèi)Ca2?濃度的定量分析。
關鍵字: Rhod-2三鈉鹽;Rhod-2 Trisodium Sal;