改良檸檬酸鈉抗原修復(fù)液(50×)

簡介：

組織在制作過程中，由于化學(xué)試劑的作用封閉了抗原，又由于熱的作用致使部分抗原的肽鏈發(fā)生扭曲，致使在免疫組化的染色過程中不能將其顯示出來，為了解決上述的問題，利用化學(xué)試劑和熱的作用將這些抗原重新暴露出來或修正過來的過程稱為抗原修復(fù)。檸檬酸鹽、EDTA 或Tris 等緩沖液在熱的條件下可以使被福爾馬林屏蔽的抗原重新暴露出來，同時又不會對抗原表位造成破壞，從而提高抗原的檢出率，降低背景染色，提高診斷的準(zhǔn)確率。

BIOISCO 改良檸檬酸鈉抗原修復(fù)液(Improved Citrate Antigen Retrieval solution， 50×)是一種最常用的抗原修復(fù)液，可以用于石蠟切片、冰凍切片等樣品使用多聚甲醛、甲醛或其它醛類試劑固定后的抗原修復(fù)。細(xì)胞或組織用多聚甲醛、福爾馬林或其它醛  類試劑固定后，會導(dǎo)致蛋白之間的交聯(lián)，遮蔽樣品抗原位點，導(dǎo)致免疫染色信號減弱， 甚至出現(xiàn)一些假陽性染色結(jié)果。采用了廣泛使用的檸檬酸鈉緩沖液(pH6.0)，可以有效去除醛類固定試劑導(dǎo)致的蛋白之間的交聯(lián)，充分暴露石蠟切片等樣品中的抗原表位，  從而大大改善免疫染色效果?？乖迯?fù)可以提高石蠟切片的免疫染色效果，亦可以不  同程度的提高冰凍切片的染色效果。當(dāng)冰凍切片免疫染色效果不理想時，考慮進(jìn)行抗  原修復(fù)。按照每個片子需要 10ml 抗原修復(fù)液(1×)計算，100ml 抗原修復(fù)液(50×)可以用于 500 個樣本的抗原修復(fù)。

組成：

保存條件： 

4℃保存，一年有效

自備材料：

1、系列乙醇

2、雙蒸水或去離子水

3、加熱設(shè)備

4、免疫染色洗滌液

操作步驟(僅供參考)：

(一)石蠟切片

1、脫蠟至水

①二甲苯 3 次，每次 3～5min。

② 無水乙醇脫水 2 次，每次 3～5min。

③乙醇，3～5min。

④70%的乙醇，3～5min。

⑤蒸餾水沖洗 2 次，每次 3～5min。

2、抗原修復(fù)

①用去離子水或雙蒸水稀釋改良檸檬酸鈉抗原修復(fù)液(50×)至 1×。

②將切片浸泡在抗原修復(fù)液(1×)中，95℃或沸水加熱約 10～30min。

③抗原修復(fù)液(1×)使用前需預(yù)熱。如果使用微波爐加熱，避免暴沸和過多的水分蒸發(fā)。隨后大約在 20～30min 內(nèi)冷卻至室溫。

3、免疫染色洗滌液洗滌 1～2 次，每次 3～5min。

4、進(jìn)行封閉等后續(xù)的免疫染色步驟。

(二)冰凍切片

1、用去離子水或雙蒸水稀釋改良檸檬酸鈉抗原修復(fù)液(50×)至 1×。

2、免疫染色洗滌液洗滌切片 5min。

3、將切片浸泡在抗原修復(fù)液(1×)中，95℃或沸水加熱約 10～30min

4、抗原修復(fù)液(1×)使用前預(yù)熱至 95-100℃。如果使用微波爐加熱，避免暴沸和過多的水分蒸發(fā)。隨后大約在 20～30min 內(nèi)冷卻至室溫。

5、免疫染色洗滌液洗滌 1～2 次，每次 3～5min。 6、進(jìn)行封閉等后續(xù)的免疫染色步驟。

(三)其它樣品

其它樣品參考石蠟切片或冰凍切片進(jìn)行操作。

注意事項：

1、浸泡在抗原修復(fù)液(1×)中，最佳的加熱時間需根據(jù)不同的樣品和目的蛋白自行摸索。

2、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

3、本產(chǎn)品僅供科研使用，嚴(yán)禁它用。