甲基綠染色液(0.1%)

簡(jiǎn)介：

甲基綠，化學(xué)式為C27H35BrClN3·ZnCl2，分子量為608.78，是具有金屬光澤的綠色微結(jié)晶或亮綠色粉末。溶于水，顯藍(lán)綠色。稍溶于乙醇，不溶于戊醇。其是一種堿性染料，它易與聚合程度高的DNA結(jié)合呈現(xiàn)綠色，又稱雙綠SF。

甲基綠染色液(0.1%)在組織或細(xì)胞染色中對(duì)細(xì)胞核進(jìn)行染色，常用于鑒定DNA，細(xì)胞核中的DNA遇甲基綠會(huì)被染成藍(lán)綠色，亦可用于免疫熒光染色或免疫組化染色。本品僅用于科研實(shí)驗(yàn)，不可做他用。

組成：

儲(chǔ)存條件：

常溫避光保存，一年有效

自備材料：

1、4%多聚甲醛

2、蒸餾水

3、系列乙醇

操作步驟（僅供參考）：

1、樣品處理    

a)對(duì)于石蠟切片：    

二甲苯中脫蠟。    

更換新鮮的二甲苯，再脫蠟5～10 min。    

無(wú)水乙醇5 min。    

乙醇2 min。    

乙醇2 min。    

蒸餾水2 min。    

b)對(duì)于冰凍切片：    

蒸餾水2 min。

c)對(duì)于培養(yǎng)細(xì)胞：

用多聚甲醛固定10 min以上。

蒸餾水洗滌2 min。

更換新鮮的蒸餾水，再洗滌2 min。

2、甲基綠染色

a)    對(duì)于上述處理好的樣本，用Methyl Green Stain(1%)染色5～10 min。

b)用蒸餾水沖洗2次，此時(shí)樣本呈藍(lán)色。

c)乙醇處理5 s。

d)用乙醇洗滌2次，直接觀察或按下列組織切片操作步驟進(jìn)行。

3、組織切片染色

a)乙醇脫水2 min。

b)更換新鮮的乙醇再脫水2 min。

c)二甲苯透明5 min。

d)二甲苯透明5 min。

e)中性樹膠或其它封片劑封片。

f)顯微鏡下觀察，細(xì)胞核呈綠色或藍(lán)綠色。

4、熒光染色

a)如果進(jìn)行免疫熒光染色，在甲基綠染色液染色后，乙醇洗滌2 次，每次2 min。

b)乙醇脫水2 min。

c)PBS或生理鹽水或TBS等用于免疫染色或熒光染料染色的溶液浸泡5 min。

d)進(jìn)行免疫熒光染色或其它熒光染料的染色。

染色結(jié)果：

注意事項(xiàng)：

1、 首次使用本染液時(shí)建議先取1~2個(gè)樣品做預(yù)實(shí)驗(yàn)。

2、 甲基綠染色可以根據(jù)染色結(jié)果和要求調(diào)整時(shí)間。

3、 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。