產(chǎn)品概述

GAPDH（甘油醛-3-磷酸脫氫酶）是糖酵解途徑的關(guān)鍵酶，催化甘油醛-3-磷酸轉(zhuǎn)化為1,3-二磷酸甘油酸。GAPDH (D4C6R) Mouse mAb（貨號：97166S）是由Cell Signaling Technology (CST)研發(fā)的高特異性單克隆抗體，通過偶聯(lián)辣根過氧化物酶（HRP）實現(xiàn)信號放大，廣泛用于Western Blotting檢測內(nèi)源性GAPDH蛋白。該抗體以人工合成肽段（對應(yīng)人類GAPDH氨基端序列）為免疫原，可識別多種物種（人、小鼠、大鼠、猴）的GAPDH蛋白，是科研實驗中校正蛋白表達量的經(jīng)典內(nèi)參工具。

核心技術(shù)特性

1. 高特異性結(jié)合

• 靶向GAPDH蛋白氨基端功能區(qū)，避免非特異性結(jié)合。

• 經(jīng)多物種組織/細胞系（如HeLa、NIH/3T3、COS-7）驗證，確保交叉反應(yīng)可靠性。

2. 靈敏度與穩(wěn)定性

• 檢測限低至ng級蛋白量，適用于微量樣本分析。

• -20℃保存有效期24個月，反復凍融穩(wěn)定性佳，支持長期實驗規(guī)劃。

3. 應(yīng)用靈活性

• 稀釋比例：Western Blotting推薦1:1000，可根據(jù)實驗需求調(diào)整至1:5000。

• 兼容復雜樣本：如全細胞裂解液、亞細胞組分，適應(yīng)多樣化研究場景。

科學應(yīng)用領(lǐng)域

1. 基礎(chǔ)代謝研究

• 監(jiān)測GAPDH酶活性變化，解析糖酵解調(diào)控機制。

• 作為內(nèi)參蛋白，校正Western Blotting實驗中上樣量差異，確保結(jié)果準確性。

2. 疾病機制探索

• 神經(jīng)退行性疾?。篏APDH在亨廷頓病、阿爾茨海默病中表達異常，參與病理過程。

• 癌癥研究：作為腫瘤代謝重編程標志物，揭示癌細胞能量代謝特征。

3. 藥物開發(fā)支持

• 靶點驗證：評估藥物對GAPDH表達或活性的影響，指導藥物篩選。

• 機制研究：解析藥物干預對細胞代謝通路的影響。

標準化操作流程

1. 樣本制備

• 細胞裂解：使用含蛋白酶抑制劑的RIPA緩沖液，冰上操作避免蛋白降解。

• 定量：BCA或Bradford法測定蛋白濃度，確保上樣量一致性。

2. 抗體孵育與檢測

• 一抗稀釋：按1:1000比例加入GAPDH (D4C6R) Mouse mAb，4℃過夜或室溫2小時。

• 二抗選擇：推薦CST HRP標記抗小鼠IgG（#7076），稀釋比1:2000-1:5000。

• 顯影：ECL化學發(fā)光底物，凝膠成像系統(tǒng)曝光，獲取高信噪比結(jié)果。

嚴格質(zhì)量控制

• 純度驗證：SDS-PAGE顯示單一重鏈（50 kDa）和輕鏈（25 kDa）條帶，無雜帶干擾。

• 無菌檢測：內(nèi)毒素含量≤0.1 EU/mL，避免細胞毒性影響。

• 批間一致性：先進生產(chǎn)工藝確保每批次抗體性能穩(wěn)定，重復實驗結(jié)果可靠。

注意事項與技術(shù)支持

• 避免反復凍融，建議分裝后使用以延長抗體活性。

• 特殊物種（如靈長類）應(yīng)用前，需通過Western Blotting驗證交叉反應(yīng)性。

• CST提供中英文雙語技術(shù)支持及全球物流支持，官方網(wǎng)站提供實驗協(xié)議、應(yīng)用筆記等資源，助力科研工作者高效解決實驗難題。

總結(jié)

GAPDH (D4C6R) Mouse mAb憑借其高特異性、靈敏度及穩(wěn)定性，已成為生命科學研究中不可或缺的工具抗體。從基礎(chǔ)代謝研究到疾病機制探索，再到藥物開發(fā)領(lǐng)域，該產(chǎn)品均展現(xiàn)出卓越的應(yīng)用價值，為科研工作者深入解析細胞代謝與疾病機制提供有力支持。