產品簡介
乳酸脫氫酶活性測定試劑盒Lactate Dehydrogenase (LDH) Activity Assay Kit,也稱乳酸脫氫酶細胞毒性檢測試劑盒(LDH Cytotoxicity Assay Kit)或乳酸脫氫酶釋放檢測試劑盒(LDH Release Assay Kit)。細胞凋亡或壞死而造成的細胞膜結構的破壞會導致細胞漿內的酶釋放到培養(yǎng)液里,其中包括酶活性較為穩(wěn)定的LDH。通過檢測從質膜破裂的細胞中釋放到培養(yǎng)液中的LDH的活性,就可以實現對細胞毒性的定量分析。LDH釋放被看作細胞膜完整性的重要指標,并被廣泛用于細胞毒性檢測。
產品特點
可檢測的樣本類型豐富:本試劑盒可檢測細胞培養(yǎng)液、細胞裂解液等樣品中乳酸脫氫酶的活性,也常用于以LDH釋放為指標的細胞毒性檢測;同時,基于細胞總乳酸脫氫酶活性的檢測,本試劑盒也可以用于檢測細胞增殖和細胞毒性檢測。
檢測原理
在乳酸脫氫酶的作用下,NAD+被還原生成NADH,NADH和INT(2-p-iodophenyl-3-
nitrophenyl tetrazolium chloride)被硫辛酰胺脫氫酶(diaphorase)催化反應生成NAD+和強生色物甲臜(formazan),在490nm波長下產生吸收峰,從而可以通過比色來定量乳酸脫氫酶的活性。吸光度與乳酸脫氫酶活性成線性正相關。該酶聯反應原理的示意圖如下:

產品組分
產品名稱 | 包裝規(guī)格(100T) | 包裝規(guī)格(500T) | 保存方式 |
LDH釋放試劑 | 1.5ml | 7.5ml | -20℃ |
乳酸溶液 | 1ml/支,兩支 | 10ml | -20℃ |
酶溶液 | 1ml/支,兩支 | 10ml | -20℃,需注意避免反復凍融。 |
INT溶液(10×) | 0.2ml | 0.2ml | -20℃,需避光保存。 |
INT稀釋液 | 1ml/支,兩支 | 1ml/支,兩支 | -20℃ |
96 孔酶標板 | 1 板 | 5 板 | RT |
96 孔覆膜 | 2 張 | 10 張 | RT |
保存條件
未拆封的試劑盒可在 -20℃保存12個月。試劑盒解凍后可以短期2-8oC存放,2-3天內有效。
注意事項
1. 冷凍會使樣品中部分乳酸脫氫酶失活,4oC可放置2-3天。建議樣品準備好后盡量當天完成測定。
2. 如果檢測細胞培養(yǎng)液中的乳酸脫氫酶,由于血清含有乳酸脫氫酶,建議血清的使用濃度不要超過1%,并最好使用熱滅活血清。如果一定需要使用10%血清,在檢測時一定要設置沒有細胞,但加入了相同體積培養(yǎng)液的對照孔,以用于消除背景。
3. 細胞過度生長、密度過高、離心速度過大、培養(yǎng)箱內外溫差過大,都會造成細胞釋放乳酸脫氫酶增加。
4. 如果希望進行乳酸脫氫酶活性的絕對定量,用戶需自備乳酸脫氫酶標準品。
5. 本產品僅限于專業(yè)人員的科學研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內。
關鍵字: Lactate;Dehydrogenase;LDH;Activity;Assay;Kit;乳酸脫氫酶活性;試劑盒
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