產(chǎn)品概述

Enkilife生物素標記試劑盒提供了目前市面上幾種常用的生物素類型，所有生物素標記試劑盒包含標記所需全部試劑，用于含有伯氨基的蛋白、抗體的標記，本試劑盒提供的組分配套默認標記抗體或與抗體類似大小的蛋白。

產(chǎn)品特點

• 快速：標記反應(yīng)時間需約30分鐘，同時兼顧標記效果和標記效率
• 簡便：每管生物素試劑已優(yōu)化設(shè)計好對應(yīng)的抗體量，無需繁瑣計算，按照步驟操作即可獲得良好效果
• 靈活：對大規(guī)格試劑盒中的生物素進行分裝，批次性能一致，方便多次使用
• 標記效果突出：優(yōu)化的標記緩沖液使標記位點相對固定，增強標記后抗體的同質(zhì)性
• 生物素種類豐富：提供多種類型生物素，可應(yīng)對多種應(yīng)用需求

生物素簡介

生物素，也稱為維生素 H 、輔酶 R、維生素 B7，是一種水溶性物質(zhì)。其分子核心結(jié)構(gòu)由一個脲基環(huán)和一個四氫噻吩環(huán)連接而成。生物素和抗生物素蛋白（親和素或鏈霉親和素）之間的相互作用是非放射性純化、檢測、固定化、標記、病毒載體靶向和藥物靶向系統(tǒng)中的有用工具。生物素和親和素之間的超常親和力是已知的蛋白質(zhì)與配體之間最強的非共價相互作用之一，兩者結(jié)合非常迅速，一旦形成，便不受pH值、溫度、有機溶劑和其他變性劑的影響。

除了與抗生物素蛋白有很強的親和力外，生物素還具有兩個特點，使其成為標記蛋白質(zhì)和大分子的理想分子。首先，生物素比球狀蛋白質(zhì)相對小，從而最大限度地減少了對許多蛋白質(zhì)的顯著干擾，并允許多個生物素分子與單個蛋白質(zhì)結(jié)合，從而最大限度地提高檢測能力。根據(jù)使用場景的不同，越來越多的不同類型的生物素及其衍生物被開發(fā)出來，如含不同活化基團，不同溶解度，不同間隔臂長度，及生物胞素、脫硫生物素等不同的生物素衍生物， 極大的拓展了生物素的應(yīng)用范圍。

在許多蛋白質(zhì)研究應(yīng)用中，通常使用親和素偶聯(lián)物檢測或純化生物素標記的蛋白質(zhì)，包括酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）、蛋白質(zhì)印跡分析、免疫組織化學(xué)（IHC）、免疫沉淀（IP）和其他親和純化方法、細胞表面標記和流式細胞術(shù)（FC）/細胞分選（FACS）。

不同生物素性質(zhì)及選擇

• 當需要最終標記物分子量盡可能小，選擇短臂生物素標記試劑盒。
• 當下游應(yīng)用需要使用還原劑切割生物素標簽時，選擇Sulfo-NHS-SS-Biotin?標記試劑盒。
• 當需要最大限度提高蛋白質(zhì)的溶解度，防止蛋白聚集，選擇NHS-PEG4-Biotin?標記試劑盒。
• 當希望最終結(jié)合空間位阻較小，選擇長臂生物素標記試劑盒，根據(jù)結(jié)合特點選擇合適的臂長。

生物素類試劑主要特征

試劑盒規(guī)格

* 超濾管分子量截留值50KDa
** 1 set = 1個超濾管和收集管

標記原理

在一定的化學(xué)反應(yīng)條件下，生物素活化基團專一性與抗體蛋白上的伯胺基反應(yīng)，形成穩(wěn)定的酰胺鍵，從而實現(xiàn)與抗體蛋白的標記偶聯(lián)。

標記原理示意圖

常規(guī)標記流程

1. 步驟一、超濾換液濃縮
2. 步驟二、標記反應(yīng)
3. 步驟三、純化
4. 步驟四、收集保存

標記流程圖

其他問題

參見常見問題答疑