產品介紹

活性氧（ROS）是含氧的高活性化學分子，包括超氧化物、羥自由基、單線態(tài)氧和過氧化物等。這類分子因外層電子未配對而具有極強的反應活性，既是氧代謝的天然副產物，又在細胞信號傳導和穩(wěn)態(tài)調節(jié)中發(fā)揮重要作用。

ROS Brite? DHCF探針具有與2',7'-二氯二氫熒光素二乙酸酯相似的氧化還原特性，但其光譜顯著紅移。該探針可被細胞酯酶水解為無熒光的還原形式，隨后被H2O2氧化為高熒光性染料。它能響應多種在氧化應激時增強的氧化反應，適用于：1）監(jiān)測細胞氧化還原過程；2）與FITC標記抗體或GFP細胞系進行多重檢測。其氧化產物在細胞內呈現強熒光，為病理條件下的氧化應激研究提供了重要工具。

實驗方案

本方案僅供參考，需根據具體實驗需求進行調整。在配制ROS Brite?工作液前，請先完成對細胞或動物的預處理。

實驗步驟

1.儲備液配制：使用DMSO配制10-20 mM ROS Brite?儲備液，用含20 mM Hepes緩沖液的Hanks平衡鹽溶液（HHBS）稀釋至5-10 μM工作濃度

2.樣本預處理（示例：RASM細胞可用50-100 nM血管緊張素II處理3-5小時）

3.加入步驟1配制的ROS Brite?工作液（5-10 μM），37°C孵育15-30分鐘

*注：最合適的濃度因細胞系而異（如貨號16053建議使用0.5-5 μM），需通過預實驗確定*

4.移除染液，用HHBS緩沖液洗滌

5.選用熒光顯微鏡、流式細胞儀、活體成像進行熒光檢測

注：本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！