次烏頭堿 和 aconitine 對小鼠膈神經(jīng)橫膈肌神經(jīng)動作電位的阻斷作用。

在小鼠離體的膈神經(jīng)橫膈肌中對 Hypaconitine 和 aconitine 的神經(jīng)肌肉阻滯機制進行了電生理學(xué)研究。
方法和結(jié)果：
次烏頭堿（0.08-2 microM） 和烏頭堿 （0.3-2 microM） 抑制神經(jīng)誘發(fā)的抽搐緊張，而不影響肌肉刺激引起的收縮。在抑制神經(jīng)誘發(fā)的抽搐緊張的 次烏頭堿（高達 5 μM）和烏頭堿（高達 2 μM）的濃度下，肌肉細胞的靜息膜電位保持不變。次烏頭堿（0.1-2 microM） 和烏頭堿 （2 μM） 阻斷了終板電位 （epp），而不影響微型 epp （mepp） 的振幅。這些試劑降低終板電位的量子含量與振幅的降低同時降低。次烏頭堿（5 μM） 和烏頭堿 （2-10 μM） 以及 1 μM 河豚毒素 （TTX） 抑制神經(jīng)復(fù)合動作電位。當神經(jīng)復(fù)合動作電位被 2 μM 烏頭堿完全阻斷時，肌肉動作電位不受影響，盡管 1 μM TTX 對兩種電位的抑制程度相同。
結(jié)論：
這些結(jié)果表明 次烏頭堿和 aconitine 產(chǎn)生的神經(jīng)肌肉阻滯是由減少誘發(fā)的量子釋放引起的。這種效應(yīng)的機制主要歸因于神經(jīng)復(fù)合動作電位的阻斷。

Hypaconitine 聯(lián)合 liquiritin 對大鼠體內(nèi)心肌鈣調(diào)蛋白和 connexin43 表達的影響。

研究單獨使用和與甘草素聯(lián)合使用對鈣調(diào)蛋白 （CaM） 表達和連接蛋白 43 （Cx43） 磷酸化對絲氨酸 368 （Ser368） 的影響，以及研究甘草酮對這些 次烏頭堿 誘導(dǎo)的作用的干預(yù)。
方法和結(jié)果：
成年 Wistar 大鼠口服次烏頭堿 （0.23 、 0.69 、 2.07 mg/kg 每天）、 liquiritine （20 mg/kg 每天） 或 次烏頭堿 （2.07 mg/kg 每天） 加甘草素 （20 mg/kg 每天） 連續(xù) 7 天。實時定量 PCR 檢測大鼠心肌組織中 CaM 和 Cx43 的 mRNA 表達水平。Western blot 測定 CaM 和磷酸化 Cx43 （Ser368） 的蛋白含量。 結(jié)果表明，次烏頭堿 單獨使用和聯(lián)合 liquiratin 顯著降低 CaM 的 mRNA 和蛋白表達水平。雖然 CaM mRNA 表達水平受到 liquirin 的抑制，但其蛋白表達水平上調(diào)。同時，雖然給藥后未觀察到對 Cx43 mRNA 表達的明顯影響，但 Cx43 （Ser368） 的磷酸化水平受到顯著抑制。此外，Hypaconitine 和 liquiritin 的聯(lián)合給藥顯著降低了 Hypaconitine 誘導(dǎo)的對 Cx43 （Ser368） 磷酸化的抑制作用。
結(jié)論：
研究表明，Hypaconitine 可以抑制 CaM 表達和 Cx43 （Ser368） 磷酸化，liquiritin 可以通過協(xié)同抑制 CaM 表達和拮抗 Hypaconitine 誘導(dǎo)的 Cx43 （Ser368） 去磷酸化來干擾這種作用。

Hypaconitine 聯(lián)合 liquiritin 對大鼠體內(nèi)心肌鈣調(diào)蛋白和 connexin43 表達的影響。

研究單獨使用和與甘草素聯(lián)合使用對鈣調(diào)蛋白 （CaM） 表達和連接蛋白 43 （Cx43） 磷酸化對絲氨酸 368 （Ser368） 的影響，以及研究甘草酮對這些 Hypaconitine 誘導(dǎo)的作用的干預(yù)。
方法和結(jié)果：
成年 Wistar 大鼠口服 Hypaconitine （0.23 、 0.69 、 2.07 mg/kg 每天）、 liquiritine （20 mg/kg 每天） 或 Hypaconitine （2.07 mg/kg 每天） 加甘草素 （20 mg/kg 每天） 連續(xù) 7 天。實時定量 PCR 檢測大鼠心肌組織中 CaM 和 Cx43 的 mRNA 表達水平。Western blot 測定 CaM 和磷酸化 Cx43 （Ser368） 的蛋白含量。 結(jié)果表明，Hypaconitine 單獨使用和聯(lián)合 liquiratin 顯著降低 CaM 的 mRNA 和蛋白表達水平。雖然 CaM mRNA 表達水平受到 liquirin 的抑制，但其蛋白表達水平上調(diào)。同時，雖然給藥后未觀察到對 Cx43 mRNA 表達的明顯影響，但 Cx43 （Ser368） 的磷酸化水平受到顯著抑制。此外，Hypaconitine 和 liquiritin 的聯(lián)合給藥顯著降低了 Hypaconitine 誘導(dǎo)的對 Cx43 （Ser368） 磷酸化的抑制作用。
結(jié)論：
研究表明，Hypaconitine 可以抑制 CaM 表達和 Cx43 （Ser368） 磷酸化，liquiritin 可以通過協(xié)同抑制 CaM 表達和拮抗 Hypaconitine 誘導(dǎo)的 Cx43 （Ser368） 去磷酸化來干擾這種作用。

Hypaconitine 誘導(dǎo)的 QT 間延長是通過抑制清醒狗的 KCNH2 （hERG） 鉀通道介導(dǎo)的。

Hypaconitine 是傳統(tǒng)中藥中主要的烏頭生物堿之一，由 Acotinum 屬的草藥制備。這些草藥廣泛用于治療心功能不全和心律失常。然而，Acotinum 生物堿以其毒性和藥理活性而聞名，尤其是包括 QT 間期延長在內(nèi)的心臟毒性，并且這種毒性的機制尚不清楚。
方法和結(jié)果：
在這項研究中，對清醒的 Beagle 犬口服 Hypaconitine，并通過遙測記錄心電圖。進行藥代動力學(xué)研究 （6h） 以評估 QT 間期延長與暴露水平之間的關(guān)系。使用穩(wěn)定轉(zhuǎn)染 KCNH2 （hERG） cDNA 的 HEK293 細胞，通過手動膜片鉗技術(shù)檢測 Hypaconitine 對 KCNH2 通道的影響。 在清醒的狗中，所有劑量的 Hypaconitine 以劑量依賴性方式誘導(dǎo) QTcV （根據(jù) Van de Water 公式校正的 QT 間期） 延長超過 23% （67ms） 的對照。給藥后 2 小時觀察到最大 QTcV 延長。將最大延長百分比與 Hypaconitine 的血漿濃度作圖，并顯示出很強的相關(guān)性 （R（2） = 0.789）。在 HEK293 細胞的體外研究中，Hypaconitine 以濃度依賴性方式抑制 KCNH2 電流，IC50 為 8.1 nM。
結(jié)論：
這些數(shù)據(jù)表明 Hypaconitine 抑制 KCNH2 鉀通道，這種作用可能是清醒犬 QT 間期延長的分子機制。