Na +K+ - ATP 酶活性測(cè)定說明書 

分光光度法 50 管/24 樣 

正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定 

測(cè)定意義：

Na +K+ - ATP 酶廣泛分布于植物、動(dòng)物、微生物和細(xì)胞中，可催化 ATP 水解生成 ADP 和無機(jī)磷。

測(cè)定原理： 

Na +K+ -ATP 酶分解 ATP 生成 ADP 及無機(jī)磷，通過測(cè)定無機(jī)磷的量來確定 ATP 酶活性。

需自備的儀器和用品: 

可見分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 ml 玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

樣品酶液的制備：

1、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備： 細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（10 4個(gè)）： 提取液體積（ml）為 500~1000：1 的比例（建議 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1ml 提取液），超聲波破碎細(xì)菌或 細(xì)胞（冰浴，功率 20％或 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復(fù) 30 次）；8000g 4℃離心 10min，取上清，置冰 上待測(cè)。

組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(ml)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 組織，加入 1ml 提 取液），進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測(cè)。 

2、血清（漿）樣品：直接檢測(cè)。