總蛋白檢測(cè)試劑盒（雙縮脲比色法）
簡介：
總蛋白(Total Protein，TP)可分為白蛋白和球蛋白兩類，在機(jī)體中具有重要的生理功能，血清總蛋白的測(cè)定是臨床生化檢驗(yàn)的重要項(xiàng)目之一。血清蛋白具有維持血液正常膠體滲透壓和pH、運(yùn)輸多種代謝物、調(diào)節(jié)被運(yùn)輸物質(zhì)的生理作用和解除其毒性、免疫作用以及營養(yǎng)作用等多種功能。血清總蛋白不僅可用于機(jī)體營養(yǎng)狀態(tài)的監(jiān)測(cè)，還可用于疾病的診斷及鑒別診斷。對(duì)于生物體液（血清、尿液、腦脊液）中總蛋白質(zhì)含量的測(cè)定，目前通常使用的方法有：雙縮脲法、紫外分光光度法、染料結(jié)合法、凱氏定氮法、沉淀法等。
BIOISCO總蛋白檢測(cè)試劑盒（雙縮脲比色法）多用于測(cè)定人或動(dòng)物血清、血漿、組織等樣本中的總蛋白含量。雙縮脲反應(yīng)的原理是在呈藍(lán)色的堿性硫酸銅溶液存在的情況下，銅離子與肽鍵形成有色螯合的銅復(fù)合物，呈紫色，所產(chǎn)生的顏色密度與參與反應(yīng)肽鍵數(shù)成比例。可通過比色法分析濃度，在紫外可見光譜中的波長。雙縮脲法測(cè)定蛋白質(zhì)測(cè)定范圍能夠是1~10 mg蛋白質(zhì)，操作簡單、快捷。既適合手工操作，又適合自動(dòng)化分析，重復(fù)性好、線性關(guān)系好， 雙縮脲試劑可以長期保存。本試劑盒僅用于科研領(lǐng)域，不宜用于臨床診斷或其他用途。
組成：
產(chǎn)品名稱 | KB024-120T | Storage |
試劑(A)：雙縮脲試劑 | 250ml | 4℃ |
試劑(B)：蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶液（20 mg/ml） | 1ml | -20℃ |
說明書 | 一份 |
保存條件：
試劑(A)：雙縮脲試劑4℃保存，一年有效，試劑(B)：蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶液（20 mg/ml）室溫保存，蛋白標(biāo)
準(zhǔn)配制成溶液后應(yīng)-20℃保存。
自備材料：
離心管或小試管
2、 水浴鍋或恒溫箱
3、 比色杯
4、 分光光度計(jì)
操作步驟（僅供參考）：
1、 蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶液(20 mg/ml)按自己試驗(yàn)要求用稀釋液進(jìn)行稀釋，如稀釋至1 mg/ml。特別提示：待測(cè)蛋白溶解于什么樣的稀釋液中，蛋白標(biāo)準(zhǔn)也宜溶解于什么樣的稀釋液中。例如待測(cè)蛋白溶解于蔗糖中，亦取蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶解于蔗糖中。一般也可以用NaCl或PBS作為溶解總蛋白標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋液。
2、 樣本處理：血清、血漿樣本直接取檢測(cè)。對(duì)于組織樣本，按組織質(zhì)量(g)：生理鹽水比例，加入生理鹽水或PBS，冰浴下勻漿后，離心，取上清待檢。
3、 TP加樣操作，按下表依次加入試劑：
加入物（ml） | 空白管 | 標(biāo)準(zhǔn)管 | 待測(cè)管 |
ddH2O | 0.04 |
|
|
蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶液(如 1mg/ml) |
| 0.04 |
|
待檢樣品(血清、血漿、組織勻漿液) |
|
| 0.04 |
雙縮脲試劑 | 2.0 | 2.0 | 2.0 |
4、 混勻，孵育。
5、 比色杯光徑，分光光度計(jì)測(cè)定波長處的吸光度，如無，之間的波長也可。以空白管調(diào)零，讀取標(biāo)準(zhǔn)管和各待測(cè)管的吸光度。
6、 當(dāng)遇到渾濁或溶血樣本等，應(yīng)設(shè)“樣本空白管”：取待測(cè)樣品加入雙縮脲空白試劑，以雙縮脲空白試劑調(diào)零，讀取樣本空白管吸光度。用待測(cè)管吸光度減去樣本空白管吸光度后的凈吸光度，計(jì)算總蛋白濃度。
計(jì)算：
總蛋白(g/L)=(待測(cè)管吸光度/標(biāo)準(zhǔn)管吸光度)×蛋白標(biāo)準(zhǔn)液濃度(g/L)
注意事項(xiàng)：
1、 蛋白標(biāo)準(zhǔn)粉末溶解于蛋白標(biāo)準(zhǔn)配制液后，即獲得蛋白標(biāo)準(zhǔn)原液，該原液中含有防腐劑，不影響后續(xù)檢測(cè)，該蛋白標(biāo)準(zhǔn)原液-20℃長期保存。
2、 待測(cè)蛋白和蛋白標(biāo)準(zhǔn)加入雙縮脲試劑后，如果發(fā)現(xiàn)檢測(cè)效果不佳，可以室溫放置1 h或60℃放置15 min，顏色會(huì)隨著時(shí)間的延長不斷加深。
3、 測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)發(fā)現(xiàn)隨著標(biāo)準(zhǔn)品濃度的增加吸光度或顏色沒有明顯變化，可能的原因是樣品中含有銅離子螯合劑。
4、 如果沒分光光度計(jì)，也可以使用酶標(biāo)儀測(cè)定。使用酶標(biāo)儀測(cè)定蛋白濃度時(shí)，每個(gè)試劑盒可以測(cè)定的樣品數(shù)量可能會(huì)顯著增加。
5、 檢測(cè)中發(fā)現(xiàn)所有孔都呈暗紫色，可能原因是樣品含有還原劑，應(yīng)適當(dāng)透析或稀釋樣品。
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伊勢(shì)久（江蘇連云港）生物科技有限責(zé)任公司，成立于2019年，坐落于新亞歐大陸橋東方橋頭堡連云港市。公司由資深行業(yè)專家和雙一流高校博士聯(lián)合創(chuàng)辦，主要從事生化檢測(cè)、病理檢測(cè)和原料酶等相關(guān)試劑的研發(fā)和生產(chǎn)。
我司位于聯(lián)東U谷科技創(chuàng)新谷內(nèi)的2000平米的生產(chǎn)、研發(fā)基地已建成投入運(yùn)行，其中包括150平米的超十萬級(jí)的潔凈車間。我司堅(jiān)持以自主研發(fā)為核心，現(xiàn)已生產(chǎn)出的脲酶、tRNA轉(zhuǎn)運(yùn)核糖核酸、刀豆球蛋白、胰蛋白酶抑制劑等產(chǎn)品，熱銷市場(chǎng)以來收到了客戶的廣泛好評(píng)。
公司秉承“ 摯誠科研、匠心傳承” 的發(fā)展理念，聚焦于前沿生物技術(shù)的應(yīng)用和創(chuàng)新，努力成為生物科技領(lǐng)域的標(biāo)桿企業(yè)。堅(jiān)持以客戶為中心，致力于為中國的科研工作者提供高品質(zhì)的產(chǎn)品和專業(yè)服務(wù)，始終是我們努力的目標(biāo)和方向。