GC-2 SPd(ts)小鼠精母細(xì)胞系
英文名稱 | GC-2 SPd(ts):GC2SPdts | 規(guī)格 | 1×106 |
貨號 | XG-X3634 | 用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) |
基本特性:
該細(xì)胞系來源于一6周齡的雄性BALB/c小鼠 新鮮分離的精母細(xì)胞通過共轉(zhuǎn)染SV40大T抗原基因 (Psv3neo) 和溫度敏感的p53抑癌基因突變 (LTRp53cG9)，建立獲得GC-spd(ts) 細(xì)胞株。該細(xì)胞經(jīng)G418篩選，培養(yǎng)6個(gè)月并經(jīng)有限稀釋法形成單細(xì)胞克隆三次。目前，該細(xì)胞已喪失其分化潛能，處于減數(shù)分裂前期。細(xì)胞含有乳多空病毒（papovavirus）
細(xì)胞特性
1） 來源： 小鼠精母細(xì)胞；SV40大T抗原轉(zhuǎn)染
2） 形態(tài)：上皮細(xì)胞樣 貼壁生長
3） 含量：>1x10^6 細(xì)胞數(shù)
一、來源與構(gòu)建背景
起源與轉(zhuǎn)染方法
該細(xì)胞系來源于6周齡雄性BALB/c小鼠的新鮮精母細(xì)胞，通過共轉(zhuǎn)SV40大T抗原基因（pSV3neo溫度敏感型p53抑癌基因突變體（LTRp53cG9建立[][][]。轉(zhuǎn)染后經(jīng)G-418篩選6個(gè)月，并通過有限稀釋法克隆3次單細(xì)胞，最終獲得永生化細(xì)胞株。
關(guān)鍵基因修飾
SV40大T抗原：賦予細(xì)胞增殖能力，突破正常細(xì)胞分裂周期限制。
p53突變體：通過溫度敏感型設(shè)計(jì)（33℃活化、39℃失活），在特定條件下調(diào)控細(xì)胞周期檢查點(diǎn)。
二、細(xì)胞特性與培養(yǎng)條件
形態(tài)與生長特性
形態(tài)：上皮樣貼壁細(xì)胞，呈鋪展生長。
生長周期：倍增時(shí)間約24-48小時(shí)，推薦傳代比例1:2至1:5，密度達(dá)80%-90%時(shí)需傳代。
凍存特性：推薦凍存液90FB10DMSO，復(fù)蘇后存活率>90%。
培養(yǎng)體系
基礎(chǔ)培養(yǎng)基：DMEM或RPMI-1640，含10%胎牛血清（FBS）、1%青霉素-鏈霉素（P/S）。
培養(yǎng)環(huán)境：37℃、5CO、飽和濕度，部分文獻(xiàn)建議33℃培養(yǎng)以維持p53活性。
支原體檢測：常規(guī)檢測為陰性，需定期驗(yàn)證。
三、應(yīng)用領(lǐng)域
精子發(fā)生機(jī)制研究
模擬減數(shù)分裂前階段（premeiotiarrest），用于研究精子形成中的基因調(diào)控（如cAMP信號通路）和表觀遺傳修飾。
分析精母細(xì)胞凋亡與自噬的分子機(jī)制，例如通過Caspase-3/7活性檢測。
藥物篩選與毒性評估
作為睪丸毒性模型，評估化學(xué)物質(zhì)（如順鉑）對生殖細(xì)胞的影響。
篩選促精子發(fā)生藥物，如抗氧化劑（N-乙酰半胱氨酸）或生長因子（IGF-1）。
基因功能研究
構(gòu)建基因敲除/過表達(dá)模型，研究睪丸發(fā)育相關(guān)基因（如Stra8、Piwil2）的功能。
研究端粒酶活性與細(xì)胞永生化的關(guān)系。
公司出售的產(chǎn)品：
咖啡環(huán)（cyclamate）含量高效液相色譜法定量檢測試劑盒 | AF680標(biāo)記的細(xì)胞角蛋白19單克隆抗體 |
真菌/酵母細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激活性氧（ROS）光澤精化學(xué)發(fā)光法 | 激肽釋放酶3/舒血管素3抗體 |
冰凍切片抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）活性染色試劑盒 | PE標(biāo)記小鼠CD3e單克隆抗體 |
組織鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶（CALCINEURIN；PP2B）活性定磷比色法定量檢測試劑盒 | 同源盒蛋白D1抗體 |
動(dòng)物細(xì)胞/組織磷酸葡萄糖酸脫氫酶（phosphogluconate dehydrogenase；PGD）電泳分析試劑盒 | FAM154A蛋白抗體 |
蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒-LEPTIN | AF700標(biāo)記小鼠CD45R單克隆抗體 |
PAR-3蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒 | 膜相關(guān)蛋白17抗體 |
轉(zhuǎn)基因棉花MON531品系基因檢測試劑盒 | 登革熱病毒2糖蛋白NS1抗體 |
冰凍切片組織EGFR 蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒 | 胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2抗體 |
果菜抗壞血酸比色法定量檢測試劑盒 | 磷酸化5-脂氧合酶抗體 |
大鼠ERβ基因甲基化檢測試劑盒 | α肌萎縮糖蛋白2抗體 |
組織HHV6-B（HUMAN HERPESVIRUS 6-B）病毒 | 腺苷單磷酸活化蛋白激酶α1抗體 |
細(xì)胞SPHK2激酶活性比色法定量檢測試劑盒（510） | GC-2 SPd(ts)小鼠精母細(xì)胞系HLA DPB1抗體 |
組織半胱-12（CASPASE-12）活性熒光定量檢測試劑盒 | 乳糖神經(jīng)酰胺4-α-半乳糖基轉(zhuǎn)移酶抗體 |
RPMI 1640完全培養(yǎng)液（無抗生素） | 高爾基體卷曲螺旋蛋白1抗體 |
增強(qiáng)型HRP－DAB底物顯色試劑盒 | 轉(zhuǎn)鈷胺素蛋白2抗體 |
注意事項(xiàng)：
污染防控：細(xì)菌污染：培養(yǎng)液渾濁、變黃，需添加抗生素（如青霉素-鏈霉素），污染嚴(yán)重時(shí)丟棄。
霉菌污染：顯微鏡下可見絲狀/絮狀漂浮物，需徹底消毒培養(yǎng)箱（過氧乙酸擦拭+紫外線照射），污染細(xì)胞立即丟棄。
支原體污染：無明顯外觀變化，需定期用PCR或熒光法檢測，污染后可用支原體清除試劑處理。
操作規(guī)范：收到細(xì)胞后，先檢查包裝完整性及干冰狀態(tài)，鏡檢細(xì)胞形態(tài)并拍照記錄（40x、100x、200x）。
未開封細(xì)胞若污染或活性差（3天內(nèi)反饋），可申請重發(fā)；客戶操作失誤導(dǎo)致問題不重發(fā)。
運(yùn)輸與保存：干冰運(yùn)輸：凍存管含1×10? cells，收到后立即轉(zhuǎn)入液氮或-80℃冰箱。
常溫運(yùn)輸：T25培養(yǎng)瓶，收到后靜置3-4小時(shí)穩(wěn)定狀態(tài)，再換液或傳代。
關(guān)鍵字： GC-2 ;小鼠精母細(xì)胞系;GC-2 SPd(ts):GC2SPdt;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物專注于實(shí)驗(yàn)室和公共衛(wèi)生領(lǐng)域，利用互聯(lián)網(wǎng)、數(shù)據(jù)分析及自動(dòng)化技術(shù)，包括實(shí)驗(yàn)室固定資產(chǎn)、儀器設(shè)備、生物樣本、化學(xué)品、試劑、配件耗材、環(huán)境、儀器自動(dòng)化和高通量篩選等一體化綜合管理平臺。不斷為各行業(yè)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞生命學(xué)產(chǎn)品、技術(shù)服務(wù)、免疫學(xué)和分子學(xué)產(chǎn)品，截止至2024年5月，西格生物已為生命科學(xué)、檢驗(yàn)檢測、化工材料、科研院所、政府機(jī)構(gòu)多行業(yè)300余家知名客戶提供實(shí)驗(yàn)室完整解決方案。本著幫助用戶實(shí)現(xiàn)“讓科研場所更智能、讓科研人員更專注、讓科學(xué)服務(wù)更高效“的愿景，西格生物將繼續(xù)在實(shí)驗(yàn)室科研產(chǎn)品領(lǐng)域持續(xù)發(fā)力，更加重視本土化，建構(gòu)通用性高、適應(yīng)性好、模塊搭配靈活，能快速響應(yīng)客戶需求的產(chǎn)品。