產(chǎn)品描述

ER-Tracker Green是一種藥物熒光偶聯(lián)物，即BODIPY? FL標記的格列苯脲（BODIPY? FL Glibenclamide）。

格列本脲，又名優(yōu)降糖（Glyburide），是一種磺酰脲類口服降糖藥，用來調(diào)查胰島素β細胞活性和胰島素分泌，以及研究心肌細胞功能和心律失常。

格列本脲能夠結(jié)合內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上突出的ATP敏感性鉀通道（KATP）的磺脲類受體。格列本脲的藥理學(xué)活性可能影響內(nèi)質(zhì)網(wǎng)功能。

某些特定細胞上磺脲類受體的可變表達可能引起非內(nèi)質(zhì)網(wǎng)標記。激發(fā)/發(fā)射波長~504/511nm，光譜特性類似于傳統(tǒng)的FITC，與檢測該染料的標準濾片兼容。

參數(shù)信息

英文名稱：ER-Tracker Green for live-cell imaging

分子式：C37H42BClF2N6O6S

分子量：783.0952

狀態(tài)：液體

Ex/Em：504/511nm

檢測濾片：FITC

純度：≥95%

儲存條件：-20℃避光干燥

注意事項

熒光染料均存在淬滅問題，請盡量注意避光，以減緩熒光淬滅。 

格列本脲的藥理學(xué)活性可能會影響內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的一些功能；某些特殊細胞中磺脲類受體的可變表達可能會導(dǎo)致非內(nèi)質(zhì)網(wǎng)特異性染色。

ER-TrackerGreen可用于活細胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的熒光染色，但不適合用于固定細胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的熒光染色。

如果經(jīng)ER-TrackerGreen染色后的細胞需要進行固定操作，使用4%多聚甲醛在37C固定2分鐘。

ER-Tracker Green染色后的細胞不能用TritonX-100通透，TritonX-100通透處理會導(dǎo)致ER-TrackerGreen的熒光染色消失。

使用說明

1.ER-Tracker Green工作液的配制:

a.取少量ER-TrackerGreen按照1:100o的比例加入到ER-Tracker

Green稀釋液中。例如取1μlER-Tracker Green加入到1ml ER-TrackerGreen稀釋液中。混勻后即為ER-Tracker Green工作液。

b.ER-TrackerGreen工作液使用前需37°C預(yù)溫育。

【注】：工作液中ER-TrackerGreen的濃度可以根據(jù)實際情況進行調(diào)整，稀釋比例調(diào)整范圍為1:1000-1:3000。

為降低背景，在染色效果可以接受的范圍內(nèi)，建議盡量使用較低濃度的ER-Tracker Green。

2.內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的熒光標記：

a.去除細胞培養(yǎng)液，用溶液如HBSSwith Ca2+&Mg2+(Hanks'Balanced Salt Solutionwith Ca2+&Mg2+)洗滌生長在蓋玻片上的細胞。

注:對于懸浮細胞的染色可以參考貼壁細胞的染色方法進行。

b.去除洗滌液，加入步驟1配制好的并37C預(yù)溫育的ER-Tracker Green染色工作液，與細胞37C共孵育15-30分鐘。

c.去除ER-TrackerGreen染色工作液，用細胞培養(yǎng)液洗滌細胞1-2次。

d.隨后通常用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡進行觀察。此時可觀察到內(nèi)質(zhì)網(wǎng)呈明亮的強熒光染色。

e.如果經(jīng)ER-TrackerGreen染色后的細胞需要進行固定，可以使用4%甲醛37°C固定2分鐘。固定后用洗滌液洗滌2-3次，每次5分鐘，隨后可以進行復(fù)染或滴加適當(dāng)?shù)目篃晒獯銣绶馄?，封片觀察。

【注】：ER-TrackerGreen染色的細胞不能用TritonX-100通透，TritonX-100通透處理會導(dǎo)致ER-TrackerGreen的熒光染色消失。