多克隆抗體制備（免疫小鼠或兔）服務內容

一、參數(shù)信息

        免疫動物

1.               小鼠：常用品系 BALB/c（6-8 周齡雌性）、C57BL/6，單次免疫需 3-5 只

2.               家兔：新西蘭白兔（2-3kg 雌性），單次免疫需 1-2 只

3.               特殊品系（如基因敲除小鼠）可接受定制

        抗原類型

1.               重組蛋白：純度≥85%（提供 SDS-PAGE 驗證），推薦用量 50-100μg / 小鼠、500-1000μg / 兔

2.               合成多肽：需預先偶聯(lián)載體蛋白（KLH/BSA，默認提供偶聯(lián)服務），長度 15-20 個氨基酸（含抗原表位）

3.               細胞 / 組織裂解物：需注明生物安全等級，建議蛋白濃度≥1mg/mL

     免疫周期

1.               小鼠：4-6 周（基礎免疫 3 次 + 加強免疫 1 次，間隔 7-10 天）

2.               家兔：6-8 周（基礎免疫 4 次 + 加強免疫 1 次，間隔 10-14 天）

3.               末次免疫后 7-10 天進行心臟 / 耳緣靜脈采血

抗體形式

1.               抗血清：直接提供未純化血清（體積：小鼠≥0.5mL / 只，兔≥10mL / 只）

2.               純化 IgG：可選 Protein A/G 親和層析純化（純度≥95%，回收率≥80%，加收 30% 服務費）

二、使用信息

  服務流程

1.               抗原準備：客戶提供抗原或委托合成 / 純化（需額外 3-5 個工作日），我方進行濃度測定與免疫原性評估

2.               免疫方案：根據(jù)抗原特性選擇佐劑（弗氏完全 / 不完全佐劑、鋁佐劑），制定個性化免疫路線圖

3.               采血與檢測：末次免疫后檢測血清效價（ELISA 法，效價≥1:10,000 默認達標），達標后進行全量采血

4.               交付內容：抗血清 / 純化 IgG、實驗報告（含免疫記錄、效價檢測圖、抗體濃度）

    適用場景

1.               科研級抗體制備（適用于 WB、ELISA、IHC 等檢測）

2.               初步抗體篩選（為單克隆抗體制備提供免疫血清）

3.               低豐度蛋白檢測（利用多克隆抗體的廣譜識別特性）

     客戶需提供材料

1.               抗原樣本（注明類型、濃度、保存條件及序列信息，多肽需提供抗原表位位置）

2.               免疫動物選擇（小鼠 / 兔及品系偏好）

3.               特殊要求（如無佐劑免疫、抗生素使用限制、生物安全等級 2 級以上樣本）

三、注意事項

      實驗前

1.               多肽抗原需確保表位無同源性（避免與宿主蛋白交叉反應），我方提供免費 BLAST 同源性分析

2.               重組蛋白需確認無內毒素污染（推薦＜10EU/mg，過高可能影響免疫效果）

     實驗中

1.               若首次 ELISA 效價＜1:5,000，可免費追加 1 次加強免疫（僅限小鼠，兔需協(xié)商補免方案）

2.               免疫過程中動物出現(xiàn)過敏反應時，將暫停實驗并與客戶協(xié)商替代方案（如更換佐劑）

     實驗后

1.               抗血清需 - 20℃分裝保存，避免反復凍融（建議每管≤100μL 小鼠血清 / 1mL 兔血清）

2.               提供 2 個月內免費效價復檢服務（僅限原血清樣本，不包含重新純化）

     合規(guī)與保密

1.               實驗動物管理符合 AAALAC 認證標準，提供動物使用倫理審查文件（如需）

2.               簽署保密協(xié)議，客戶抗原序列及免疫數(shù)據(jù)僅用于本次服務，默認 3 年后數(shù)據(jù)銷毀