檢測目的

本試劑盒用于定量檢測小鼠血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液及其他生物體液中的促黃體激素（LH）含量，適用于科研用途，不適用于臨床診斷。

實(shí)驗(yàn)原理

雙抗體夾心法：

采用抗小鼠LH單克隆抗體預(yù)包被酶標(biāo)板，形成固相抗體。

樣本中的LH與固相抗體結(jié)合后，加入生物素化抗小鼠LH抗體，形成“抗體-抗原-酶標(biāo)抗體”復(fù)合物。

辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的鏈霉親和素與生物素結(jié)合，催化底物TMB顯色，顏色深淺與LH濃度呈正相關(guān)。

終止反應(yīng)后，于450 nm波長測定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣本濃度。

試劑盒組成

96孔配置：

預(yù)包被酶標(biāo)板（96孔）

標(biāo)準(zhǔn)品（50 ng/瓶，2瓶）

酶標(biāo)抗體工作液（12 mL）

生物素化抗體工作液（12 mL）

10×標(biāo)本稀釋液（12 mL）

20×濃縮洗滌液（50 mL）

TMB底物溶液（12 mL）

終止液、封板膜、密封袋及說明書。

樣本要求

樣本類型：血清、血漿、細(xì)胞上清液、組織勻漿等。

處理建議：

避免反復(fù)凍融，離心去除顆粒物，2-8℃短期保存（≤24小時(shí)），-20℃或-80℃長期保存。

操作步驟

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋：按說明書梯度稀釋至工作濃度。

加樣：每孔加入樣本或標(biāo)準(zhǔn)品（100 μL），37℃孵育90分鐘。

洗滌：棄液后加入洗滌液，重復(fù)5次。

加酶標(biāo)抗體：每孔加入生物素化抗體（100 μL），37℃孵育60分鐘。

顯色：加入TMB底物（90 μL），避光反應(yīng)15-30分鐘。

終止與檢測：加入終止液（50 μL），立即測定450 nm OD值。

注意事項(xiàng)

試劑盒保存于2-8℃，使用前平衡至室溫。

避免交叉污染，不同批次試劑不可混用。

顯色時(shí)間需嚴(yán)格控制，終止后10分鐘內(nèi)完成檢測。

計(jì)算與結(jié)果

以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)、OD值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，通過四參數(shù)擬合方程計(jì)算樣本濃度。

技術(shù)參數(shù)

靈敏度：通常≤0.1 ng/mL。

檢測范圍：1-50 ng/mL（具體以實(shí)際標(biāo)準(zhǔn)曲線為準(zhǔn)）。

精密度：板內(nèi)變異系數(shù)（CV）<10%，板間CV<15%。

公司正在出售的產(chǎn)品