小鼠腎癌細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)熒光素酶
RENCA+LUC
該細(xì)胞的生長繁殖模式精確模擬了人腎癌細(xì)胞,特別是在同時遷移至肺部和肝部等方面。該細(xì)胞不表達(dá)β-轉(zhuǎn)化生長因子II受體。該細(xì)胞通過慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶Luc基因。細(xì)胞篩選:該細(xì)胞為已經(jīng)構(gòu)建好穩(wěn)定轉(zhuǎn)染Luc的細(xì)胞,隨細(xì)胞傳代次數(shù)的增加,其Luc熒光強度會逐漸減弱。若實驗要求需要維持熒光強度,可以加入嘌呤霉素進行再次篩選。 建議收到細(xì)胞后至少傳3代,凍存留種后再進行篩選。初次進行細(xì)胞篩選時,建議加入終濃度為1ug/ml嘌呤霉素的完全培養(yǎng)基維持培養(yǎng),若無細(xì)胞漂浮或者漂浮較少,即可更換為含2ug/ml嘌呤霉素的完全培養(yǎng)基繼續(xù)篩選,以此類推,至最高藥物濃度為5ug/ml。若篩選過程中,漂浮細(xì)胞大于60%,則停止篩選,換成正常培養(yǎng)基培養(yǎng),至細(xì)胞密度約80%,可繼續(xù)加入同濃度嘌呤霉素進行篩選。當(dāng)加入5ug/ml嘌呤霉素時細(xì)胞正常增殖,可停止篩選,用不含藥完全培養(yǎng)基正常培養(yǎng)。
小鼠,腎
貼壁細(xì)胞
上皮細(xì)胞樣
RPMI-1640+10%FBS+1%P/S
90%FBS+10%DMSO,現(xiàn)配現(xiàn)用
液氮保存
1:2-1:3
2-3 次/周
注意事項
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