產(chǎn)品描述
本產(chǎn)品利用獨(dú)特的磁珠與緩沖液系統(tǒng),可以特異性地吸附 RNA,有效去除蛋白、鹽離子和其他雜質(zhì)。常用于純化去除 +RNA 后的總 RNA 樣本,體外轉(zhuǎn)錄的 RNA產(chǎn)物,RNA 標(biāo)記產(chǎn)物以及合成的 RNA 等。純化后的 RNA 適用于 RNA 文庫(kù)構(gòu)建、RT-PCR、 qRT-PCR、芯片分析、Northern Blot 和 RNAi 等實(shí)驗(yàn)。
使用說(shuō)明
所需額外試劑:
100% 乙醇,RNase Free Water ,磁力架,RNase Free PCR 管
RNA 純化:
1、將 RNA Clean Magnetic Beads 從 4℃℃取出,平衡至室溫(約 30 min)。
2、顛倒或渦旋振蕩使磁珠充分混勻,每次加樣前渦旋10s。
3、RNA 樣品先加等體積的無(wú)水乙醇,再加入混勻的磁珠。(按照 10 mL 磁珠可吸附 RNA 總量為 150 μg 計(jì)算)
4、加入磁珠后渦旋振蕩混勻,瞬時(shí)離心,放室溫下孵育 5min。
5、將樣品置于磁力架上 5min,待溶液澄清后,小心移除上清。
6、保持樣品置于磁力架上,加入 500 新鮮配制的 75%乙醇,漂洗磁珠,室溫孵育 2min,小心移除上清。
7、重復(fù)步驟 6一次,共漂洗2 次。
保持樣品始終處于磁力架上,開(kāi)蓋空氣干燥磁珠5 min。8、
9、將樣品從磁力架上取出,加入適量 RNase Free Water,渦旋振蕩混勻,室溫靜置 5 min。
10、將樣品置于磁力架5min,待溶液澄清后,小心轉(zhuǎn)移上清至一個(gè)新 RNase Free PCR 管中。
【注】建議轉(zhuǎn)移上清時(shí)留 2-3 m 液體,以免吸到磁珠影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)。得到的RNA 極不穩(wěn)定,建議盡快進(jìn)入下一步。若要保存,請(qǐng)置于-80℃℃保存。
關(guān)鍵字: RNA純化;磁珠;mRNA提取;
琿信生物是華東醫(yī)藥(股票代碼:000963)旗下全資子公司,公司總部及生產(chǎn)基地位于杭州市,在上海市設(shè)有營(yíng)銷中心。公司專注于mRNA藥物、體外診斷、細(xì)胞基因治療等產(chǎn)業(yè)鏈上游核心原料,并致力于向全球客戶提供GMP級(jí)質(zhì)粒DNA、mRNA、抗體及重組蛋白藥物等CDMO整體解決方案。核心原料包括常規(guī)/修飾NTPs、mRNA帽類似物、dNTPs等合成砌塊,T7 RNA聚合酶、RNA酶抑制劑、熱啟動(dòng)DNA聚合酶、MMLV反轉(zhuǎn)錄酶等高端生物酶以及GMP級(jí)細(xì)胞因子?,q信生物一直踐行“成就客戶,產(chǎn)品至上,雷厲風(fēng)行,合作共贏”的企業(yè)價(jià)值觀,向全球客戶提供符合國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)的上游原料,為生物藥企提供從研發(fā)到商業(yè)化生產(chǎn)全流程一站式CDMO解決方案。
公司建立了近6,000平方GMP級(jí)大分子潔凈生產(chǎn)車間,配制設(shè)備均為Cytiva、Bosch、Agilent等國(guó)際一流品牌,軟硬件已達(dá)國(guó)際先進(jìn)水平。公司具備20-200L哺乳動(dòng)物細(xì)胞獨(dú)立生產(chǎn)線、3,500L畢赤酵母獨(dú)立生產(chǎn)線、3,500L大腸桿菌獨(dú)立生產(chǎn)線、西林瓶和卡式瓶商業(yè)化灌裝線、40-400立方數(shù)條進(jìn)口真空冷凍干燥生產(chǎn)線?,q信生物提供包括早期工藝研究、生產(chǎn)工藝開(kāi)發(fā)與優(yōu)化、中試與臨床樣本生產(chǎn)、商業(yè)化生產(chǎn)、檢驗(yàn)方法開(kāi)發(fā)等服務(wù),可承接國(guó)內(nèi)外mRNA、抗體及重組蛋白藥物委托研發(fā)和生產(chǎn)。琿信生物具備完善的GMP生產(chǎn)和質(zhì)控體系,在質(zhì)量合規(guī)方面有豐富的經(jīng)驗(yàn)。國(guó)際化新藥注冊(cè)文件體系和中英文文件體系能夠滿足中美雙報(bào)要求。