非蛋白巰基測(cè)定試劑盒說(shuō)明書(shū)
分光光度法 50管/24樣
正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定
測(cè)定意義：
生物體內(nèi)巰基主要包括非蛋白質(zhì)巰基和蛋白質(zhì)巰基。巰基化合物在體內(nèi)具有重要的解毒功能，對(duì)生物體的自我調(diào)節(jié)具有非常重要的生理意義。
測(cè)定原理：
巰基基團(tuán)與5,5’- 二硫代-雙-硝基苯甲酸（DTNB）反應(yīng)，生成黃色化合物，在412nm處有最大吸收峰。
組成：
產(chǎn)品名稱 | AO017-50T/24S | Storage |
提取液：液體 | 50ml | 4℃ |
試劑一：液體 | 40ml | 4℃ |
試劑二：液體 | 2ml | 4℃避光 |
說(shuō)明書(shū) | 一份 |
自備儀器和用品：
天平、研缽、可見(jiàn)分光光度計(jì)、恒溫水浴鍋、1ml玻璃比色皿、乙醇和蒸餾水。
樣品的制備:
按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1ml提取液）進(jìn)行冰浴勻漿，然后8000g，4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。
血清，培養(yǎng)液：取0.1ml樣本，加入0.4ml提取液，混勻，室溫靜置10min, 然后8000g，4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。
測(cè)定操作表：
分光光度計(jì)預(yù)熱30min，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至412nm，雙蒸水調(diào)零。
操作表
在1ml玻璃比色皿中加入如下試劑
| 對(duì)照管 | 測(cè)定管 |
樣品（μl） | 200 | 200 |
試劑一（μl） | 750 | 750 |
試劑二（μl） |
| 50 |
乙醇（μl） | 50 |
|
混勻，25℃靜置10min， 測(cè)定412nm吸光值，ΔA=A測(cè)定-A對(duì)照。每個(gè)測(cè)定管設(shè)一個(gè)對(duì)照管。 |
計(jì)算公式：
非蛋白巰基標(biāo)準(zhǔn)曲線：y =3.6222 x- 0.0037，R2 = 1，x為標(biāo)品濃度，單位μmol/ml， y為吸光度ΔA。
1. 組織：
（1）按樣本重量計(jì)算
非蛋白巰基含量（μmol/g 鮮重）=（ΔA+0.0037）÷3.6222 ×V樣總÷W
=0.276×（ΔA+0.0037）÷W
（2）按樣本蛋白濃度計(jì)算
非蛋白巰基含量（μmol/mg prot）=（ΔA+0.0037）÷3.6222×V樣總÷Cpr
=0.276×（ΔA+0.0037）÷Cpr
2. 血清、培養(yǎng)液：
非蛋白巰基含量（μmol/L）=（ΔA+0.0037）÷3.6222×5 ×103
=1380×（ΔA+0.0037）
V樣總：加入提取液體積，1ml；W：樣品質(zhì)量，g ；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/ml；5：血清，培養(yǎng)液等液體樣本稀釋倍數(shù)；103 ：1mmol/L=103μmol/ L
注意事項(xiàng)：
最低檢出限為10μmol/L。
關(guān)鍵字： 非蛋白質(zhì)巰基測(cè)定試劑盒;
伊勢(shì)久（江蘇連云港）生物科技有限責(zé)任公司，成立于2019年，坐落于新亞歐大陸橋東方橋頭堡連云港市。公司由資深行業(yè)專(zhuān)家和雙一流高校博士聯(lián)合創(chuàng)辦，主要從事生化檢測(cè)、病理檢測(cè)和原料酶等相關(guān)試劑的研發(fā)和生產(chǎn)。
我司位于聯(lián)東U谷科技創(chuàng)新谷內(nèi)的2000平米的生產(chǎn)、研發(fā)基地已建成投入運(yùn)行，其中包括150平米的超十萬(wàn)級(jí)的潔凈車(chē)間。我司堅(jiān)持以自主研發(fā)為核心，現(xiàn)已生產(chǎn)出的脲酶、tRNA轉(zhuǎn)運(yùn)核糖核酸、刀豆球蛋白、胰蛋白酶抑制劑等產(chǎn)品，熱銷(xiāo)市場(chǎng)以來(lái)收到了客戶的廣泛好評(píng)。
公司秉承“ 摯誠(chéng)科研、匠心傳承” 的發(fā)展理念，聚焦于前沿生物技術(shù)的應(yīng)用和創(chuàng)新，努力成為生物科技領(lǐng)域的標(biāo)桿企業(yè)。堅(jiān)持以客戶為中心，致力于為中國(guó)的科研工作者提供高品質(zhì)的產(chǎn)品和專(zhuān)業(yè)服務(wù)，始終是我們努力的目標(biāo)和方向。