蔗糖合成酶（合成方向；SS-Ⅱ）試劑盒說明書
微量法 100管/48樣
正式測定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
測定意義：
蔗糖是源（葉片等）光合產(chǎn)物向“庫”器官運(yùn)輸?shù)闹饕螒B(tài)。蔗糖合成酶（Sucrose Synthase, EC 2.4.1.13）是雙向反應(yīng)酶，既可催化蔗糖合成又可催化蔗糖分解，是蔗糖代謝的關(guān)鍵酶之一。研究其合成方向SS-Ⅱ的活性對于植物蔗糖合成具有重要意義。
測定原理：
SS-Ⅱ催化游離果糖與葡萄糖供體UDPG反應(yīng)生成蔗糖，蔗糖與間苯二酚反應(yīng)可呈現(xiàn)顏色變化，在480nm下有特征吸收峰，酶活力大小與顏色的深淺成正比。
組成：
產(chǎn)品名稱 | SC006-100T/48S | Storage |
提取液：液體 | 100ml | 4℃ |
試劑一：液體 | 2.5ml | -20℃ |
試劑二：蔗糖溶液 | 10ml | 4℃ |
試劑三：液體 | 2ml | 4℃ |
試劑四：液體 | 25ml | 4℃ |
試劑五：液體 | 6ml | 4℃避光 |
說明書 | 一份 |
試劑二：1000μg/ml蔗糖溶液10ml×1瓶，4℃保存；
試劑五：液體6ml×1瓶，4℃避光保存；
自備儀器和用品：
可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、離心機(jī)、移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰
樣品測定的準(zhǔn)備：
按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1ml提取液），進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。
測定步驟：
分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長至480nm，蒸餾水調(diào)零。
樣本測定(在EP管中加入下列試劑）：
試劑名稱（μl） | 測定管 | 對照管 | 標(biāo)準(zhǔn)管 | 空白管 |
樣本 | 10 | 10 |
|
|
蒸餾水 |
| 45 | 45 | 55 |
試劑二 |
|
| 10 |
|
試劑一 | 45 |
|
|
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混勻，25℃準(zhǔn)確水浴10min
沸水浴中煮沸10min左右（蓋緊，以防止水分散失），冷卻
試劑四 | 210 | 210 | 210 | 210 |
試劑五 | 60 | 60 | 60 | 60 |
混勻，沸水浴30min，冷卻后，取200μl 至微量石英比色皿或96孔板中，480nm下測定各管吸光值。標(biāo)準(zhǔn)管和空白管只要做一管。每個(gè)測定管需要設(shè)一個(gè)對照管。
SS-Ⅱ活性計(jì)算
1、按照蛋白濃度計(jì)算
單位定義：每mg組織蛋白每分鐘催化產(chǎn)生1μg 蔗糖定義為一個(gè)酶活力單位。
SS-Ⅱ活性(μg /min/mg prot)= C標(biāo)準(zhǔn)管×V1×（A測定管-A對照管)÷（A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷(V1×Cpr)÷T=100×（A測定管-A對照管)÷（A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷Cpr
2、按照樣本鮮重計(jì)算
單位定義：每g組織每分鐘催化產(chǎn)生1μg 蔗糖定義為一個(gè)酶活力單位。
SS-Ⅱ活性(μg /min/g鮮重) = C標(biāo)準(zhǔn)管×V1×（A測定管-A對照管)÷（A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷(W×V1÷V2)÷T=100×（A測定管-A對照管)÷（A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷W
C標(biāo)準(zhǔn)管：標(biāo)準(zhǔn)管濃度，1000μg/ml；V1：加入反應(yīng)體系中樣本體積，0.01ml； V2：加入提取液體積，1ml；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/ml；W：樣本鮮重，g；T ：反應(yīng)時(shí)間：10min。
關(guān)鍵字： 蔗糖合成酶（合成方向；SS-Ⅱ）檢測試劑;
伊勢久（江蘇連云港）生物科技有限責(zé)任公司，成立于2019年，坐落于新亞歐大陸橋東方橋頭堡連云港市。公司由資深行業(yè)專家和雙一流高校博士聯(lián)合創(chuàng)辦，主要從事生化檢測、病理檢測和原料酶等相關(guān)試劑的研發(fā)和生產(chǎn)。
我司位于聯(lián)東U谷科技創(chuàng)新谷內(nèi)的2000平米的生產(chǎn)、研發(fā)基地已建成投入運(yùn)行，其中包括150平米的超十萬級的潔凈車間。我司堅(jiān)持以自主研發(fā)為核心，現(xiàn)已生產(chǎn)出的脲酶、tRNA轉(zhuǎn)運(yùn)核糖核酸、刀豆球蛋白、胰蛋白酶抑制劑等產(chǎn)品，熱銷市場以來收到了客戶的廣泛好評。
公司秉承“ 摯誠科研、匠心傳承” 的發(fā)展理念，聚焦于前沿生物技術(shù)的應(yīng)用和創(chuàng)新，努力成為生物科技領(lǐng)域的標(biāo)桿企業(yè)。堅(jiān)持以客戶為中心，致力于為中國的科研工作者提供高品質(zhì)的產(chǎn)品和專業(yè)服務(wù)，始終是我們努力的目標(biāo)和方向。