產品簡介
HRP(辣根過氧化物酶)是從辣根根部提取的氧化還原酶,可催化過氧化氫(H?O?)對底物的氧化反應,生成有色或熒光產物。廣泛應用于ELISA、WB、原位雜交及生物傳感器等領域。
產品特點
操作簡便:組分齊全,按流程操作即可獲得高品質偶聯(lián)抗體
高純度HRP:催化效率高,底物反應靈敏度提升
定向偶聯(lián)技術:HRP與抗體無自連,偶聯(lián)物均一穩(wěn)定
延長臂交聯(lián)劑:消除蛋白質空間位阻,確保應用效果
標記原理

圖示:抗體Fc區(qū)域氨基酸與HRP上特定氨基酸通過交聯(lián)劑定向偶聯(lián)
產品組分
| 產品組分 | 80μg抗體規(guī)格 | 400μg抗體規(guī)格 | 4mg抗體規(guī)格 | 儲存條件 |
|---|
| 活化的HRP | 1管 | 5管 | 5管 | -20℃, 避光 |
| 標記緩沖液H | 5 mL | 5 mL | 5 mL | 4℃, 避光 |
| 抗體修飾試劑 | 60 μL | 60 μL | 60 μL×2支 | -20℃, 避光 |
| 50 KD超濾管 | 1套* | 1套* | 1套* | 室溫 |
| 封閉試劑 | 300 μg | 300 μg | 300 μg×4支 | -20℃, 避光 |
| DMSO(溶解封閉試劑) | 50 μL | 50 μL | 200 μL | -20℃, 避光 |
| HRP標記抗體保存液 | 1 mL | 1 mL | 5 mL | 2~8℃ |
| 建議標記抗體量 | 20~80μg/管 (推薦20μg) | 20~80μg/管 (推薦20μg) | 200~800μg/管 (推薦200μg) | - |
* 超濾管為一次性使用
** 不同規(guī)格按推薦抗體量標記效果最佳
標記步驟(適用于20~80μg抗體)
按照以下流程操作,可獲得最佳標記效果:
抗體超濾濃縮換液
取20μg抗體(純度>90%)加入超濾管,補滿標記緩沖液 → 14000×g離心5分鐘,棄濾液(重復1次去除雜質)→ 倒置濾芯,14000×g離心1分鐘收集抗體 → 補標記緩沖液調至1 mg/mL
注:若抗體濃度>2 mg/mL且無雜質(如PBS緩沖),直接稀釋至1 mg/mL
抗體修飾
按20μg抗體加0.5μL 抗體修飾試劑 → 混勻 → 37℃反應60分鐘
HRP-抗體偶聯(lián)
活化的HRP管加10μL標記緩沖液溶解 → 加入修飾后抗體溶液 → 37℃避光反應1.5小時(或4℃過夜)
封閉與純化
300μg封閉試劑 + 30μL DMSO溶解 → 按20μg抗體加0.6μL封閉液 → 37℃避光反應30分鐘 → 用50 KD超濾管,標記緩沖液超濾3~5次 → 回收純化后的HRP標記物
保存
加HRP標記抗體保存液調濃度≥0.2 mg/mL → 4℃避光保存(勿冷凍!有效期≥6個月)