人乳腺癌細胞穩(wěn)定表達熒光素酶
SK-BR-3+LUC
1970年G.Trempe和L.J.Old從胸水中建立了這株細胞。沒有病毒顆粒。超微結構特征包括微絲和橋粒,肝糖原顆粒,大溶酶體,成束的細胞質纖絲。SK-BR-3細胞株過表達HER2/c-erb-2基因產物。該細胞通過慢病毒轉染的方式攜帶Luc基因。細胞篩選:該細胞為穩(wěn)定轉染Luc的細胞,隨細胞傳代次數的增加,其Luc熒光強度會逐漸減弱。若實驗要求需要維持熒光強度,可以加入嘌呤霉素進行再次篩選。建議收到細胞后至少傳3代,凍存留種后再進行篩選。初次進行細胞篩選時,建議加入終濃度為1ug/ml嘌呤霉素的完全培養(yǎng)基維持培養(yǎng),若無細胞漂浮或者漂浮較少,即可更換為含2ug/ml嘌呤霉素的完全培養(yǎng)基繼續(xù)篩選,以此類推,至最高藥物濃度為5ug/ml。若篩選過程中,漂浮細胞大于60%,則停止篩選,換成正常培養(yǎng)基培養(yǎng),至細胞密度約80%,可繼續(xù)加入同濃度嘌呤霉素進行篩選。當加入5ug/ml嘌呤霉素時細胞正常增殖,可停止篩選,用不含藥完全培養(yǎng)基正常培養(yǎng)。
器官:乳腺;乳房,疾病:腺癌,取材轉移灶:胸水
貼壁細胞
上皮細胞樣
McCOY's 5A(含NaHCO3 2.2g/L)或DMEM(含NaHCO3 1.5g/L)+10%FBS+1%P/S
90%FBS+10%DMSO,現(xiàn)配現(xiàn)用
液氮保存
1:2-1:3
2-3 次/周
注意事項
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