前言:
抗性淀粉(RS)是指在人小腸內(nèi)不能被酶解的淀粉,在大腸部分或完全發(fā)酵。RS是總膳食纖維的組分之一。
抗性淀粉的測(cè)定方法:
樣品使用胰a-淀粉酶和淀粉葡萄糖苷酶(AMG)37℃振蕩水浴孵育16小時(shí),在這期間,通過(guò)兩種酶的聯(lián)合作用,非抗性淀粉被水解成D-葡萄糖,孵育結(jié)束后,加入等體積的乙醇或工業(yè)甲基化酒精(IMS,變性乙醇)終止反應(yīng)。離心上述溶液,收集上清勿棄,底部殘留絮狀團(tuán)即為樣品中的RS,用含水的MS或50%乙醇(v/v)洗滌絮狀團(tuán),洗滌后離心,再重復(fù)一次洗滌離心,收集離心后獲得的上清,與之前收集的上清混合。小心倒出試管殘留的液體,將絮狀團(tuán)置于冰水浴中,加入2MKOH溶解,溶解的同時(shí)用磁力攪拌機(jī)劇烈攪拌。用醋酸鹽緩沖液將這個(gè)溶液調(diào)至中性,用AMG將淀粉定量水解成葡萄糖。D-葡萄糖用葡萄糖氧化酶/過(guò)氧化物酶試劑(GOPOD)測(cè)定,這也是對(duì)樣品中RS含量的測(cè)定。非抗性淀粉(可溶性淀粉)的測(cè)定可通過(guò)集中的上清液并定容至100mL,再用GOPOD測(cè)定D-葡萄糖完成。
應(yīng)用性和精確性:
這個(gè)方法需要樣品中RS含量多于2%(w/w),如RS含量多于2%(w/w),常規(guī)標(biāo)準(zhǔn)誤差為±5%;如RS含量少于2%(w/w)則標(biāo)準(zhǔn)誤差更高。
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