一氧化氮(Nitric oxide,NO)含量測定試劑盒說明書
分光光度法 50管/48樣
正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義:
NO(Nitric Oxide,NO)廣泛分布于生物體內神經、循環(huán)、呼吸、消化、泌尿生殖等系統中,特別是神經組織中較豐富。它作為細胞間及細胞內的信息物質,發(fā)揮信號傳遞的作用,是一種新型的生物信使分子,在機體的生理、病理過程中起著重要的作用。
測定原理:
NO在體內或水溶液中極易氧化生成NO2—,在酸性條件下,NO2—與重氮鹽磺酸胺生成重氮化合物,進一步與萘基乙烯基二胺偶合,產物在550nm處有特征吸收峰,測定其吸光值,可以計算NO含量。
組成:
產品名稱 | SG003-50T/48S | Storage |
提取液:液體 | 50ml | 4℃ |
試劑一:液體 | 15ml | 4℃避光 |
試劑二:液體 | 15ml | 4℃避光 |
說明書 | 一份 |
試劑二:液體15ml×1瓶,4℃避光保存。(用之前60℃加熱震蕩15min)
自備儀器和用品:
天平、研缽或勻漿器、可見分光光度計、1ml玻璃比色皿、蒸餾水。
樣品處理:
組織:按照組織質量(g):提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1ml提取液)進行冰浴勻漿。10000g,4℃離心15min,取上清,置冰上待測。
細菌、真菌:按照細胞數量(104個):提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1ml提取液),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);然后10000g,4℃,離心15min,取上清置于冰上待測。
體液和培養(yǎng)液等其它液態(tài)樣品:直接測定。
測定步驟和操作表:
| 空白管 | 測定管 |
樣品(μl) |
| 400 |
提取液(μl) | 400 |
|
試劑一(μl) | 250 | 250 |
試劑二(μl) | 250 | 250 |
混勻,室溫靜置15min, 1ml玻璃比色皿,測定A550,ΔA=A測定-A空白 |
NO含量計算
標準曲線回歸方程為:y= 0.016x -0.0103,R2= 0. 9986
1、組織樣品:
(1)按樣本質量計算
NO含量(μmol/g 鮮重)=(ΔA +0.0103)÷0.016×V反總÷(V樣÷V樣總×W)×10-3
= 0.14×(ΔA +0.0103)÷W
(2)按樣本蛋白濃度計算
NO含量(μmol/mg prot)=(ΔA +0.0103)÷0.016×V反總÷(V樣×Cpr)×10-3
= 0.14×(ΔA +0.0103)÷Cpr
2、細胞:
NO含量(μmol/104 cell)=(ΔA +0.0103)÷0.016×V反總÷(V樣÷V樣總×細胞數量)×10-3
= 0.14×(ΔA +0.0103)÷細胞數量(萬個)
3、其他樣品:
NO含量(μmol/L)=(ΔA +0.0103)÷0.016×V反總÷V樣
= 140×(ΔA +0.0103)
V反總:反應總體積,0.9ml;V樣:反應中樣品體積,0.4ml;V樣總:加入提取液體積,1ml;W:樣品質量,g;Cpr:蛋白濃度,mg/ml
溫馨提示:本產品不可用于臨床用途,詳詢客服。
關鍵字: 一氧化氮含量檢測;
伊勢久(江蘇連云港)生物科技有限責任公司,成立于2019年,坐落于新亞歐大陸橋東方橋頭堡連云港市。公司由資深行業(yè)專家和雙一流高校博士聯合創(chuàng)辦,主要從事生化檢測、病理檢測和原料酶等相關試劑的研發(fā)和生產。
我司位于聯東U谷科技創(chuàng)新谷內的2000平米的生產、研發(fā)基地已建成投入運行,其中包括150平米的超十萬級的潔凈車間。我司堅持以自主研發(fā)為核心,現已生產出的脲酶、tRNA轉運核糖核酸、刀豆球蛋白、胰蛋白酶抑制劑等產品,熱銷市場以來收到了客戶的廣泛好評。
公司秉承“ 摯誠科研、匠心傳承” 的發(fā)展理念,聚焦于前沿生物技術的應用和創(chuàng)新,努力成為生物科技領域的標桿企業(yè)。堅持以客戶為中心,致力于為中國的科研工作者提供高品質的產品和專業(yè)服務,始終是我們努力的目標和方向。